血管內皮生長因子在乳腺癌表達的作用及意義*

劉春富 ，李 衛 ，許 軍 ，宮金偉

（1.哈爾濱醫科大學附屬第四醫院普外科，黑龍江 哈爾濱 150001；2.哈爾濱市第一人民醫院骨科，黑龍江 哈爾濱 150001）

血管生成是腫瘤生長和轉移的關鍵步驟［1］，目前所知血管內皮生長因子（VEGF）是腫瘤血管生成過程中作用最強、特異性最高的促血管生長因子。在大多數實體瘤組織中VEGF呈高水平表達，并與腫瘤的生長及轉移密切相關［2－3］。筆者以人類乳腺癌為觀察材料，應用免疫組織化學檢測法，分析VEGF在乳腺癌組織中的表達情況，以探討VEGF在乳腺癌組織中的表達與腫瘤臨床和病理的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2004年6月至2008年8月我院臨床醫院手術切除乳腺癌蠟塊標本65例。患者均為女性；年齡25～77歲，平均53歲；術前均未經任何抗癌治療；乳腺癌按世界衛生組織（WHO）1998年分類標準進行病理分型，導管內癌23例，浸潤性導管癌20例，髓樣癌10例，腺癌8例，濕疹樣癌2例，鱗狀細胞癌2例；組織學分級，Ⅰ級18例，Ⅱ級22例，Ⅲ級25例；有淋巴結轉移46例，無淋巴結轉移19例；腫瘤大小不超過3 cm 47例，大于3 cm 18例。每例標本均收集其相應的癌旁組織作對照組織。

1.2 材料與方法

應用鏈霉素抗生素蛋白－過氧化酶（S－P）免疫組化技術檢測VEGF，每例標本做4μm厚的切片，腫瘤切片進行高壓抗原修復，DAB顯色，并以PBS緩沖液代替第一抗體做陰性對照，以血管內皮細胞著色為陽性對照。VEGF單克隆抗體購自上海長嘉生物技術有限公司，S－P免疫組化試劑盒和DAB試劑盒均購自福州邁新生物技術開發公司。

1.3 陰陽性結果判定標準［4］

以癌細胞胞漿或細胞核呈黃色或棕黃色為陽性，每張切片由2名病理醫師雙盲觀測5個具有代表性的高倍視野，每個視野計數200個腫瘤細胞，依據鏡下陽性染色細胞占癌細胞總數的百分率綜合判定。陰性（－）：無棕黃色染色或陽性細胞數平均少于10%；陽性（＋）：陽性細胞數平均大于10%。

1.4 統計學處理

應用 χ2檢驗和相關分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

65例乳腺癌組織中VEGF陽性表達率為78.46%（51／65），VEGF陽性染色部位主要為細胞質及細胞膜，腫瘤周邊以陽性為主，侵襲緣尤為明顯（圖1）。詳見表1。

