HBsAg陽(yáng)性乙型病毒性肝炎患者HBsAg、HBeAg定量值和HBV-DNA分析

韓建委，劉海雄

HBsAg陽(yáng)性乙型病毒性肝炎患者HBsAg、HBeAg定量值和HBV-DNA分析

韓建委，劉海雄

目的探討HBeAg和HBsAg水平與病毒復(fù)制狀況的關(guān)系。方法對(duì)寧波市石碶街道常住人口中656例HBsAg陽(yáng)性乙型病毒性肝炎患者進(jìn)行HBV-DNA與HBeAg和HBsAg定量檢測(cè)。結(jié)果HBeAg陰性HBsAg弱陽(yáng)性組HBV-DNA陽(yáng)性率為30.1%，HBeAg陰性HBsAg強(qiáng)陽(yáng)性組HBV-DNA陽(yáng)性率為41.8%，兩組HBV-DNA陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＜0.01）。HBeAg陽(yáng)性HBsAg弱陽(yáng)性組HBV-DNA陽(yáng)性率為66.7%，HBeAg陽(yáng)性HBsAg強(qiáng)陽(yáng)性組HBV-DNA陽(yáng)性率為71.2%，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＞0.05)。不同HBV-DNA載量組中，高載量組（≥1.0×106cys/m l）的HBeAg陽(yáng)性率和HBsAg強(qiáng)陽(yáng)性率高于其他載量組（均＜0.01）。結(jié)論HBeAg檢測(cè)為陰性時(shí)不能排除存在高水平病毒復(fù)制，此時(shí)結(jié)合HBsAg定量值可更好的反映HBV復(fù)制水平。而在HBeAg陽(yáng)性時(shí)，病毒復(fù)制活躍，其程度可由HBeAg定量值來(lái)反映。

肝炎，乙型；肝炎病毒，乙型；HBsAg；HBeAg；HBV-DNA

我國(guó)是乙型病毒性肝炎病毒（HBV）感染高發(fā)地區(qū)。HBV可引起包括慢性無(wú)癥狀攜帶、慢性乙型病毒性肝炎、肝硬化和肝癌等一系列肝臟疾病[1]。目前乙型病毒性肝炎的診斷主要依賴血清標(biāo)志物和乙肝病毒基因（HBV-DNA）的檢測(cè)[2]。HBV-DNA定量值檢測(cè)特異性強(qiáng)、靈敏性高，是目前HBV感染最直接的指標(biāo)。而近年來(lái)隨著化學(xué)發(fā)光定量技術(shù)的發(fā)展，血清標(biāo)志物定量值與HBV感染的關(guān)系日益受到重視[3-4]。為使血清標(biāo)志物定量值更全面反映病毒活動(dòng)狀況，筆者對(duì)HBeAg、HbsAg定量值與HBV-DNA定量值進(jìn)行了比較，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料調(diào)查2013年寧波市石碶街道常住人口中乙型病毒性肝炎感染患者，排除有嚴(yán)重肝外疾患者（如明顯胃腸及心血管疾病）、其他病毒感染者、脂肪肝、自身免疫性肝病和丙型肝炎及無(wú)藥物中毒史者。對(duì)患者預(yù)約后進(jìn)行集中采樣，所有標(biāo)本血清存放在－70℃冰箱以備檢測(cè)，避免反復(fù)凍融。HBsAg陽(yáng)性患者656例，其中男358例，女298例；年齡14～79歲，平均（48.6±11.3）歲。將656例HBsAg陽(yáng)性乙型病毒性肝炎患者分為4組：Ⅰ組HBeAg＜1.0（陰性組）、HBsAg＜250（弱陽(yáng)性），Ⅱ組HBeAg＜1.0（陰性組）、HBsAg≥250（強(qiáng)陽(yáng)性），Ⅲ組HBeAg≥1.0（陽(yáng)性組）、HBsAg＜250（弱陽(yáng)性），Ⅳ組HBeAg≥1.0（陽(yáng)性組）、HBsAg≥250（強(qiáng)陽(yáng)性）。每組再按照HBV-DNA≥1.0×103cys/m l為陽(yáng)性計(jì)算陽(yáng)性率。將656例HBsAg陽(yáng)性乙型病毒性肝炎患者按照不同HBVDNA水平分為4組，分別為＜1.0×103（陰性組）、1.0×103～1.0×104（低載量組）、1.0×104～1.0×106（中載量組）和≥1.0×106（高載量組）。不同組再按不同HBeAg水平（HBeAg≥1.0為陽(yáng)性）分為陽(yáng)性和陰性，和不同HBsAg水平（HBsAg≥250為強(qiáng)陽(yáng)性）區(qū)分為強(qiáng)陽(yáng)性和弱陽(yáng)性分別分類。為分析HBeAg值與HBVDNA含量的關(guān)系，將656例HBsAg陽(yáng)性的患者根據(jù)不同HBeAg值分為4組：HBeAg＜1.0（陰性組），1≤HBeAg＜10（HBeAg 1～10），10≤HBeAg＜100（HBeAg 10～100），和HBeAg≥100（HBeAg≥100）。

