益精靈口服液大鼠長期毒性實驗研究

王林麗，李卓恒，呂金勝，盧來春

（中國人民解放軍第三軍醫大學大坪醫院藥學部，重慶 400042）

益精靈口服液根據中醫藥理論組方原則，以何首烏、枸杞子、菟絲子、懷牛膝、補骨脂、當歸、茯苓、陳皮組方，方中藥材大多具有增強免疫、改善記憶、營養神經、延緩衰老等作用。為給臨床安全用藥提供科學依據，筆者采用益精靈口服液對大鼠進行了灌胃30 d的毒性試驗研究，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 試藥與動物

益精靈口服液（由中國人民解放軍第三軍醫大學第三附屬醫院提供，批號為 101216，規格為每支 10 mL）。SD大鼠，體重（117±6）g，由中國人民解放軍第三軍醫大學大坪醫院實驗動物中心提供，動物受試環境為中國人民解放軍第三軍醫大學大坪醫院實驗動物中心，試驗設施使用合格證號SYXK－（軍）SYXK－（軍）2010－032，動物質量合格證號 SCXK － （軍）2010－008。飼料、飲水和墊料均符合試驗動物質量控制標準。

1.2 試驗動物分組及給藥方法［1］

SD大鼠，先留察1周，然后選出健康大鼠80只益精靈口服液，隨機分為4組，每組雌雄各10只。將4組大鼠隨機分為對照組及益精靈口服液低劑量［0.5 mL／（kg·d）］組、中劑量［2.5mL ／（kg·d）］組、高劑量［5mL ／（kg·d）］組，分別相當于臨床患者每日用量的1，5，10倍［按照臨床人體用藥30mL／d，成人體重以 60 kg／d 計算，相當于 0.5mL ／（kg·d）］服用量，連續灌胃30 d，對照組采用等量生理鹽水灌胃。

1.3 檢測指標［2］

每周稱量體重1次，并根據體重變化調整給藥量，于每日晨給藥，給藥前12 h禁食不禁水，給藥后觀察記錄動物的飲食、糞便、行為等一般狀態。給藥30 d后各組隨機處死雌雄大鼠各5只，取尾靜脈血進行血常規檢查，包括測定血紅蛋白（Hb）、白細胞計數（WBC）、紅細胞計數（RBC）；血液生化指標檢查，包括天門冬氨酸氨基轉移酶（AST）、丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、總膽紅素（TBil）；并取大鼠的心、肝、肺、腎作組織病理學檢查。其余大鼠停藥繼續喂養觀察10 d，于停藥后第11天處死作組織病理學檢查。

1.4 統計學處理

采用SPSS13.0統計軟件，組間兩兩比較采用t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 一般狀況

試驗期間有個別大鼠死亡，其中對照組無大鼠死亡，低、中、高劑量組各死亡1只，死亡率均為5.00%，經解剖未見異常，低、中、高劑量組大鼠每次給藥后其攝食飲水、大小便、活動情況均未見異常。結果表明，各組動物的死亡并無劑量反應關系，經解剖證實應屬自然疾病或其他原因所致。

2.2 體重增長

對照組和各試驗組大鼠每給藥7 d后稱重1次，平均體重變化見表1。可見，各組平均體重均有增長，但各劑量組的平均體重變化與對照組比較，差異無統計學意義。

表1 各組大鼠平均體重變化比較（ ± s，g，n ＝20）

表1 各組大鼠平均體重變化比較（ ± s，g，n ＝20）

組別 給藥前7 d 14 d 21 d 30 d對照組低劑量組中劑量組高劑量組117.05±3.73117.70±3.48117.55±3.65119.20±3.43118.15±3.17118.95±3.19118.00±3.09119.00±3.45118.55±1.76118.55±3.30117.85±2.99119.15±2.94118.10±2.27118.95±2.87117.65±3.50119.30±3.18118.65±2.89118.90±3.13118.40±3.02119.10±3.13

2.3 肝腎功能生化指標

結果見表2。各劑量組主要肝腎功能生化指標與對照組比較，差異無統計學意義。

表2 各組大鼠主要肝腎功能生化指標比較（ ± s，n＝20）

表2 各組大鼠主要肝腎功能生化指標比較（ ± s，n＝20）

組別 AST（IU ／L） ALT（IU ／L） TBil（μmol／L）雌雄雌雄雌雄對照組低劑量組中劑量組高劑量組0.39±0.010.40±0.010.39±0.020.39±0.020.40±0.010.37±0.010.39±0.020.39±0.023.78±0.193.89±0.203.78±0.243.87±0.023.82±0.353.86±0.313.72±0.273.8±0.180.75±0.040.73±0.050.71±0.050.74±0.050.72±0.040.77±0.050.74±0.040.77±0.06

2.4 血常規指標

結果見表3。各劑量組血常規與對照組比較未見異常。

2.5 組織病理學檢查

連續給藥30 d后，對照組及各劑量組動物的心、肝、腎、肺未見明顯的病理改變。停藥11 d后，對照組及各劑量組動物的心、肝、腎、肺也未見明顯的病理改變。

3 討論

本試驗采用益精靈口服液以灌胃法給藥30 d進行大鼠長期毒性試驗研究，根據總投藥量計算各組每天平均投藥劑量，分別為低劑量［0.5mL ／（kg·d）］、中劑量［2.5mL ／（kg·d）］、高劑量［5mL ／（kg·d）］，相當于臨床每日用藥量的 1，5，10 倍。試驗期間，各劑量組體重增長情況與對照組相比無明顯差異，血常規未發生明顯變化，結果表明，以相當于臨床患者每日用量1，5，10倍的劑量，連續給予大鼠益精靈口服液灌胃30 d，并無毒性反應，說明其臨床用藥較安全。

表3 各組大鼠血常規指標比較（ ± s，n＝20）

表3 各組大鼠血常規指標比較（ ± s，n＝20）

組別Hb（g／L） WBC（105／L） RBC（1012／L）雄雌雄雌雄雌對照組低劑量組中劑量組高劑量組158.6±2.97159.0±2.45159.4±3.05160.0±2.12159.0±4.74160.4±2.88160.4±1.82158.2±4.506.00±0.346.11±0.285.95±0.275.96±1.605.95±0.236.15±0.295.91±0.216.00±0.246.69±0.156.78±0.066.63±0.166.49±1.786.54±0.096.55±0.076.56±0.176.60±0.15

參考文獻：

［1］袁伯俊，王治喬.新藥臨床前安全性評價與實踐［M］.北京：軍事醫學科學出版社，1997：23－36.

［2］王林麗，李卓恒，呂金勝，等.乳寧口服液對大鼠的長期毒性試驗研究［J］. 中國藥業，2013，14 （22）：14 －15.