圖1 VEGF蛋白位于乳腺癌細胞漿呈棕黃色顆粒陽性（×400）

表1 VEGF表達與乳腺癌臨床病理特征的關系

3 討論

乳腺癌的生長和轉移是一個復雜的過程，其中血管生成是癌腫物生長中的一個重要事件，腫瘤在表現其生長、轉移等生物學行為時與其中的微血管增生有密切關系，無論原發性或轉移性腫瘤，其持續生長都必須依賴于新生血管的形成［5］。目前發現，VEGF是可以特異地促進血管內皮細胞生長的一種多功能的細胞因子，可表達人體的多個正常組織及絕大多數的腫瘤組織［6］。VEGF作為腫瘤組織中最主要的促血管生成因子，不僅與乳腺癌血管發生和增殖有關，并直接與其浸潤、轉移有關［7］。黃選東等［8］用免疫組化RT－PCR法和S－P法檢測42例乳腺癌和相應正常乳腺組織中VEGF的表達，結果顯示，42例乳腺癌組織中VEGF陽性表達明顯高于正常乳腺組織。劉蘭芳等［9］認為，VEGF的表達與組織學分級呈正相關，隨著組織學分級的增高，VEGF陽性率也升高；李日樂等［10］采用免疫組化檢測VEGF在101例浸潤性乳腺癌組織中的表達，結果顯示，乳腺癌組織中的VEGF表達與組織分化、淋巴結轉移、遠處轉移及早期死亡密切相關。劉鵬等［11］采用免疫組織化學檢測109例乳腺癌組織中VEGF的表達情況，結果顯示，VEGF強表達組淋巴結轉移率高及病理分級也高。本試驗結果顯示，乳腺癌組織中VEGF表達陽性率明顯高于其癌旁正常組織；Ⅲ級乳腺癌組織中VEGF表達陽性率明顯高于Ⅰ～Ⅱ級乳腺癌組織，說明VEGF的表達與乳腺癌的分級密切相關。研究結果與相關文獻報道一致。本試驗還發現VEGF表達與乳腺癌的淋巴結轉移情況相關，伴有淋巴結轉移的乳腺癌組織中VEGF陽性表達率高，其原因可能是VEGF通過一系列復雜的機制誘導血管的形成，為腫瘤的生長提供充足的營養，從而促進腫瘤體積增大。Ohta等［12］認為，VEGF除了促進血管內皮細胞增殖外，對淋巴管內皮細胞同樣具有促分裂和增殖作用，誘導“淋巴管生成”，有利于腫瘤細胞浸潤淋巴管，促進腫瘤向淋巴結轉移。本試驗結果表明，乳腺癌組織中的VEGF表達與腫瘤生長和浸潤以及淋巴結轉移密切相關。

綜上所述，VEGF可促進乳腺癌的浸潤和轉移，在乳腺癌的發展、轉移中起重要作用，檢測VEGF的表達可作為乳腺癌惡性程度、浸潤轉移等生物學行為的參考指標。

參考文獻：

［1］Folkman J.What is the evidence that tumor are angiogenesis dependent［J］.JNatl CancerInstl，1990，82（1）：4.

［2］ Nagata S，Golstein P.The Fas death factor［J］.Science，1995，267（5203）：1449－1456.

［3］ Pamey IF，Hao KC.Glioma immunology and immunotherapy［J］.Neurosurgery，2000，460（4）：778 － 791.

［4］曾谷清，方松清，劉 彥，等.血管內皮生長因子在乳腺癌組織中的表達及其臨床意義［J］. 南華大學學報：醫學版，2003，31（3）：269 －271.

［5］張文江，劉愛東，龐久玲，等.血管內皮生長因子在乳腺癌中的表達及其意義［J］. 臨床醫學，2007（4）：43 －44.

［6］張 曉，徐文華，葛銀林，等.VEGF基因特異性，siRNA轉染后對人乳腺癌細胞增殖和凋亡的影響［J］.細胞與分子免疫學雜志，2007，23（1）：14 － 17.

［7］廖曉鋒.血管內皮生長因子與肝細胞癌［J］.國外醫學：外科學分冊，2001，28（2）：68 －70.

［8］黃選東，周雪瑞，沈 陽，等.乳腺癌VEGF的表達與腫瘤生物學特性的關系［J］. 臨床腫瘤學雜志，2005，10（6）：625 －630.

［9］劉蘭芳，申興斌，趙曉明，等.乳腺浸潤性導管癌血管內皮生長因子和雌激素、孕激素受體的表達及意義［J］.陜西醫學雜志，2005，34（3）：295－297.

［10］李日樂，田明銘，湯如勇.乳腺癌血管內皮生長因子的表達及意義［J］.中國癌癥雜志，1998，8（3）：163 －165.

［11］劉 鵬，孫 慧，寧連勝，等.血管內皮生長因子與乳腺癌臨床病理因素及預后的關系［J］. 天津醫科大學學報，2002，8（2）：144 －146.

［12］Ohta Y，Watanabe Y，Murakami S，etal.Vascular endothelial grow th factor and lymph nodemetastasis in primary lung cancer［J］.Br JCancer，1997，76（8）：1041 － 1045.