梯度板微板法ABO常規(guī)定型中正反定型不一致的原因分析及對策

邊 禮 江蘇省淮安市中心血站檢驗科 223000

近年來，國家進(jìn)一步加強(qiáng)了對采供血工作的管理，血液的集中化檢測已成為一種必然的趨勢。目前，全國采供血的大部分檢測工作已經(jīng)集中到了地市級以上的血站，這在客觀上大大增加了各血站的工作量。在這種情況下，作為必檢項目之一的血型鑒定其傳統(tǒng)的手工操作復(fù)定血型的方法已不能適應(yīng)形勢的需要，因此很多血站都已使用數(shù)字化血型分析儀，國內(nèi)使用較多的是深圳愛康公司的血型分析儀，筆者所用亦為該公司的產(chǎn)品，現(xiàn)將使用中常見的正反定型不一的情況與大家作一探討如下。

1 材料與方法

1.1 材料 （1）試劑：ABO血型標(biāo)準(zhǔn)血清（上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司生產(chǎn)，批號，20121225）在有效期內(nèi)使用；常規(guī)反定型標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞懸液（由本站血型參比室配制）亦在有效期內(nèi)使用。（2）儀器設(shè)備：加樣系統(tǒng)MicrolabSTAR（澳斯邦生物科技有限公司），Poseidon數(shù)字血型分析儀（深圳愛康科技股份有限公司）。

1.2 方法 （1）梯度板微板法：10孔×12孔的白色光滑塑料板（深圳愛康科技股份有限公司提供），易于清洗消毒，使用前務(wù)必干燥，檢測方法和結(jié)果解釋：血球沉積呈圓形集中于微孔底部為非凝集，血球均勻散布于整個微孔孔底的為凝集，結(jié)果解釋與玻片法同。結(jié)果判斷由愛康公司所提供的軟件進(jìn)行機(jī)器判讀。（2）玻片法：遇有正反定型不一致的情況采用玻片法做正反復(fù)定型。（3）試管法：采用以上兩種方法，經(jīng)過反復(fù)實驗仍是弱凝集或混合視野型的凝集反應(yīng)或正反定型矛盾時，使用試管法再次檢測。

2 結(jié)果

對2013年3月1日－2013年4月24日期間淮安市中心血站在各采血點共采血6 332人次的ABO正反定型結(jié)果進(jìn)行分析，其中正反定型不一致的總共有23例，對正反定型不一致的結(jié)果及其所致的原因進(jìn)行統(tǒng)計見表1。

3 討論

由統(tǒng)計結(jié)果可以看出在正反定型不一致的各種原因中因加樣不足而導(dǎo)致的所占比例較大，其中正定血球偏少占了30.4%，反定血漿加樣量不足占34.8%，余見表1。在實踐工作中，針對不同的原因引起的正反定型不一致，筆者均進(jìn)行了分析并采取了相應(yīng)措施加以應(yīng)對，成效顯著，現(xiàn)敘述如下：對于加樣不足首要的是在全自動加樣系統(tǒng)加樣的過程中密切觀察，遇有漏加或少加的情況需及時補(bǔ)加；也可以在加樣程序上作適當(dāng)?shù)男薷模哟笪鼧恿浚刮鼧恿勘雀骺追峙淞恐驮俣喑?0～50μl，這樣可以在一定程度上避免加樣量的不足［1］。但即使修改了加樣程序仍需在加樣過程中觀察加樣的情況，因為程序的修改并不能百分百的避免加樣不足。脂肪太濃的常會將不凝的誤判為凝集，遇有這種情況可以用加樣槍吸去上清液中的部分液體，這樣就可以減少脂肪對結(jié)果判斷的影響。反定血球偏少大多是由于全自動加樣器的加樣槍漏液所致，可更換加樣槍的O形密封圈，問題就能解決［2］。微孔板底面有水漬，需定期使用稀鹽酸浸泡微孔板并用蒸餾水沖洗，烤干后若還有水漬可以用棉球蘸取適量酒精擦拭微板底部。冷凝集的情況一般較少遇到，若有較為嚴(yán)重的冷凝，需報給血型研究部門作進(jìn)一步確認(rèn)，必要時應(yīng)作報廢處理，以免造成輸血反應(yīng)［3］。

表1 血型正反定型不一致的情況分類

［1］ 賈廷儒，孟莉，趙一兵，等.全自動樣品處理機(jī)微量加樣漏加分析〔J〕.中國輸血雜志，2005，18（1）：51.

［2］ 李金明，編著.臨床酶免測定技術(shù)〔M〕.北京：人民軍醫(yī)出版社，2006：145.

［3］ 邢培清，劉玉振，主編.實用輸血檢驗〔M〕.鄭州：鄭州大學(xué)出版社，2001：265.