徐 翠,王 濤,周 平,孫紅霞,張在亭,宋建林
(淄博市第一醫院,山東淄博255200)
幽門螺桿菌(Hp)感染與慢性胃炎、十二指腸潰瘍、胃黏膜相關性淋巴組織淋巴瘤和胃癌以及缺鐵性貧血、生長發育遲緩等疾病密切相關[1]。綦秀貞等[2]發現,Hp對兒童營養不良發生具有一定作用。兒童是Hp感染的易感人群。白植峰等[3]對有上消化道癥狀患兒的Hp檢測結果顯示,Hp感染率已從2004年的33.3%上升到2008年的56.1%。因此,選擇準確可靠的診斷方法對兒童Hp感染的早期發現、早期治療尤為重要。現癥感染條帶(CIM)血清學檢測適用于所有年齡患兒,且易被家長所接受,但其對于Hp感染的診斷價值尚有不同的意見[3]。本研究采用多種方法檢測兒童Hp感染,并對CIM的診斷價值進行評估。
1.1 臨床資料 選擇2012年1月~2014年4月在淄博市第一醫院兒科門診因上消化道不適就診接受胃鏡檢查的患兒102例,男54例、女48例,年齡2~12(6.5±2.1)歲。患兒反復腹痛、嘔吐或反酸病史超過1個月,查體為左上腹、劍突下或臍周壓痛。檢查前1個月內均未使用抗生素及抑酸制劑。
1.2 方法
1.2.1 檢測方法 患兒均應用4種方法檢測Hp:①快速尿素酶試驗(RUT):予OLYMPUS 260電子胃鏡檢查,在胃竇距離幽門5 cm處鉗取黏膜組織,分成3塊,其中1塊行RUT。采用珠海市克迪科技開發有限公司提供的Hp快速診斷試劑盒,1 min查看結果,顏色變為深紫色為陽性,不變色為陰性。②免疫組化染色:由福州邁新生物技術開發有限公司提供試劑,通過Hp特異性抗體檢測組織中Hp抗原成分,陽性著色除了在Hp菌體之外,對Hp菌體成分亦呈陽性著色,其陽性著色為棕褐色。③13C-尿素呼氣試驗(13C-UBT):應用北京華亙安邦科技有限公司的13C紅外質譜儀,患兒口服協和藥業有限公司生產的13C尿素散劑1包,服藥前和服藥后30 min分別采集呼出的氣體,通過質譜儀檢測患兒呼氣中的13C-CO2進行判斷。④CIM:采用上海安倍醫療器械貿易有限公司提供的安速Hp快速檢測試劑盒,利用免疫層析技術檢測全血、血漿或血清中的Hp特異抗體[4]。患兒空腹或進食2 h以后,采末梢血,15 min便可得到結果。CIM出現紅色條帶為陽性,否則為陰性。Hp感染診斷標準參照第三次全國Hp感染若干問題共識意見[5]。
1.2.2 統計學方法 采用SPSS17.0統計軟件,率以百分比表示,不同方法檢出率采取χ2檢驗。P≤0.05為差異有統計學意義。
102例患兒中,13C-UBT檢測Hp陽性60例,陰性42例,Hp檢出率58.8%。CIM檢測Hp陽性58例,陰性44例,Hp檢出率56.8%。RUT檢測Hp陽性57例,陰性45例,Hp檢出率55.9%。免疫組化染色檢測 Hp陽性51例,陰性51例,Hp檢出率50.0%。與13C-UBT比較,其他三種方法對兒童Hp檢出率差異無統計學意義(P均 >0.05)。CIM、RUT、病理免疫組化染色診斷Hp感染的敏感率分別為 91.7%、78.3%、75%,特異率分別為92.9%、76.2%、85.7%,準確率分別為 92.2%、87.3%、79.4%。CIM診斷Hp感染的敏感率與RUT、免疫組化染色比較差異有統計學意義(χ2分別為4.183、6.000,P 均 <0.05),特異率與 RUT 比較差異有統計學意義(χ2=4.459,P <0.05)。
目前,Hp感染的檢測方法大致可分為侵入性和非侵入性兩類。13C-UBT是一種比較常用的非侵入性的方法,13C-尿素在胃中均勻分布,可與胃黏膜廣泛接觸,不受取材部位的影響,非常適用于診斷兒童Hp感染人群[5],有人稱其為診斷Hp感染的“金標準”,適宜作為抗Hp療效監測的首選方法[6]。但是由于其價格較昂貴,限制了在基層醫院的應用。RUT檢測Hp感染有較高的敏感性、特異性及準確性,是臨床上診斷 Hp感染的簡單、安全、可靠方法[7]。但尿素酶的活性取決于活檢組織內的細菌數量多少,而且取材亦受Hp在胃內“灶性分布”的影響,可造成假陰性反應。組織學診斷Hp的優點是可以同時進行胃黏膜的病理學診斷,細菌清晰易辨,但費時且需一定技術,難以判斷胃上皮間質中的Hp及球狀Hp。免疫組化法除了能夠輕易觀察到黏膜表面及凹陷腔中的Hp,還可以觀察到上皮細胞內及間質中的Hp菌體及球狀變形的非菌體Hp成分[8,9]。沙莉等[10]研究發現,免疫組化染色可以更好地反映Hp在胃黏膜組織中的感染狀態,其敏感性要高于銀染法。
