藥物轉運體和代謝酶聯合突變對那格列奈藥效學的影響

榮麗紅

【摘 要】 目的： 研究藥物轉運體SLO1B1 521T>C和藥物代謝酶CYP3A4*18的聯合突變對口服降糖藥那格列奈藥效學的影響。方法 ：對21名健康志愿者（6位SLCO1B1 521TT/CYP3A4基因型，7位SLCO1B1 521TT / CYP3A4*18基因型，3位SLCO1B1 521TC/CC/CYP3A4基因型，5位SLCO1B1 521TC/ CYP3A4*18基因型）單次口服120mg那格列奈，分別在給藥前和給藥后0.25，0.5，0.75，1，1.5，2，3，4，6，8h采血，用自動生化分析儀進行血糖濃度分析。結果：單一的SLO1B1 521T>C多態和CYP3A4*18多態對于那格列奈的降血糖效果與野生型對照組沒有統計學差異。聯合突變組在最大血糖升高值，0-4h和0-8h的血糖濃度平均變化值與野生型組不存在顯著差異，但是在最大血糖降低值與野生型對照組和SLO1B1 521T>C突變組存在顯著差異（P=0.034 P= 0.041）。 結論：在健康受試者， SLO1B1和CYP3A4聯合突變對那格列奈降血糖效果產生顯著影響；但是在2型糖尿病病人中，有關影響需要進一步的研究。

【關鍵詞】 那格列奈 SLO1B1 CYP3A4，多態性 血糖濃度

【中圖分類號】 R917 【文獻標識碼】 A 【文章編號】 1671-8801（2014）03-0308-02

那格列奈是一種新型的快速胰島素促泌劑[1]，在肝臟可被CYP3A4和CYP2D6.所代謝，但其中CYP3A4的作用較突出[2]。研究表明，CYP3A4具有遺傳多態性，CYP3A4*18是一種新的突變單倍型，文獻報道CYP3A4*18基因型者口服那格列奈后，藥物清除率等藥動學參數較之于野生型個體顯著降低；但在一項藥效學研究中發現，服用那格列奈后，雖然CYP3A4*18個體AUC等藥動學指標與野生型存在差異，但血中葡萄糖，胰高血糖素，胰島素水平在CYP3A4不同基因型之間卻沒有顯著差異[3]。有機陰離子轉運體1B1（OATP1B1， 也稱 OATP-C、OATP2），是攝入型轉運體中的一大類，可吸收和轉運多種內源性物質和藥物進入肝細胞進而代謝和清除之，OATP1B1擁有非常廣泛的底物，包括降糖藥和降脂藥[4]； 該基因具有高度多態性，其中SLCO1B1 521T>C，也就是 *5， *15 或 *17單倍型，有研究發現此突變引起那格列奈的血漿濃度顯著升高，這個結果揭示OATP1B1介導的主動轉運可能在肝臟對那格列奈的攝取中發揮重要作用。

那格列奈最為顯著的效應是降低餐后血糖，SLCO1B1是轉運藥物進入肝細胞的主要載體而CYP3A4是那格列奈的主要代謝酶，藥動學的差異在一定程度上既與這個轉運系統的多態性表達有關也與藥物代謝酶的多態性有關[5]，前已述 SLCO1B1 和 CYP3A4多態性都可以影響那格列奈的藥動學參數，但是SLCO1B1 521T>C以及SLCO1B1 521T>C與CYP3A4*18的聯合突變對那格列奈的療效是否產生影響國內目前尚無系統的相關研究。我們的研究旨在查明SLCO1B1 521T>C ，CYP3A4*18突變以及二者的聯合突變對那格列奈的引起的血糖降低在不同基因型個體是否存在差異。

1 方法

1.1 實驗對象

我們對322名健康志愿者進行了SLCO1B1 521T>C ，CYP3A4*18突變基因型的篩查，所有受試者無心、肝、腎、消化道、代謝異常、神經系統疾病等病史，無藥物過敏史，經生化和實驗室檢查未發現異常且在參與臨床試驗前均簽署了知情同意書，告知實驗前兩周及實驗期間不能服用其它任何藥物，實驗期間禁煙、酒及含咖啡等飲料。最終21人入選進入臨床藥效學研究。基因組DNA提取采用標準酚-氯仿法，SLCO1B1 521T>C ，CYP3A4*18多態性的基因分型采用ARMS-PCR和PCR-RFLP（聚合酶鏈式反應-限制性片段長度多態性）方法。SLCO1B1 521TT/CYP3A46人， SLCO1B1 521TT/ CYP3A4*18 7人， SLCO1B1 521TC/CC/CYP3A4 （521TC， 521CC）3人， SLCO1B1 521TC/CYP3A4*18 5人。空腹12小時后，單次給與120mg那格列奈，100ml溫水送服，15分鐘后，所有受試者統一給標準餐，10分鐘后進餐完畢，告知靜坐3小時45分鐘，之后再給標準餐；分別在給藥即刻、0.25、0.75、 1、 1.5、 2、3、 4、 6、 8小時抽取5 mL血樣，用自動生化分析儀（東京日立公司7170S）進行血糖濃度分析。

