評價8種血清標志物在原發性肝癌診斷中的臨床價值

趙運勝，王 猛，崔辰瑩，李洪臣，廖 飛

（1.河北省秦皇島市第一醫院檢驗科 066000；2.重慶醫科大學檢驗醫學院 400016）

原發性肝癌（primary hepatic cancer，PHC）是目前世界上致死率最高的惡性腫瘤之一［1］。血清甲胎蛋白（alpha-fetoprotein，AFP）是目前檢測PHC最常用的腫瘤標志物，但其靈敏度和特異性都不夠滿意［2］。血清高爾基體蛋白73（serum Golgi glycoprotein 73，GP73）、甲胎蛋白異質體3（Lectin-reactiveaipha-fetoprotein，AFP-L3）、異常凝血酶原（des-γ-carboxyprothrombin，DCP）、磷脂酰基醇蛋白聚糖-3（glypican-3，GPC-3）有望成為診斷 PHC及預后的新標志物［3－4］。為探討這些血清標志物對我國肝癌的診斷價值，作者同時檢測了50例PHC患者血清中 GP73、AFP-L3、DCP、GPC-3、AFP、CA199、癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）和鐵蛋白（ferritin，FER）水平，并分析評價8種標志物的聯合檢測效能，以提高診斷和早期PHC預警的臨床應用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取河北省秦皇島市第一醫院2011年4～9月的住院、門診和體檢人員共計130例，其中經過病理檢驗明確的早期PHC患者50例（男38例，女12例），年齡32～81歲，平均57歲；慢性肝炎患者20例（男11例，女9例），年齡36～57歲，平均48歲；肝硬化患者20例（男15例，女5例），年齡41～81歲，平均55歲；其他消化系統惡性腫瘤患者20例（男14例，女6例），年齡47～78歲，平均69歲，未見肝轉移；健康對照者20例（男10例，女10例），年齡21～45歲，平均34歲。

1.2 方法

1.2.1 試劑與儀器 GP73、DCP、GPC-3測定試劑盒購自上海瑞奇科技有限公司，AFP-L3分離純化試劑盒購自北京熱景生物技術有限公司，AFP、CA199、CEA、FER測定試劑盒購自上海羅氏診斷產品有限公司，CODA全自動酶標儀和羅氏2010電化學發光儀。

1.2.2 標本采集 受檢者均采集空腹靜脈血3mL，用促凝管采血后將分離的血清儲存于－80℃冰箱待測。

1.2.3 檢測方法 GP73、DCP、GPC-3測定采用酶聯免疫定量方法檢測，按說明書操作。AFP-L3分離采用微量離心柱法，按說明書操作。采用羅氏電化學發光法測定血清CA199、CEA、總AFP和分離洗脫液中AFP-L3濃度，并計算AFP-L3占總AFP的比例。

1.3 統計學處理 利用SPSS13.0統計軟件進行統計學分析。檢測數據均為偏態分布，采用中位數（四分位數）表示，多組間比較采用 Kruskal-Wallis檢驗，兩組間比較采用 Mann－WhitneyU非參數檢驗。ROC曲線評價各指標對PHC診斷的敏感度、特異性、準確率，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

圖1 8種血清標志物鑒別診斷PHC的ROC曲線分析

2.1 各組8種血清標志物濃度檢測結果比較 肝癌組GP73、AFP-L3（%）、AFP 和 CA199 濃 度 明 顯 高 于 其 他 組 （P＜0.05）。肝癌組DCP和GPC-3濃度明顯高于除肝硬化組外的其他組（P＜0.05）。肝癌組CEA和FRE濃度僅明顯高于對照組（P＜0.05），見表1。2.2 ROC曲線分析8種血清標志物對PHC的鑒別診斷效果 8種 標 志 物 ［GP73、AFP-L3（%）、AFP、DCP、GPC-3、CA199、CEA和FER］ROC曲線下面積分別為0.824、0.745、0.668、0.640、0.635、0.732、0.642、0.621，95%可信區間分別為0.735～0.912、0.650～0.841、0.564～0.773、0.533～0.746、0.527～0.743、0.641～0.824、0.543～0.741、0.516～0.725，P＜0.05。通過 ROC曲線分析將 GP73、AFP-L3（%）、AFP、DCP、GPC-3、CA199、CEA和FER鑒別診斷肝癌的臨界值分別設定為72.70μg／L、15.0%、108.00μg／L、37.5μg／L、20.7μg／L、67.7U／mL、2.78μg／L、253.00μg／L，見圖1。

表1 各組8種血清標志物濃度檢測結果比較

表2 8種血清標志物單項及聯檢對PHC的診斷價值比較

2.3 8種血清標志物單項及其聯合檢測對PHC的診斷價值單項檢測中，GP73的靈敏度和準確率最高，GPC-3的特異性最高。系列實驗中GP73與其他一項或幾項指標聯合的特異性均可達100%，平行實驗中8種腫瘤標志物聯合檢測的靈敏度最高（98.0%），見表2。

3 討 論

GP73、AFP-L3（%）、DCP和 GPC-3等是新近發現的PHC血清標志物［5－6］。本文結果顯示肝癌患者GP73濃度明顯高于非肝癌患者，肝硬化和其他消化系統腫瘤患者血清中GP73濃度與對照組和肝炎組相比也有所升高。之前也曾有過文獻報道隨著肝臟疾病的發展，GP73升高［7］，肝硬化和肝癌患者中GP73水平明顯高于肝炎患者和健康人［8］。ROC曲線下面積分析GP73最大，單項檢測中其靈敏度為72.0%，明顯優于AFP，特異性為95.0%，這與以往的大部分研究結果一致［9－10］。因此，本文結果支持血清GP73濃度對檢測肝癌的臨床意義。

本文數據表明肝癌組血清中AFP-L3（%）和AFP明顯高于其他組。文獻曾報道AFP在肝癌、胃癌、肺癌、胰腺癌、膽道腫瘤和睪丸腫瘤等多種臨床疾病的患者血清中升高［11］，說明AFP診斷 PHC的特異性不夠。AFP-L3（%）靈敏度為60.0%，優于AFP，可作為低濃度AFP的PHC的互補診斷指標［12－13］。另外，結果表明肝癌患者DCP和 GPC-3濃度明顯高于除肝硬化外的其他組，說明DCP和GPC-3對于肝癌的鑒別診斷也有相當的臨床價值。但其靈敏度分別為44.0%和42.0%，與AFP相比并未體現出優勢。CA199的檢測靈敏度和AFP相當，它常作為診斷消化系統惡性腫瘤通用標志物之一。CEA和FER單獨測定僅可作為一種廣譜腫瘤標志物。相應地，其與GP73等其他指標聯合檢測可提高肝癌檢出靈敏度。

本文結果表明，多種腫瘤標志物聯合檢測可提高診斷PHC的靈敏度和特異性，GP73與其他一項或幾項指標聯合的特異性均可達100%，可作為確診PHC的較好標志物組合。平行實驗中以8種腫瘤標志物聯合檢測的靈敏度最高（98.0%），可作為排除肝癌的較好的判斷方法。GP73／AFP準確率最高，診斷效果最好。因此，在平時臨床工作中，可根據不同的診斷目的選擇不同的項目組合。總體而言，本文結果表明血清GP73和AFP-L3單獨診斷PHC的靈敏度和特異性都優于單用AFP；其聯合其他標志物檢測可提高對PHC診斷的可靠性。

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