高效液相色譜法測定復方鋅布顆粒中馬來酸氯苯那敏含量

黃玉昌 ，曾慶偉，吳芳花，鄺美婷

（1．廣東省河源市食品藥品檢驗所，廣東 河源 517000； 2．廣東醫學院，廣東 東莞 523808）

復方鋅布顆粒主要成分是葡萄糖酸鋅、布洛芬和馬來酸氯苯那敏。該藥在臨床上為感冒用藥類非處方藥，用于治療普通感冒或流行性感冒引起的發熱、頭痛、鼻塞等癥[1]。其中，馬來酸氯苯那敏為抗組胺藥，能減輕由感冒或流感引起的鼻塞、流涕、打噴嚏等癥狀。該藥的現行檢驗依據為國家藥品標準[2]，用紫外可見分光光度法測定馬來酸氯苯那敏含量[3]。但在實際操作中發現，試驗中所用的試劑苯有揮發性、高毒性與致癌性，一旦吸入，易致呼吸困難，對人體危害極大；且試驗流程復雜，花費時間長，測得的試驗結果偏差也大。筆者采用高效液相色譜法對該藥中的馬來酸氯苯那敏含量進行測定，結果樣品處理簡單，檢測方法靈敏度高、誤差小、重復性好、專屬性強。

1 儀器與試藥

LC－20AT型高效液相色譜儀(日本島津，L20114916219AE)，SPD－M20A型檢測器(L20154908803AE)，CP225D型電子分析天平(51061464)，Intersil ODS－SP型(十八烷基硅烷建合硅膠柱，C ／N:5020－02746，S／N:OAI92654）。馬來酸氯苯那敏對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號為100047－200606）；復方鋅布顆粒（海南先聲藥業有限公司，規格為每包含葡萄糖酸鋅0．1 g，布洛芬 0．15 g，馬來酸氯苯那敏 2 mg，批號分別為 09－120701，09－120706，09－120710）；乙腈（美國 Honeywell Burdick＆ Jackson）為色譜純，其余試劑均為分析純；純化水。

2 方法與結果

2．1 色譜條件及系統適用性試驗

色譜柱：十八烷基硅烷建合硅膠柱(250 mm×4．6 mm，5 m)；流動相：磷酸鹽緩沖液（取磷酸二氫銨 11．5 g，加水適量使溶解，加磷酸 1 mL，用水稀釋至 1 000 mL）－乙腈（80∶20）；流速：1．0 mL ／min；柱溫：40 ℃ ；檢測波長：262 nm；取樣量：10 μL。精密量取對照品溶液10 μL注入高效液相色譜儀，理論板數按氯苯那敏峰計算為13 892，與馬來酸峰分離度大于1．5。色譜圖見圖1。

圖1 高效液相色譜圖

2．2 溶液制備

取馬來酸氯苯那敏對照品適量，精密稱定，置容量瓶中，加流動相溶解并稀釋制成質量濃度為0．08 g／L的對照品溶液，搖勻，即得對照品溶液。精密稱取本品適量（約相對于馬來酸氯苯那敏2 mg），置25 mL容量瓶中，加流動相適量，振搖使馬來酸氯苯那敏溶解，用流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，作為供試品溶液。按處方比例取除馬來酸氯苯那敏外的其余組分，按供試品制備工藝和供試品溶液制備方法，制成陰性對照品溶液。

2.3 方法學考察

專屬性試驗：按處方比例，制成缺馬來酸氯苯那敏的陰性對照品溶液，濾過，精密量取10 μL注入高效液相色譜儀，測定，結果見圖1 A。結果表明，陰性樣品、流動相在馬來酸氯苯那敏色譜相應位置上無干擾峰出現，說明處方中其他成分對測定結果無影響，故本品用此色譜條件測定無干擾。

線性關系考察：精密稱取馬來酸氯苯那敏對照品適量，用流動相溶解并稀釋成質量濃度為0．8 g／L的對照品溶液。分別精密量取適量，用流動相稀釋成質量濃度分別為 0．008，0．04，0．08，0．4，0．8 g／L 的對照品溶液。分別精密量取上述溶液各 10 μL 注入高效液相色譜儀，按擬訂色譜條件分別測定，以峰面積（Y）對質量濃度（X）作線性回歸，得回歸方程 Y＝8．9×106X－8 834．7，r＝1．000 0。結果表明，馬來酸氯苯那敏質量濃度在0．008 415～0．841 5 g／L范圍內與峰面積呈良好線性關系。

精密度試驗：取線性試驗項下質量濃度為0．008 g／L的對照品溶液，連續進樣6次。結果的 RSD為0．04%，表明儀器精密度良好。

重復性試驗：取同一批（批號為09－120706）樣品 6份，照2．2項下方法制備供試品溶液，依法測定其含量。結果含量平均值為98．82%，RSD為0．74%，表明方法重復性良好。

穩定性試驗：取上述同一供試品溶液（質量濃度約為0．08g／L），分別于 0，1，4，8，16，24 h 時在擬訂色譜條件下進樣測定。結果峰面積值基本無變化，RSD為0．64%，表明供試品溶液在24 h內穩定。

加樣回收試驗：取已知含量的樣品（批號為09－120706）9份，分別精密加入對照品適量，按擬訂色譜條件測定，計算回收率。結果見表1。

表1 馬來酸氯苯那敏加樣回收試驗結果（n＝9）

2．4 樣品含量測定

按擬訂方法對3個批次的樣品進行含量測定，每個樣品平行測定 2次，取平均值。結果批號為 09－120701，09－120706，09－120710的3批樣品中馬來酸氯苯那敏含量分別為標示量的97．0% ，97．8% ，98．0% 。

3 討論

取馬來酸氯苯那敏（0．08 g／L）對照品溶液在 200～300 nm波長內掃描，結果在262 nm波長處有最大吸收，且吸收光譜曲線較平滑，參考文獻[3]，選擇262 nm作為測定波長。試驗過程中發現所用高效液相色譜儀對溫度較敏感，在天氣轉冷情況下，柱壓增大，儀器警示報停，阻礙試驗繼續進行，故本研究提高柱溫至40℃，同時通過對比各種柱溫，結果無顯著性差異。用超聲、振搖等不同方式對樣品進行提取，結果差異無顯著性，參考文獻[3－6]，選擇振搖提取方式。本研究用磷酸鹽緩沖液（取磷酸二氫銨11．5 g，加水適量使溶解，加磷酸1 mL，用水稀釋至1 000 mL）－乙腈（80∶20）代替原來的氯仿作為提取溶劑，試劑更環保，提取步驟簡單，結果更準確可靠。

參考文獻：

[1]吳 琳．復方鋅布顆粒劑撲爾敏含量測定方法的比較[J]．中華中西醫學雜志，2008(8):75－76．

[2]WS－422(X－355)－2002，國家食品藥品監督管理局藥品標準[S]．

[3]國家藥典委員會．中華人民共和國藥典(二部)[M]．北京：中國醫藥科技出版社，2010:48－50．

[4]孫素芳，劉國瑞，王 ，等．馬來酸氯苯那敏片的HPLC測定[J]．中國醫藥工業雜志，2006，37（9）：627 － 629．

[5]徐 燕，劉 峰，徐曉霞，等．以HPLC測定馬來酸氯苯那敏含量的方法中馬來酸峰及氯苯那敏峰定位的問題[J]．四川生理科學雜志，2008，30(3):110 － 111．

[6]馬春婷，李紅艷，鄧智懷.高效液相色譜法測定咳特靈片中馬來酸氯苯那敏含量[J]．中國藥業，2008，17（15）：39 －40．