Beckman-Coulter LH750在體液常規(guī)中的應(yīng)用評(píng)估

郭學(xué)霖 張瑞敏 楊勇

Beckman-Coulter LH750在體液常規(guī)中的應(yīng)用評(píng)估

郭學(xué)霖 張瑞敏 楊勇

目的評(píng)價(jià)Beckman-Coulter LH750在體液常規(guī)計(jì)數(shù)中的應(yīng)用。方法用LH750的體液模式測(cè)定腦脊液和胸腹水中的有核細(xì)胞和紅細(xì)胞, 通過(guò)批內(nèi)精密度、攜帶污染率、線(xiàn)性等指標(biāo)進(jìn)行評(píng)價(jià), 從隨機(jī)選擇的130例標(biāo)本中選擇符合要求的標(biāo)本對(duì)有核細(xì)胞和紅細(xì)胞進(jìn)行儀器和顯微鏡手工法計(jì)數(shù)比對(duì)。結(jié)果LH750在檢測(cè)腦脊液和胸腹水中的有何細(xì)胞核紅細(xì)胞具有良好的重復(fù)性和線(xiàn)性, 攜帶污染率低, 與手工法計(jì)數(shù)結(jié)果比對(duì)相關(guān)性良好。結(jié)論Beckman-Coulter LH750體液模式對(duì)于體液常規(guī)細(xì)胞計(jì)數(shù), 特別是細(xì)胞數(shù)量較多時(shí),與顯微鏡計(jì)數(shù)有較好的符合性, 精密度高, 攜帶污染率低, 使用方便快速, 在體液細(xì)胞計(jì)數(shù)中確實(shí)存在一定的優(yōu)越性。

體液模式；腦脊液；胸腹水；血細(xì)胞分析儀

目前, 腦脊液和胸腹水常規(guī)檢查計(jì)數(shù)多采用顯微鏡手工計(jì)數(shù)法, 操作過(guò)程繁瑣耗時(shí), 特別是細(xì)胞數(shù)量較多時(shí)結(jié)果準(zhǔn)確性、重復(fù)性受到個(gè)人因素影響較大,而結(jié)果的準(zhǔn)確性對(duì)于臨床的診斷鑒別診斷起到重要作用。Beckman-Coulter LH750提供了專(zhuān)門(mén)的體液模式用于體液細(xì)胞的計(jì)數(shù), 本文就LH750體液模式對(duì)體液常規(guī)計(jì)數(shù)能力進(jìn)行評(píng)價(jià)。

1 材料與方法

1. 1標(biāo)本來(lái)源 隨機(jī)選取武漢協(xié)和醫(yī)院住院患者130例體液標(biāo)本(EDTA-K2抗凝), 腦脊液50例, 胸水36例, 腹水44例。

1. 2儀器和試劑

1. 2. 1儀器 Coulter LH750；奧林巴斯光學(xué)顯微鏡；改良牛鮑血細(xì)胞計(jì)數(shù)板。

1. 2. 2試劑 LH750原裝配套試劑及質(zhì)控；等滲生理鹽水。

1. 3方法

1. 3. 1計(jì)數(shù) 在2 h內(nèi)進(jìn)行儀器計(jì)數(shù)及顯微鏡計(jì)數(shù)。儀器每日完成質(zhì)控, 保證儀器狀態(tài)良好, 選擇體液模式, 手工顛倒10次混勻標(biāo)本, 手工進(jìn)樣(大約200 μl)進(jìn)行計(jì)數(shù)。顯微鏡手工計(jì)數(shù)由兩名有經(jīng)驗(yàn)的檢驗(yàn)師按盲法, 嚴(yán)格按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程 》(第3版)操作［1］, 計(jì)數(shù)結(jié)果取均值 。渾濁或者帶血標(biāo)本用等滲鹽水稀釋后進(jìn)行計(jì)數(shù)。

1. 3. 2計(jì)數(shù)結(jié)果評(píng)價(jià) 批內(nèi)精密度測(cè)定：選取高、中、低三個(gè)WBC水平標(biāo)本, 對(duì)每一份標(biāo)本計(jì)數(shù)11次來(lái)評(píng)定精確性, 每一個(gè)標(biāo)本的第一個(gè)分析都會(huì)被丟棄。

攜帶污染率：進(jìn)行三個(gè)連續(xù)的高體液計(jì)數(shù)(H1-H3), 隨后立即進(jìn)行三個(gè)連續(xù)的低體液計(jì)數(shù)(L1-L3)的來(lái)評(píng)定由高至低的攜帶污染。攜帶污染被評(píng)定為

［(L1-L3)/(H3-L3)］×100%

線(xiàn)性：選取高值標(biāo)本(有核細(xì)胞3500/ul, 紅細(xì)胞13000/ul)稀釋比率為1:2～1:32, 以稀釋計(jì)算值為理論值與儀器結(jié)果做回歸分析, 求線(xiàn)性方程。

2 結(jié)果

批內(nèi)精密度：見(jiàn)表1。

攜帶污染率：見(jiàn)表2。

線(xiàn)性：有核細(xì)胞及紅細(xì)胞在儀器WBC與RBC線(xiàn)性范圍內(nèi)稀釋結(jié)果與理論值呈線(xiàn)性關(guān)系, 見(jiàn)表3。

