高效液相色譜法測定甲硝唑片的溶出度

北京市大興區藥品檢驗所（102600）苗立紅

甲硝唑片臨床用于各種厭氧菌感染，還可用于阿米巴病，陰道滴蟲等。為《中國藥典》（2010版）二部收載的品種，其溶出度采用的是紫外分光光度法，而本文采用高效液相色譜法，結果準確，操作簡便。

1 儀器與試藥

島津LC—20AT高效液相色譜儀；賽多利斯精密天平CP225D；智能藥物溶出儀（D-800LS）。甲硝唑對照品（中國食品藥品檢定研究院批號100191-200606）；甲硝唑片（批號121051）規格0.2g；甲醇為色譜純；水為超純水。

2 方法與結果

2.1 色譜條件 色譜柱：十八烷基鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水（20：80）為流動相，檢測波長為320nm；進樣量10μl；柱溫30℃；流速1.0ml/min；理論塔板數按甲硝唑峰面積計算不低于2000。

2.2 溶液的配制

2.2.1 對照品溶液的配制 精密稱取甲硝唑對照品12.20mg，置50ml容量瓶中，用流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為甲硝唑片溶出度的對照品溶液。

2.2.2 供試品溶液的配制 按《中國藥典》（2010版）二部，以鹽酸溶液（9→1000）900ml為溶出介質，轉速為每分鐘100轉，依法操作，經30分鐘時，取續濾液作為供試品溶液（0.45μm微孔濾膜），照2.1色譜條件測定，按外標法以峰面積計算每片溶出量，限度為標示量的80%。

2.3 線性關系考察 精密稱取甲硝唑對照品25.00mg，置50ml容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻。分別精密量取1.0ml、2.0ml、3.0ml、5.0ml、10.0ml置10ml的容量瓶中，加流動項至刻度，配成系列對照品溶液，按上述色譜條件進樣測定峰面積為1607368、3215838、4723407、8036345、16064689。以峰面積Y對濃度X繪制標準曲線，得回歸方程Y=32172347X-26664，R=0.9999。結果表明，甲硝唑濃度在0.05～0.5mg/ml范圍內，線性良好。

2.4 精密度試驗 取對照品溶液10μl，連續進樣五針（n=5）記錄色譜圖，其峰面積為7770765、7763699、7765574、7768326、7774289，平均峰面積為7768531測定RSD為0.05%。本方法精密度良好。

2.5 穩定性試驗 取對照品溶液分別于0、2、4、6、12、24h進樣1次，測定其峰面積為7776759、7780012、7775574、7788366、7780899、7781126，平均峰面積為7780456，RSD為0.1%.( n=6)，甲硝唑在24h內穩定性良好。

2.6 加樣回收試驗 取已知含量的甲硝唑片樣品3份，分別加入900ml溶出介質，超聲使其溶解，濾過（0.45μm微孔濾膜），另取對照品適量加入，取續濾液10μl，注入色譜儀，記錄色譜峰圖，按外標法計算回收率，得回收率為99.24%，RSD為0.26%。結果表明本方法回收率良好。

2.7 不同方法測定 取樣品三批次，按供試品溶液制備方法進行操作，在2.1色譜條件下測定，按外標法以峰面積計算甲硝唑片溶出量，分別為91.56%、93.00%、90.26%。采用《中國藥典》（2010年版）二部收載的紫外分光光度法，分別為93.60%、91.10%、92.00%。

3 討論

本文采用的高效液相色譜法測定甲硝唑片的溶出度，專屬性強，準確度高。在320nm的波長處可有效避免雜質干擾，主峰吸收也很強。還可與甲硝唑片的含量測定在同一色譜條件下同時測定，簡單易行，線性良好。與藥典方法比較無明顯差異，可很好地用于該品種的質量控制。