血清Hp抗體檢測是利用Hp感染后產生可測定的全身性抗體以確定有無Hp感染。由于血清抗Hp抗體在Hp根除后6~8個月內仍可持續存在,故有較高的假陽性,不宜單獨作為Hp感染的診斷依據。CIM是一種全新的血清學檢測方法,可用于診斷Hp現癥感染。安速Hp抗體快速檢測試劑是通過Hp cDNA文庫重組出特異性較強的Hp抗原蛋白來檢測相應血清抗體。其檢測結果中,B線僅包含C1抗原,C線包含C1及A22抗原;B線、C線均呈顯色說明含有C1及A22抗體,提示現癥感染;如僅有C線顯色說明只含有A22抗體,提示既往感染。C1抗原具有高度專一性、保守性,而且它的抗體存在時間很短,僅僅3~6個月,因此稱為CIM,與一般常用的血清學檢測法比較,其優點在于可區別現癥和既往Hp感染,是一種操作簡便、快捷、經濟、安全、非侵入性診斷Hp感染的新血清學方法。王鈞樂[11]對1 766例兒童研究發現,Hp感染較普遍,感染率隨年齡上升而上升。CIM蛋白抗體檢測不受近期是否用過抗生素的影響,有助于臨床明確診斷和進行療效動態觀察。楊桂彬等[12]也提出CIM可用于臨床Hp現癥感染的診斷。呂農華等[13]提出CIM敏感性和特異性較高,費用低廉,可在基層醫院推廣。
本研究以13C-UBT為金標準,結果顯示CIM診斷兒童Hp感染的敏感性、準確性及特異性均在90%以上,可作為臨床診斷兒童Hp現癥感染首選的檢測手段。
[1]Baggett HC,Parkinson AJ,Muth PT.Endemic iron deficiency associated with Helicobacter pylori infection among school-aged children in Alaska[J].Pediatrics,2006,117(3):396-404.
[2]綦秀貞,門忠友,郭術春.70例營養不良兒童幽門螺桿菌感染檢測及分析[J].山東醫藥,2010,50(23):85-86.
[3]白植峰,吳曉霞,金國信.兒童幽門螺桿菌感染率5年跟蹤分析[J].實用醫學雜志,2009,25(23):3998-3999.
[4]董欣紅,王蔚虹,張孝平,等.ASSURE快速血清學檢測試劑盒在北京地區診斷幽門螺桿菌現癥感染的價值[J].中國醫藥導刊,2007,9(2):100-103.
[5]中華醫學會消化病學分會.第三次全國幽門螺桿菌感染若干問題共識意見[J].胃腸病學,2008,17(10):577-578.
[6]黃敬,鄧秋蓮,周珍文,等.兒童幽門螺桿菌感染4種診斷方法的對比[J].廣東醫學,2010,31(16):2087-2089.
[7]Tokunaga K,Watanabe K,Tanaka A,et al.Evaluation of13C-urea breath test of con-FU eradication of Helicobacter pylori[J].Nippon Shokakibyo Gakkai Zasshi,2005,102(1):176-182.
[8]譚克文,宋仁,代高舉,等.14C呼氣試驗與快速尿素酶試驗診斷幽門螺桿菌的對比研究[J].中國臨床醫學,2012,19(3):262-263.
[9]胡小安,張潤,盧靜.特殊染色與免疫組化染色顯示幽門螺桿菌的效果對比[J].臨床與實驗病理學雜志,2009,25(2):222-223.
[10]沙莉,朱東兵,沈小建,等.銀染與免疫組化染色檢測幽門螺桿菌的效果對比[J].診斷病理學雜志,2013,20(8):509-510.
[11]王均樂.1766例兒童幽門螺桿菌現癥感染條帶結果分析[J].臨床檢驗雜志,2007,25(2):312.
[12]楊桂彬,魏紅,胡伏蓮,等.安速快速檢測試劑盒診斷幽門螺桿菌的現癥感染[J].世界華人消化雜志,2007,15(23):2545-2548.
[13]呂農華,楊楨.幽門螺桿菌臨床檢驗方法評價及選擇[J].中國實用內科雜志,2008,28(9):720-722.