五參順脈膠囊的質量控制研究

蘇春杰趙君穎汪 坤*

（1 王莊鎮衛生院，河南 新野 473525；2 河南省中醫院，河南 鄭州 450002）

五參順脈膠囊的質量控制研究

蘇春杰1趙君穎2汪 坤2*

（1 王莊鎮衛生院，河南 新野 473525；2 河南省中醫院，河南 鄭州 450002）

目的建立一種有效控制五參順脈膠囊質量的含量測定方法。方法HΡLC同時測定人參皂苷Re、Rb1含量；色譜條件：Rapid Resolution （4.6 mm×100 mm，3.5-Micron）色譜柱，乙腈-0.1%磷酸水梯度洗脫，流速1.3 mL/min，檢測波長203 nm，柱溫30 ℃。結果人參皂苷Re、Rb1在該色譜條件下分離度良好，專屬性強，可以準確地進行含量測定。結論該方法可以快速、準確、有效地對五參順脈膠囊進行質量控制。

五參順脈膠囊；質量標準；HΡLC；人參皂苷Re；人參皂苷Rb1

五參順脈膠囊是河南省中醫院院內制劑（豫藥制字Z04010058），由西洋參、丹參、北沙參、苦參、三七、水蛭、川芎、赤芍、山楂9味藥粉碎成細粉后加入冰片，混勻，裝膠囊制成的制劑，具有益氣養陰、活血化瘀功效，主要用于各種 心腦血管病所呈現的氣陰兩虛挾瘀血證。西洋參、三七為五參順脈膠囊中的君藥。2010年版中國藥典[1]對西洋參中人參皂苷Rg1、Re、Rb1含量進行測定，對三七中人參皂苷Rg1、Rb1、R1含量進行測定，為了同時對兩種君藥進行質量控制，建立高效液相法同時測定Re、Rb1含量，專屬性強，準確，可以有效地控制該藥品質量。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Agilent 1260高效液相色譜儀，Rapid Resolution （4.6 mm×100 mm，3.5-Micron）色譜柱；BS 224S電子天平（北京賽多利斯天平有限公司），METTLER AE 240型十萬分之一電子天平（瑞士），KQ-500DV型數控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司），FW-100高速萬能粉碎機（北京中興偉業儀器有限公司）；DZKW-4電子恒溫不銹鋼水浴鍋（上海東星建材試驗設備有限公司），SHZ-D（Ⅲ）循環水式真空泵（鞏義市英峪予華儀器廠）。

1.2 試劑與試藥

甲醇（天津市四友精細化學品有限公司，批號080304101，色譜純），乙腈（天津市四友精細化學品有限公司，批號331076-05807，色譜純），正丁醇（天津市致遠化學試劑有限公司，批號20130218，分析純），磷酸（天津歐博凱化工有限公司，批號20120518），人參皂苷Re對照品（中國藥品食品檢定所，批號：110754-201123），人參皂苷Rb1對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：704-201114）；五參順脈膠囊（20130318、20130319、20130320）和陰性樣品（缺西洋參、三七）由河南省中醫院提供。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱：Rapid Resolution（4.6 mm×100 mm，3.5-Micron）；乙腈（C）-0.1%磷酸水（D）為流動相梯度洗脫（34 min，19%C；60 min，40%C）；流速1.3 mL/min；檢測波長203 nm；柱溫30 ℃，理論板數按人參皂苷Re計算應不低于5000。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對照品溶液的制備：精密稱取人參皂苷Re對照品1.50 mg，人參皂苷Rb1對照品置4.01 mg分別置于5 mL容量瓶中，加色譜甲醇至刻度，搖勻，得每1 mL中含人參皂苷Re0.30 mg、人參皂苷Rb10.80 mg的對照品溶液。

2.2.2 供試品溶液的制備：供試品溶液的制備 取五參順脈膠囊內容物約2 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入水飽和的正丁醇50 mL，稱定重量，置水浴中加熱回流提取1.5 h，放冷，再稱定重量，用水飽和正丁醇補足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取續濾液25 mL，置蒸發皿中，蒸干，殘渣加50%甲醇適量使溶解，轉移至10 mL量瓶中，加50%甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

2.2.3 陰性溶液的制備：取不含西洋參、三七的處方，按照制備工藝制成缺西洋參、三七的陰性樣品，再按供試品溶液的制備方法制成陰性樣品溶液。

2.3 線性關系考察

取對照品溶液，分別進樣2、4、6、8、10 μL，以峰面積積分值為縱坐標，進樣量（μg）為橫坐標進行線性回歸；結果表明人參皂苷Re進樣量在0.6～3.0 μg范圍內線性關系良好，回歸方程為Y=436.57X+11.36，r=0.9999；人參皂苷Rb1在1.6～8.0 μg線性關系良好，回歸方程為Y=84.30X+12.76，r=0.9999。

2.4 精密度試驗：去對照品溶液，重復進樣5次，每次進樣10 μL，計算峰面積積分值，人參皂苷Re RSD1.83%，人參皂苷Rb1 RSD2.01%，結果表明精密度良好。

2.5 重復性試驗：取同一批同一批五參順脈膠囊（批號為20130318）5份，每份約5 g，精密稱定，按照供試品溶液的制備方法制備，分別進樣10 μL，計算人參皂苷Re含量為1.20 mg/g，RSD2.72%；人參皂苷Rb1含量為3.01 mg/g，RSD2.15%，表明重復性良好。

