流動采血車(屋)快速定量檢測乳糜血新方法的研究

孔衛建 侯廣安 高占海 紀曉花 馮國先 孫連芳 馬振東

隨著無償獻血事業的發展，街頭采血是血液采集的重要方式。由于街頭獻血者多是餐后獻血，乳糜血的報廢率越來越大［1］。降低乳糜血報廢率的最有效的方法是在獻血者采血前判定血漿乳糜程度，而對于乳糜血的判斷，多采用肉眼觀察血漿乳糜程度，無參照標準;還有部分血站采用國家標準中測定血液乳糜指數的方法，但都存在著人為誤差、主觀因素影響大，而且無法在流動采血車應用的問題。為了減少人為誤差，降低乳糜血淘汰率，從源頭上控制乳糜血，我們根據速率法測定原理，摸索出了一種快速定量測定血漿乳糜程度的新方法，報告如下。

1 材料與方法

1.1 儀器及試劑

1.1.1 儀器:英諾華分立式全自動生化分析儀D320、日立HITATCHI 7100全自動生化分析儀、Photometer4040半自動生化分析儀、UV－754分光光度計。

1.1.2 試劑:ALT試劑盒，廠家:北京瑞爾達生物公司;酶校準品，廠家:日本和光。

1.1.3 檢驗器材:移液器0.9%氯化鈉溶液。

1.1.4 主要技術參數:波長:340 nm;F 值:－992.6。

1.2 方法 由于每輛采血車均采用速率法檢測ALT，而速率法的原理是在340 nm處，用NADH下降的量檢測ALT，剛加入血清時的OD值是血清吸光度與NADH的混合值，我們利用乳糜血與ALT試劑混合，OD值要大于非乳糜血OD值的特性，定量檢出重度乳糜血。由于乳糜血測量要用一定的濃度，我們增加了血漿的量，調整了F值。并經過了試驗，該方法對ALT準確性、精密度均無影響。

1.2.1 標本的選擇:①正常血漿標本管的制備:取5～10份正常無溶血、無黃疸、無乳糜的血漿等量混合與潔凈的玻璃器皿中，取出2ml于塑料試管中作為正常標準管。②重度乳糜血標準管的選擇:取多袋乳糜血(40～50袋)，編號，取塑料試管編號，與血漿袋一一對應，每袋取出1 ml于相應試管中，加入4 ml 0.9%氯化鈉溶液充分混合。取稀釋好的樣品管與正常血漿標本管比較透光度。(注意背對光源，反復比較)，與正常血漿標本管透光度一致的即為重度乳糜血標準管。所對應未稀釋乳糜血分裝4度保存。

1.2.2 關鍵技術參數:用 ALT檢測程序 其中樣品100 μl，ALT 試劑400 μl，F 值:－992.6，波長:340 nm。

1.2.3 檢測方法:①試劑準備:每個比色皿中加入400 μl ALT試劑，將比色皿放入預溫槽中預溫2 min。②空白對照測量:將加入試劑的比色皿放入測量位置進行比色，得出的OD值即為空白對照值，當此值低于1.0時表示試劑失效，需重新配置試劑。③加樣:用移液器向比色皿中加入重度乳糜標準管樣品100 μl，與試劑充分混勻。④測量:將混勻好的樣品放置在測量位置進行比色，即刻讀數OD值并記錄。⑤結果:測量得出的OD值即為重度乳糜血的參考值(約1.748)，超過此值的緩期獻血，低于此值的可以采血。

1.2.4 ALT技術參數調整:由于加樣量的增加，F值也要作出相應的調整。用酶校準品(批號:TR391)進行大量實驗調節 F值。調節后本站 F值定為:－992.6。ALT關鍵指標達到 cv%:5%，線性r:0.99，準確性偏差:5%。故使用該參數進行ALT檢測，ALT的檢測結果仍準確有效。

1.3 統計學分析 計數資料采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2012年7至12月乳糜血漿報廢情況與2012年1至6月乳糜血漿報廢情況進行對比，差異有統計學意義(χ2=7.36，P＜0.01)。應用該方法進行乳糜血初篩后，無償獻血者乳糜血報廢率比例較之前大幅度下降近50%，達到預期效果。見表1。

表1 2012年1月至2012年12月乳糜血漿報廢結果

3 討論

乳糜血血漿呈乳白色或混濁狀，表示血液中含有高量脂肪，重度乳糜血不能應用于臨床，理論上乳糜血給患者輸用并沒有健康危害，但乳糜血含有多量的微粒子，流入患者體內可能引起微血管堵塞，因此醫院血庫多半不采用。

按照《全血及成分血質量要求》(2012)［2］中對全血外觀的要求:肉眼觀察應無色澤異常、溶血、凝塊、氣泡及重度乳糜等情況;由此可見，在血液的供應中不是不可以用乳糜血，而是不可以有重度乳糜血。如何掌握乳糜血的程度，每個人有不同的尺度，造成了部分血液的報廢，也易造成血站和供血醫院的矛盾。

《全血成分血質量要求與血液標準化》［3］中附錄A測定血液乳糜程度的方法描述了一種測定血液乳糜程度的方法，但這種方法因為操作繁瑣，應用性差，所以國內流動采血車(屋)上大多未采用。各地采供血機構近年來紛紛探討想尋求一種簡便檢測乳糜血乳糜程度的方法而至今沒有結果。

為了進一步完善方法，提高準確率，我們通過反復驗證與實踐，不斷努力終于設計出用于乳糜血檢測的新實驗方法，此種方法檢測乳糜血的速度很快，數秒就可測出，又相對準確，適合于采血車(屋)上使用。通過實驗證明該方法具有準確率高、重復性好、影響因素少等優點，可以較好的解決人為誤差造成的矛盾，適用于街頭無償獻血乳糜血的篩查。從表1可看出，采用該方法后，乳糜血的報廢率明顯降低。

綜上所述，血液是寶貴而又特殊的資源，現階段還沒有可供替代的其他任何物質。因此我們還要繼續探討如何降低脂肪血報廢率的方法，同時應加強對無償獻血者獻血前飲食，休息等注意事項的宣傳，提高工作人員責任心，這樣才能夠有效減少脂血的血液浪費，緩解臨床用血的需求，減少因輸脂肪血引起的不良反應，同時也保障獻血者和用血的健康，保證血液質量。

1 周雪蓮.迷你型離心機應用于街頭獻血者脂肪血的篩選.內蒙古中醫藥，2010，29:102-103.

2 中華人民共和國衛生部.中國國家標準化管理委員會.全血及成分血質量要求.2012－01－04.

3 邱艷主編.全血成分血質量要求與血液標準化.第1版.中國標準出版社，2003.10.