上海市人類精子庫捐獻者HIV復查失訪狀況調查和回顧性分析

宋平平 鄒沙沙 王亞楠 曹小蓉 劉 勇 李 錚 胡洪亮

上海交通大學醫學院附屬仁濟醫院泌尿外科（上海 200001）

·臨床經驗·

上海市人類精子庫捐獻者HIV復查失訪狀況調查和回顧性分析

宋平平 鄒沙沙 王亞楠 曹小蓉 劉 勇 李 錚 胡洪亮*

上海交通大學醫學院附屬仁濟醫院泌尿外科（上海 200001）

近年來，研究發現人類免疫缺陷病毒（Human immunodeficiency virus ，HIV）感染人數增多并呈現低齡化的趨勢。HIV感染人體后，主要攻擊、破壞CD4+T淋巴細胞，經過一段時間（一般是6～8年）的潛伏期，人體細胞免疫功能下降而導致機體發生一系列機會性感染或腫瘤，最終人體喪失對各種疾病的抵抗能力而導致死亡[1]，同時，大量研究發現HIV感染可造成精子活力、精子活率、精子密度、精子總數降低和畸形率增加[2]；并且HIV可通過父嬰垂直傳播。HIV病毒也可感染人體各期生殖細胞，其中，病毒顆粒是通過結合在精子細胞膜上和（或）存在于精子胞漿中，使病毒RNA整合到宿主精子基因組內。因而，受精時攜帶HIV 基因的人類精子會進入正常卵母細胞。在胚胎發育過程中，HIV 基因隨宿主細胞分裂復制和表達，從而使子代患病[3]。因此，臨床上對精液捐獻者進行HIV檢測意義重大，它可大大減少供精人工授精及體外受精后代患AIDS的風險，從而在一定程度上可降低HIV的傳播。

HIV感染存在窗口期，窗口期一般為2周～12周，這段時間人體雖感染艾滋病毒，但外周血液中往往不能夠檢測出病毒抗體的[4]。窗口期的長短存在個體差異，并且與檢測方法及相應試劑的敏感性有關。由于窗口期的樣本用常規的檢測方法是不能檢出的，這一階段在監測檢疫、防疫、發病、治療等預防醫學和臨床醫學方面均出現很多問題。因此，針對精液初篩合格的捐獻者，我庫采取捐精者完成捐精后6個月復查HIV的方法，從而避免了窗口期檢測假陰性的結果而誤診，這對確診HIV感染與否具有重要的意義。然而，HIV復查存在失訪的情況，因而本文通過調查分析HIV失訪狀況及原因，為臨床進一步改進工作方法，提高工作成效提供參考。

資料和方法

一、研究對象

選擇2006年至2013年在上海市人類精子庫所有HIV復查的合格捐獻者及HIV復查失訪的捐獻者。年齡≥18歲，精液體積≥2mL，液化時間少于60min，密度大于60×106/mL，存活率大于60%，前向運動精子百分率大于60%，精子正常形態率大于4%，圓細胞＜1×106/mL。

二、資料統計分析

本研究針對2006年至2013年上海市人類精子庫HIV復查失訪人數，HIV復查合格人數，及失訪率分別進行統計，如圖1、2所示。

圖1 2006年至2013年上海市人類精子庫HIV復查失訪人數及合格人數

圖2 2006年至2013年上海市人類精子庫復查失訪率

三、 HIV檢測流程

捐獻者第一次抽血檢測其HIV抗體，捐獻完成后的半年后再次檢測其血中HIV抗體，檢測陰性后方可使用。HIV抗體陽性者標本應啟動緊急處理方案。

四、統計學分析

對前4年（2006年至2009年）與后4年（2010年至2013年）的HIV失訪率采用t-test進行成組設計的兩獨立樣本比較分析。

結 果

HIV復查合格捐精人數及復查失訪人數均呈逐年上升趨勢，其中前4年上升趨勢不明顯，后4年上升趨勢非常顯著（圖1）（由于HIV復查存在延遲現象，故2013年HIV查復合格人數僅統計2013上半年捐精者人數）。失訪率也呈相似趨勢，但幅度相對較低。然而2012、2013失訪率卻有所下降（圖2）。

對前4年和后4年的失訪率進行T-test分析：t=-4.11，自由度=6，P=0.0063（P＜0.05，差異有統計學意義）。

討 論

2006年至2009年，HIV復查合格人數和復查失訪率分別是110、185、185、278人次與1.79%、2.12%、5.13%、5.44%。 而2010年至2013年，HIV復查合格人數和復查失訪率則分別是870、879、1356、1046與10.68%、14.83%、11.95%、7.27%。 前4年HIV復查失訪率相對后4年低，這主要是由于工作量相對較低，各項工作相對開展到位。2010年至2013年，上海市人類精子庫進入了迅速發展的階段，HIV復查合格捐精人數迅速增長；隨之，復查失訪人數也逐年增加。值得注意的是，從2006年至2009年HIV復查失訪率也逐年升高，然而，2012年至2013年，失訪率卻有所下降，這是由于從2012年開始上海市人類精子庫提高了管理措施，進一步開發與運用了計算機管理系統，及時提醒和督促捐精完成六個月后的HIV抽血復查。這也說明了，網絡管理系統的完善與實施，為精子庫提供了一套科學、方便、高效的方法，可大大提高的HIV復查成效。