2.6 穩定性試驗：取樣品約5 g，精密稱定，按照供試品溶液的制備方法制備，分別放置0、2、4、6、8、10、12 h后進樣，進樣量為10 μL，計算色譜峰峰面積變化情況，計算得人參皂苷Re含RSD1.24%；人參皂苷Rb1 RSD1.67%，結果表明樣品在12 h內穩定。

2.7 專屬性考察：去陰性樣品溶液10 μL，在相同的色譜條件下與對照品溶液的HΡLC圖比較，在人參皂苷Re 和人參皂苷Rb1相應的位置上無峰出現，見圖1。

圖1 五參順脈膠囊色譜

2.8 加樣回收率試驗：取同一批五參順脈膠囊（批號為20130318，人參皂苷Re 平均含量為1.28 mg/g；人參皂苷Rb1含量為3.07 mg/g）6份，每份2個，精密稱定，分別置具塞錐形瓶中，每2份分別加入照品溶液6、7.5、9 mL，其余按照供試品溶液制備項下同法操作，分別進樣10 μL，計算加樣回收率，結果見表1、2。

2.9 樣品含量測定：取三批樣品按供試品溶液的制備方法制備，每次進樣10 μL，測得峰面積積分值，計算人參皂苷Re、人參皂苷Rb1平均質量分數結果見表3。

通過對三批五參順脈膠囊樣品中人參皂苷Re、Rb1含量測定，可以初步規定五參順脈膠囊中人參皂苷Re含量應不低于1.20 mg/g，人參皂苷Rb1量應不低于3.00 mg/g，可以有效地對五參順脈膠囊進行質量控制。

表1 人參皂苷Re加樣回收率試驗（n=6）

表2 人參皂苷Rb1加樣回收率試驗（n=6）

表3 五參順脈膠囊樣品含量測定

3 討 論

五參順脈膠囊中西洋參、三七為君藥，二者都含有人參皂苷Rg1、Rb1，西洋參中特異性成分為人參皂苷Re。高效液相色譜法測定人參皂苷Re，專屬性強，可以有針對性地對西洋參進行質量控制，測定Rb1含量可以同時控制西洋參、三七含量。

參考2010年版中國藥典和相關文獻[2-10]，人參皂苷Rg1、Re保留時間接近，并且人參皂苷Rg1含量較低、色譜峰中易被五參順脈膠囊中其他成分干擾，定量不準確，故本研究只對五參順脈膠囊中人參皂苷Re、Rb1含量進行測定，簡單易行，方法可靠。

[1] 中國藥典委員會.中國藥典(一部)[S].北京:人民衛生出版社, 2010:122.

[2] 王燕,柴程芝,朱丹妮.HOLC-ELSD 測定GSSM 顆粒中酸棗仁皂苷A 和人參皂苷Rb1[J].中國實驗方劑學雜志,2011,17(12):76-78.

[3] 莫炫永.HΡLC測定參松養心膠囊中人參皂苷Rb1的含量[J].中國實驗方劑學雜志,2012,18(12):112-114.

[4] 劉莉,程龍瓊,周世玉.西洋參中人參皂苷Rg1 人參皂苷Re和人參皂苷Rb1的含量測定[J].醫藥導報,2011,30(9):1208-1209.

[5] 畢曉黎,羅文匯,李素梅,等.超高速液相測定西洋參中人參皂苷Rg1、Re、Rb1的含量研究[J].中國藥師,2012,15(5):651-652.

[6] 李靜濤,邵麗華,鞏飚,等.HΡLC—ELSD法測定西洋參含片中人參皂苷Rg1、Re和Rbl的含量[J].藥物分析雜志,2006,26(9):1289-1291.

[7] 王旭,烏國慶,張曉茜.HΡLC法測定進口西洋參中人參皂苷Rb1、Re、Rg1的含量[J].中國實驗方劑學雜志,2004,10(6):27-29.

[8] 張秀麗.人參與西洋參皂苷類成分的比較研究[J].中國中醫藥咨詢,2012,4(5):46-47.

[9] 李嵐,陳華.HΡLC法測定不同產地西洋參中人參皂苷Rg1、人參皂苷Re、人參皂苷Rb1含量[J].中醫藥導報,2011,8(20):103-105.

[10] 楊立偉,鄭傳奇,蔣忠軍,等.超高效液相色譜法測定西洋參中參皂苷Rg1、Re、Rh1的含量[J].中藥材,2008,31(1):55-57.

Studies of Quality Control on Wushenshunmai Capsules

SU Chun-jje1, ZHAO Jun-ying2, WANG Kun2*
(1 Wangzhuangzhen Hospital, Xinye 473525, China; 2 Henan Province Hospital of TCM, Zhengzhou 450002, China)

ObjectiveTo establish an effective method to control the quality of wushenshunmai capsule.MethodHΡLC determine the contents of ginsenoside Re, ginsenoside Rb1 simultaneously; Chromatographic conditions: Rapid Resolution (4.6 mm × 100 mm ,3.5-Micron) column and acetonitrile -0.1% phosphoric acid-water gradient, flow rate 1.3 mL/min, detection wavelength 203 nm, column temperature was 30 ℃.ResultsGinsenoside Re, ginsenoside Rb1 in the chromatographic separation conditions is good, specific, can accurately determine the content.ConclusionThis method can quickly and accurately and efficiently control the quality of wushenshunmai capsules.

Wushenshunmai capsules; Quality control; HΡLC; Ginsenoside Re; Ginsenoside Rb1

R282.710.5

B

1671-8194（2014）10-0040-02

*通訊作者:E-mail: china33333wang@126.com