1.2 研究方法HbsAg和HBeAg定量檢測(cè)采用Anytest時(shí)間分辨熒光免疫分析儀，試劑為上海新波公司原裝試劑，最低檢出限為0.05 IU/m l，檢測(cè)線性范圍為0.05～250 IU/m l。HBV-DNA檢測(cè)：血清HBV-DNA水平采用ABI7300全自動(dòng)實(shí)時(shí)熒光定量系統(tǒng)。

1.3 診斷標(biāo)準(zhǔn)（1）乙型病毒性肝炎標(biāo)志物高于臨界值判斷為陽(yáng)性：HBsAg≥0.05 IU/m l、HBeAg≥1.00 IU/m l；（2）HBV-DNA陽(yáng)性界值為1.0×103cys/m l，≥1.0×103cys/m l為陽(yáng)性。HBsAg定量值≥250 IU/m l為強(qiáng)陽(yáng)性，0.05 IU/m l≤HBsAg定量值＜250 IU/m l為弱陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，計(jì)數(shù)資料比較采用2檢驗(yàn)，＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HBeAg和HBsAg定量值與HBVDNA定量的關(guān)系Ⅰ組HBV-DNA陽(yáng)性率為30.1%；Ⅱ組為41.8%；Ⅲ組為66.7%；Ⅳ組為71.2%。其中Ⅳ組與Ⅰ組、Ⅱ組比較，HBV-DNA陽(yáng)性率差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（2=38.28、18.77，均＜0.01）。Ⅳ組與Ⅲ組比較，HBV-DNA陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（2=0.029，＞0.05）。Ⅱ組與Ⅰ組HBV-DNA陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（2=8.78，＜0.01）。Ⅲ組與Ⅰ組、Ⅱ組間HBV-DNA陽(yáng)性率差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（2=0.54、0.08，均＞0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 HBV-DNA定量與HBeAg和

HBsAg的關(guān)系按照HBV-DNA載量升高次序，4組HBeAg陽(yáng)性率分別為5.1%、2.9%、9.7%、65.5%。HBV-DNA高載量組的HBeAg陽(yáng)性率明顯高于其他各組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（2=161.2、76.1、54.0，均＜0.01），其他各組間HBeAg陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＞0.05）。隨著DNA載量的升高，各組HBsAg強(qiáng)陽(yáng)性率逐漸提高，分別為49.7%、54.8%、68.0%和83.6%。HBVDNA高載量組的HBsAg強(qiáng)陽(yáng)性率明顯高于其他各組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（2=30.1、19.0、8.6，均＜0.01）。1.0×104～1.0×106組和＜1.0×103組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（2=10.9，＜0.01）。HBV-DNA＜1.0×103組和1.0×103～1.0×104組，1.0×103～1.0×104組與1.0×104～1.0×106組強(qiáng)陽(yáng)性率差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均＞0.05），見(jiàn)表2。

2.3 HBeAg的表達(dá)程度與HBV-DNA定量的關(guān)系隨著HBeAg定量值的增加，各組HBV高載量組的比例分別為3.3%，7.8%，37.4%，72.5%逐漸增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（2=252.0，＜0.05），見(jiàn)表3。

表1 HBeAg和HBsAg定量值與HBV DNA定量的關(guān)系例（%）

表2 HBV DNA定量與HBeAg和HBsAg的關(guān)系例(%)

