顏佳鋮,紀曉俊,聶志奎,鄧中濤,任路靜,黃 和
(南京工業大學生物與制藥工程學院材料化學工程國家重點實驗室,南京210009)
微生物油脂中花生四烯酸含量的準確快速測定
顏佳鋮,紀曉俊,聶志奎,鄧中濤,任路靜,黃 和
(南京工業大學生物與制藥工程學院材料化學工程國家重點實驗室,南京210009)
建立了快速、準確測定微生物油脂中花生四烯酸(ARA)含量的氣相色譜檢測方法。選用DB-23毛細管色譜柱,設置合適的載氣壓力,采用FID檢測器,對ARA含量進行了定量分析。測定結果表明:油脂中各脂肪酸組分可有效分離,分析時間僅需20 min,ARA的回收率為90.146%~100.634%,相對標準偏差為4.175%。
ARA;氣相色譜分析;微生物油脂
花生四烯酸(Arachidonic Acid,簡稱ARA)屬于ω-6系列長鏈多不飽和脂肪酸。作為人體必需的多不飽和脂肪酸,是前列腺素(prostaglandin)、凝血惡烷(thromboxane)和白三烯(leucotriene)等類二十烷酸的前體物質[1-4]。ARA具有多種生理活性,在醫藥、食品和化妝品等領域都有廣泛的應用[5]。
ARA普遍存在于陸地動物的油脂中,但含量不高,無法滿足日益增長的需求,采用微生物發酵是獲取ARA的方式之一[6]。目前,ARA分析檢測技術主要有甲酯化氣相色譜法[7]、高效液相色譜法[8]、薄層色譜法[9]及柱層析[10]等。其中應用最為廣泛的是氣相色譜法。
脂肪酸含量的測定多采用面積歸一化法,但該法將各脂肪酸的校正因子視為相等,不能正確反映細胞內ARA含量。而外標法需要進樣量精確,對進樣技術要求較高。采用內標法可克服上述方法的缺陷,內標物選擇待測物中不含的脂肪酸,如奇數碳脂肪酸(C13∶0,C17∶0等)[11-12]。……