宮頸癌中COX—2的表達與HPV16感染的關系

李芳

【摘要】目的： COX-2在宮頸鱗狀細胞癌變中的表達及與HPV16感染的關系進行探討。方法：采用EliVisionTM plus兩步法，檢測COX-2在42例宮頸鱗狀細胞癌、17例正常宮頸鱗狀上皮的表達。原位雜交技術檢測宮頸鱗狀細胞癌、正常宮頸鱗狀上皮的表達。 結果：（1）COX-2在宮頸鱗狀細胞癌和正常宮頸上皮二者之間的陽性表達率存在明顯差異（P<0.01）。（2）HPVl6DNA 在宮頸鱗狀細胞癌、正常宮頸鱗狀上皮兩組存在著較大的差異<0.01）。（3）HPv感染和COX-2蛋白表達在宮頸鱗狀細胞癌表達呈正相關，在正常宮頸上皮組織中無相關性。結論： COX-2在正常宮頸上皮和宮頸鱗狀細胞癌中表達存在明顯差異。與此同時，COX-2的與HPV協同作用和蛋白表達上調對于治療中晚期宮頸鱗狀細胞癌極為有效。

【關鍵詞】宮頸鱗狀細胞癌；COX-2；HPV16感染

【中圖分類號】R 737. 33 【文獻標識碼】B【文章編號】1004-4949（2014）03-0105-01

宮頸鱗狀細胞癌是一種較為常見的女性惡性腫瘤，其發生發展通常是由多種因素導致。環氧合酶-2（COX-2）在多種腫瘤細胞和腫瘤組織中都被普遍過表達，是一種典型的限速酶，由催化前列腺素合成。Masferrer [1]等發現，COX-2高表達很容易導致癌癥發生。從目前來看，HPV（人類乳頭瘤狀病毒）是高危因素，特別是HPV16/18[3]。本文就COX-2在宮頸鱗狀細胞癌中的表達及與HPV16感染的關系進行探討。

材料與方法

1.材料：選取2011—2012年保定市第二醫院醫院病理科所保存的59例石蠟包埋標本。其中，42例為宮頸鱗狀細胞癌組織，17例非腫瘤患者的正常宮頸鱗狀上皮為對照組。標本切片厚度4μm，石蠟包埋， 4%中性甲醛固定。

2.免疫組織化學：采用EliVisionTM plus兩步法。福州邁新試劑公司生產的DAB顯色試劑盒、EliVisionTM plus檢測試劑盒、兔抗人COX-2單克隆抗體。操做步驟主要參照試劑盒說明書進行。

3.原位雜交主要步驟：切片經烤片后脫蠟；微波加熱脫水干燥；每張切片滴加25山地高辛標記HPVl6探針，并加蓋玻片；95℃變性8 min于37℃濕盒（含雜交增強液）中孵育過夜（<16 h）；加50山抗地高辛抗體，37℃濕盒中孵育30 min后加二抗；DAB顯色；蘇木精對比染色，中性樹膠封片。

4.結果判斷：染色結果由兩位專業的病理專家進行評估。參照Kim YB[4]等的方法來改進染色結果，半定量的綜合計分根據胞漿陽性染色強度和細胞百分比進行，分為2組（-，+）。對陽性細胞百分比進行觀察，陽性細胞百分比≥75%計4分，陽性細胞百分比51～75%計3分，陽性細胞百分比26～50%計2分，陽性細胞百分比≤25%計1分，無陽性細胞計0分；染色強度按照所呈現出來的染色計分，3分為深褐色， 2分為棕黃色，1分為淡黃色，0分為無著色；將著色強度+陽性細胞百分比的計分進行相加，≥3分為陽性（+），0～2分為陰性（-）。

5.統計學處理：采用SPSS 14.0統計軟件。

結果

1.COX-2的表達：在正常宮頸鱗狀上皮中，COX-2為陰性表達（0/17）。宮頸鱗狀細胞癌中，COX-2的陽性表達率為57.14%（24/42）。宮頸鱗狀細胞癌和正常宮頸上皮二者之間的陽性表達率存在明顯差異（P<0.01）。

2.HPVl6DNA的表達：在宮頸鱗狀細胞癌、正常宮頸鱗狀上皮中，HPV l6DNA的陽性表達率分別為78.57%（33/42）、17.65%（3/17）。兩組存在著較大的差異 （P<0.01）。

3.HPV l6DNA和COX-2的相關性：在42例宮頸鱗狀細胞癌中，24例共同表達； 17例宮頸低級別上皮內瘤變中，有2例HPVl6DNA和COX-2共同表達。相關分析表明，HPv感染和COX-2蛋白表達在高級別宮頸鱗狀細胞癌和上皮內瘤變呈正相關，在正常宮頸上皮組織中無相關性。

討論

Cox-2在正常組織不表達，但是在受到促瘤劑、細胞因子、生長因子的刺激之后，會出現較大的表達，屬于典型的誘導型酶 [5]。我們發現COX-2在正常宮頸鱗狀上皮呈陰性表達，而在和宮頸鱗狀細胞癌中COX-2陽性表達率明顯增高。這表明COX-2在宮頸鱗狀細胞癌形成中起到重要作用。同時，原位雜交研究結果顯示，在正常宮頸鱗狀上皮到宮頸鱗狀細胞癌，HPVl6DNA的陽性表達率遞增較為明顯， HPV感染可以充分發揮出其較為有效的作用。與此同時，COX-2的與HPV協同作用和蛋白表達上調對于治療中晚期宮頸鱗狀細胞癌極為有效。

參考文獻

[1]Masferrer JL，et al.Antiangeogenic and anti-tumor activities of COX-2 inhibibrs[J].Cancer Res，2000；60（5）：1306-1311

[2]李寶康，趙純全.病毒感染與宮頸癌的相關性研究進展[J].重慶醫學，2010，36（5）；476-478

[3]薛景，余文菊.宮頸癌和宮頸上皮內瘤變組織中HPV16/18感染與Ki-67、P16表達的關系[J].浙江實用醫學，2010，14（2）：89-106

[4] Kim YB， et al. COX-2 expression in squamous cell carcinoma and adenocarcinoma of the uterine cervix.Int J Radiat Oncol Biol Phys， 2004， 60（3）：822-829

[5]徐萍，榮風年.COX-2、MMP-9在宮頸癌及宮頸上皮內瘤變組織中表達及臨床意義[J].現代腫瘤醫學，2008，16（8）；1385-1387

[6] Boyer SN，Wazer DE，Band V. E7 protein of HPV16 induces degration of retinoblastoma protein through the ubiquitin proteasoma pathway.Cancer Res，1996，56（20）：4620-4624