表3 HBeAg定量值與HBV-DNA定量的關(guān)系例（%）

3 討論

HBV感染的病原學(xué)診斷主要依據(jù)乙型病毒性肝炎血清學(xué)標(biāo)志物和HBVDNA定量PCR檢測(cè)法。HBV-DNA定量檢測(cè)可作為判斷病毒復(fù)制的“金標(biāo)準(zhǔn)”。HBsAg陽(yáng)性是HBV感染的標(biāo)志，其在血液中長(zhǎng)期存在。最近研究表明，結(jié)合參考HBeAg水平，HBsAg定量值的高低可用來(lái)判斷HBV-DNA的復(fù)制活動(dòng)的狀態(tài)[5]。本調(diào)查發(fā)現(xiàn)，HBsAg強(qiáng)陽(yáng)性人群HBV-DNA陽(yáng)性率為47.3%，而弱陽(yáng)性人群陽(yáng)性率為30.3%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＜0.01）。HBeAg陰性人群中，HBsAg強(qiáng)陽(yáng)性人群的HBV-DNA陽(yáng)性率（41.8%）高于HBsAg弱陽(yáng)性組（30.1%，＜0.01）。表明即便HBeAg為陰性，HBsAg陽(yáng)性乙型病毒性肝炎患者仍可通過(guò)HBsAg是否為強(qiáng)陽(yáng)性來(lái)判斷病毒的活動(dòng)狀態(tài)。在69例HBeAg陽(yáng)性患者中，HBsAg強(qiáng)陽(yáng)性66例，占95.7%，可知在HBeAg陽(yáng)性人群中病毒活動(dòng)性強(qiáng)，HBsAg處于高水平狀態(tài)。HBeAg定量值越高，HBV-DNA水平越向高水平集中，提示HBeAg陽(yáng)性人群的病毒復(fù)制水平可通過(guò)由HBeAg定量值的大小來(lái)反映。有報(bào)告顯示，HBeAg陽(yáng)性的乙型病毒性肝炎患者HBeAg定量值與HBV-DNA的相關(guān)性高于HBsAg[6]，且目前對(duì)定量值＞250 IU/m l的樣品需進(jìn)行稀釋測(cè)定較為復(fù)雜，因此現(xiàn)階段在HBeAg陽(yáng)性時(shí)HBsAg定量值對(duì)判斷病毒復(fù)制水平意義不大。

HBV-DNA定量測(cè)定是反映機(jī)體病毒復(fù)制狀況的最敏感、特異的指標(biāo)。但定量PCR檢測(cè)技術(shù)也存在費(fèi)用高，不能反映免疫應(yīng)答的狀況及轉(zhuǎn)歸過(guò)程的缺點(diǎn)。本調(diào)查顯示，在HBV-DNA檢測(cè)陰性的人群中，仍有5.1%患者HBeAg呈陽(yáng)性，49.7%患者HBsAg呈強(qiáng)陽(yáng)性，對(duì)這部分患者仍應(yīng)關(guān)注其感染狀況，表明血清標(biāo)志物HBeAg和HBsAg定量值對(duì)于判斷病毒感染狀態(tài)具有一定的意義。本調(diào)查發(fā)現(xiàn)HBeAg陽(yáng)性時(shí)，HBsAg定量值對(duì)判斷HBV復(fù)制水平意義不大，HBV復(fù)制程度可通過(guò)判斷HBeAg值的大小來(lái)推斷。而在HBeAg陰性時(shí)，仍可伴有高水平HBV復(fù)制，結(jié)合HbsAg定量值有助于了解HBV-DNA復(fù)制狀況。HBV標(biāo)志物檢測(cè)和定量PCR方法兩者不能相互替代，在定量PCR技術(shù)的基礎(chǔ)上結(jié)合HBeAg和HBsAg定量值判斷能更全面的反應(yīng)病毒復(fù)制狀況。

[1]中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì).慢性乙型肝炎防治指南(2010年版)[J].中華肝臟病雜志,2011,19(1):13-14.

[2]M ommeja-Marin H,Mondou E,Blum M. R,etal.Serum HBV DNA as amarker of efficacy during therapy for chronic HBV infection:analysisand review of the literature[J].Hepatology,2003,37(6):1309-1319.

[3]Chan HL,Wong V.W,Wong G.L,etal. A longitudinalstudy on thenaturalhistory ofserum hepatitisB surfaceantigen changes in chronic hepatitis B[J].Hepatology,2010, 52(4):1232-1241.

[4]陳彥明,黃金文.乙型肝炎病毒e抗原檢測(cè)評(píng)價(jià)慢性乙型肝炎患者體內(nèi)病毒復(fù)制的探討[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2009,6(8): 634-635.

[5]符曉莉,王磊,劉峰.乙肝病毒感染不同階段血清HBsAg定量值及其與HBV DNA水平和年齡的相關(guān)性[J].山東大學(xué)學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)版,2013 51(5):94-98.

[6]陸向東,孫翔,翟祥軍,等.HBsAg陽(yáng)性孕婦HBsAg、HBeAg和HBV DNA關(guān)系探討[J].江蘇預(yù)防醫(yī)學(xué),2012,23(1):1-3.

10.3969/j.issn.1671-0800.2014.05.048

R512.6+2

A

1671-0800(2014)05-0591-02

315153寧波，寧波市鄞州區(qū)吳劍鳴醫(yī)院（韓建委）；寧波市醫(yī)學(xué)科學(xué)研究所（劉海雄）

劉海雄，Email：hxliu79@ gmail.com