HIV-1傳染60%～90%是通過性傳播來實現的，尤其是在發展中國家[5]。男性艾滋病患者精液中可檢測到HIV病毒，并可通過父嬰垂直傳播。HIV病毒主要檢測于非精子細胞和精漿中，至于精子細胞是否存在HIV病毒至今仍有爭議。研究發現，將洗滌的精子細胞暴露于HIV gag DNA轉染的重組質粒中，艾滋病毒基因可整合到人類精子細胞核或染色體的基因組中，并且攜帶HIV-1 gag基因精子能夠進入卵母細胞，實現正常的受精，并在早期胚胎細胞實現基因轉錄（產生mRNA），然后翻譯（產生蛋白質）[6]。 由上可見，也可通過HIV病毒核酸檢測捐精者精液中病毒含量，可篩選出HIV陽性患者，大大減少供精人工授精及體外受精后代患AIDS的風險，從而在一定程度上可降低HIV的傳播。因此，對于一部分HIV失訪的捐精者（能聯系到本人并經其同意），可通過P24抗原和病毒核酸檢測精液，結果陰性的精液可直接應用于臨床，以避免前期檢測費用的浪費及標本的流失，提高精子庫捐精的成效。

本文針對研究捐精者完成后半年HIV復查情況，統計其失訪結果，總結失訪主要原因如下：捐獻者居住地址的改變，聯系方式的更換（換號、停機），捐獻意圖的改變，中途放棄等。WHO要求半年之后進行第二次抽血復查HIV，捐精者在這個過程中存在以上原因，導致復查失訪。初篩合格的捐精者如半年后不能進一步抽血復查HIV抗體，使即便合格的精液不能應用于臨床，導致前期檢測費用的浪費及標本的流失，使供應與需求之間的矛盾更為緊張，嚴重影響臨床供應。

自2003年3月至2012年3月，9年以來上海市人類精子庫共初篩捐獻志愿者11 563人，其中艾滋病病毒攜帶者3 例（0.03 %）， 其中2 人為同性戀者， 另一人有嫖娼史。HIV 陽性均為30歲以下青年人，說明近年來社會上青年人性觀念淡薄，特別是男同性戀之間的性傳播是HIV 感染率增高的危險因素之一。

目前檢測HIV的方法總體來說可以分為抗體檢測和病毒檢測兩大類。其中，病毒檢測包括細胞培養（病毒分離）、p24抗原檢測和病毒核酸檢測。隨著檢測技術的不斷進展，HIV感染窗口期逐漸縮短[7]。近年發展起來的第4代HIV檢測試劑可同時檢測HIV p24抗原和抗體，據報道其檢測窗口期可比使用第3代HIV抗體檢測試劑縮短幾天到2周[8,9]。

針對上海市人類精子庫HIV復查失訪狀況，建議進一步提高精子庫管理措施，使各項工作逐步到位；可適當縮短HIV復查時間，大大降低失訪率[10]；隨著檢測技術的革新，可同時采用新技術進行檢測，從而更加有效篩選合格的精液應用于臨床。

授精, 人工(非丈夫供體); HIV感染;數據收集; 回顧性研究

1 王敏, 范學工. 48 例HIV/ AIDS 住院病例分析. 實用預防醫學 2006; 13 (5): 1118-1120

2 侯志偉, 李練兵, 呂靜, 等. HIV感染對患者精液質量的影響. 癌變?畸變?突變 2011; 23(3): 202-205

3 康祥錦, 黃天華. HIV病毒父嬰垂直傳播的研究進展. 癌變?畸變?突變 2009; 21(1): 74-76

4 方雯丹, 李聞文. HIV感染窗口期及其檢測技術的研究.檢驗醫學教育 2012; 19(3): 43-45

5 Doncel GF, Joseph T, Thurman AR. Role of Semenin HIV-1 transmission:inhibitor or facilitator?Am J Reprod Immunol2011;65(3):292-301

6 Wang D, Kang XJ, Li LB, et al. In vitro study on vertical transmission of the HIV-1 gag gene by human sperm. J Med Virol 2011; 83(1): 16-23

7 Sickinger E, Jonas G, Yem AW,et al.Performance evaluation of the new fully automated human immunodef ciency virus antigen-antibody combination assay designed for blood screening.Transfusion2008; 48(4): 584-593

8 許文燕, 邱茂鋒, 佐合拉?吐爾地, 等. 第四代HIV抗原抗體酶聯檢測試劑縮短HIV檢測窗口期的研究. 中華醫學會雜志 2007; 30(3): 284-287

9 Lee K, Park HD, Kang ES. Reduction of the HIV seroconversion window period and false positive rate by using ADVIA Centaur HIV antigen/ antibody combo assay.Ann Lab Med2013; 33(6): 420-425

10 呂傳臣, 馬雪梅, 曾毅. 人類免疫缺陷病毒(HIV)檢測技術的研究進展.臨床和實驗醫學雜志 2006; 5(4): 421-423

（2014-01-20收稿）

10.3969/j.issn.1008-0848.2014.07.012

R 181

*通訊作者, E-mail: hongliang_hu67@hotmail.com