1.2 藥效學分析

那格列奈的藥效學以血糖平均值，最大血糖升高值和最大血糖降低值表示，均值改變由時間濃度曲線中按照相應的間隔劃分曲線下凈面積獲得。

1.3 統計學分析

表中所列數據均以均數±標準差表示。所有數據運用SPSS11.0軟件進行分析。不同基因型者藥效學差異采用兩兩比較單因素方差分析。P < 0.05被認為有統計學意義。

2 結果

入選受試者基本情況 .每個基因型組間在年齡，身高，體重，肥胖指數等方面無差異，我們發現，SLCO1B1，CYP3A4單個突變對那格列奈引起的血糖降低值無顯著影響，（表1）.聯合突變可以引起血糖的明顯改變（表2）在四種聯合突變基因型個體中，最大血糖升高值和均值改變未發現明顯差異。

3 討論

2型糖尿病的發病機制被認為與胰島素抵抗，胰島素分泌機制損傷以及肝糖輸出量增加有關。2型糖尿病的進展和餐后糖代謝調節失靈密切相關，新型的胰島B細胞分泌激動劑，包括那格列奈，近年來已經逐漸成為治療2型糖尿病的有效藥物，無論是餐中還是餐后服用都可有效增加胰島素的分泌，從而降低餐后血糖。SLCO1B1多態性與那格列奈的藥動學密切相關，那么SLCO1B1 和 CYP3A4突變就可能共同成為那格列奈體內血藥濃度的獨立預測因子[6]，所以在本研究中，我們把視角轉向SLCO1B1 和 CYP3A4的聯合突變，探討這些變異是否會影響那格列奈的藥效學如血糖降低等作用，結果發現，口服那格列奈后，單一的SLCO1B1 521T>C和CYP3A4*18突變都不能改變血糖降低水平，最大血糖升高值和均值改變在四種聯合突變的不同基因型個體間沒有差異，但是聯合突變組的最大血糖降低值與野生型對照組和SLO1B1 521T>C突變組存在顯著差異（P=0.034 ，P=0.041）。本研究提示在臨床用藥過程中，聯合突變基因型個體服用那格列奈后，最大血糖降低值偏高，尤其是SLCO1B1 521TC/CYP3A4*18 基因型個體血糖降低幅值較大，因此發生低血糖反應的機會可能與其他基因型者存在差異，應該給與足夠重視。

參考文獻

[1]詹偉彬，黃公才.那格列奈治療新診斷2型糖尿病臨床效果觀察. 實用醫學雜志，2007，23（8）：1240-41

[2]Kirchheiner J， Roots I， Goldammer M， et al. Effect of Genetic Polymorphisms in Cytochrome P450 （CYP） 3A4 and CYP2C8 on the Pharmacokinetics of Oral Antidiabetic Drugs. Clin Pharmacokinet， 2005， 44 （12）：1209-1225.

[3]Niemi M， Backman JT， Kajosaari LI， et al. Polymorphic organic anion transporting polypeptide 1B1 is a major determinant of repaglinide pharmacokinetics. Clin Pharmacol Ther， 2008， 77（6）：468-478.

[4]Ortiz MG， Salazar EH， Abundis EM， Effect of the administration of a single dose of nateglinide on insulin secretion at two different concentrations of glucose in healthy individuals. Journal of Diabetes and Its Complications， 2005， 19：356– 360.

[5]Zhang W， He YJ， HanCT， et al， Effect of SLCO1B1 genetic polymorphism on the pharmacokinetics of nateglinide. Br J Clin Pharmacol， 2008， 62（5）： 567–572.

[6]Kirchheiner J， Meineke I， Muller G， et al. Influence of CYP3A4 and CYP2D6 Polymorphisms on the Pharmacokinetics of Nateglinide in Genotyped Healthy Volunteers. Clin Pharmacokinet 2007， 43 （4）： 267-278.