比對(duì)：120例標(biāo)本中, 去除有干擾信息的標(biāo)本, 62例WBC>0.20×103細(xì)胞/μl, 33例RBC>10×103細(xì)胞/μl, 用于兩種方法的相關(guān)性比較, 結(jié)果見(jiàn)表4, 表5。

表1 有核細(xì)胞、紅細(xì)胞批內(nèi)精密度結(jié)果

表2 攜帶污染率

表3 稀釋線(xiàn)性結(jié)果

表4 LH 750有核細(xì)胞計(jì)數(shù)與手工法相關(guān)性比較

表5 LH750紅細(xì)胞計(jì)數(shù)與手工法相關(guān)性比較

3 討論

現(xiàn)在腦脊液和胸腹水常規(guī)細(xì)胞計(jì)數(shù)均采用顯微鏡手工的方法進(jìn)行計(jì)數(shù), 存在操作耗時(shí), 報(bào)告結(jié)果速度較慢, 細(xì)胞數(shù)較多時(shí), 勞動(dòng)強(qiáng)度較大, 不同的檢驗(yàn)人員之間結(jié)果重復(fù)性差等問(wèn)題。因此, 近些年, 大家都在探討以尿沉渣分析儀及血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀代替手工計(jì)數(shù)的可行性［2,3］。

Beckman-Coulter LH750對(duì)細(xì)胞的計(jì)數(shù)采用經(jīng)典的庫(kù)爾特技術(shù), 加上計(jì)算機(jī)軟件的技術(shù)更新, 結(jié)合了的智能微數(shù)技術(shù)(AccuCount), 及智能動(dòng)力系統(tǒng)等先進(jìn)的技術(shù), 專(zhuān)門(mén)增設(shè)了對(duì)體液測(cè)定的體液模式, 無(wú)需專(zhuān)門(mén)的試劑可得到有核細(xì)胞和紅細(xì)胞兩個(gè)參數(shù)。本文結(jié)果該儀器有核細(xì)胞和紅細(xì)胞檢測(cè)重復(fù)性好。攜帶污染率低, 有核細(xì)胞和紅細(xì)胞攜帶污染率分別為1.5%和0.4%,在儀器允許的2.0%和0.8的范圍內(nèi)。有核細(xì)胞和紅細(xì)胞濃度在0～100×103個(gè)/μl 和0～8×106個(gè)/μl有良好的相關(guān)性, 此范圍較大, 完全能滿(mǎn)足臨床的需求。與手工計(jì)數(shù)相比較, 有核細(xì)胞和紅細(xì)胞計(jì)數(shù)在腦脊液與胸腹水都有較好的相關(guān)性。

綜上, Beckman-Coulter LH75體液模式在腦脊液與胸腹水常規(guī)計(jì)數(shù)中精密度, 攜帶污染率, 線(xiàn)性良好,與手工計(jì)數(shù)法有較好的相關(guān)性。在細(xì)胞數(shù)量較少時(shí),變異系數(shù)稍大, 儀器要求有核細(xì)胞>0.20×103細(xì)胞/μl, RBC>10×103細(xì)胞/μl, 故細(xì)胞較少時(shí)建議手工進(jìn)行計(jì)數(shù)。細(xì)胞數(shù)較大時(shí), 結(jié)果可靠, 能夠代替手工計(jì)數(shù)。此外, 對(duì)儀器計(jì)數(shù)有細(xì)胞干擾的不能用儀器測(cè)定, 主要的細(xì)胞干擾產(chǎn)生有：標(biāo)本中的小凝塊, 細(xì)胞碎片；所以標(biāo)本必須經(jīng)抗凝處理, 而且需要及時(shí)測(cè)定, 最好在2 h內(nèi)完成檢驗(yàn)［4］。因此, Beckman-Coulter LH750體液模式對(duì)于體液常規(guī)細(xì)胞計(jì)數(shù), 特別是細(xì)胞數(shù)量較多時(shí), 與顯微鏡計(jì)數(shù)有較好的復(fù)合型, 并且能夠有效的提高結(jié)果的重復(fù)性, 大大縮短檢驗(yàn)時(shí)間, 而且該儀器較低的試劑成本, 表明其在體液細(xì)胞計(jì)數(shù)中確實(shí)存在一定的優(yōu)越性。

［1］ 葉應(yīng)嫵, 王毓三, 申子瑜. 全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程. 第3版. 南京：東南大學(xué)出版社, 2006: 312-317.

［2］ 陸鳳燕, 朱雪明, 潘揚(yáng), 等. iQ200全自動(dòng)尿沉渣分析儀在體液檢測(cè)中的應(yīng)用評(píng)價(jià). 醫(yī)療衛(wèi)生裝備, 2011(4): 42-44.

［3］ 何銀華, 顏宇飛, 蔡崢, 等. Sysmex XE-2100全自動(dòng)血液分析儀計(jì)數(shù)胸腹水有核細(xì)胞的評(píng)價(jià). 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué), 2011(4):228-230.

［4］ Barnes pw, Eby CS, Shimer G. An evaluation of the utility of performing body fluid counts on the coulter LH 750 Lab hematol, 2004,10(3):127-131.

R446.11

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1674-9316(2014)01-0015-03

10.3969/J.ISSN.1674-9316.2014.01.010

675000 楚雄醫(yī)藥高等專(zhuān)科學(xué)校檢驗(yàn)系(郭學(xué)霖)；武漢, 華中科技大學(xué)附屬協(xié)和醫(yī)院檢驗(yàn)科(張瑞敏 楊勇)