補腎活髓顆粒對慢性再生障礙性貧血患者骨髓血清中FGF-1的影響*

蘇迎潔 王曉寶 王樹慶△

（1．濰坊醫學院，山東 濰坊 261042；2．濰坊醫學院附屬醫院，山東 濰坊 261031）

慢性再生障礙性貧血（CAA）是一組由多種病因引起的骨髓造血功能衰竭，并以造血干細胞損傷、外周血全血細胞減少為特征的病證，可由某些急性中毒及各種電離輻射引起。中醫學認為本病屬“虛勞”、“髓勞”范疇，而腎虛血瘀是CAA發病中的主要病機。筆者采取以補腎填精、通絡活髓為法組方而成的補腎活髓顆粒治療CAA患者，觀察其臨床療效及對骨髓血清中酸性成纖維細胞生長因子（FGF-1）的影響。報告如下。

1 材料與方法

1．1 病例選擇 西醫診斷標準參照第3版《血液病診斷及治療標準》［1］制定。中醫證候診斷標準參照《當代中西醫結合血液病學》［2］和《中藥新藥臨床研究指導原則（試行版）》［3］。 納入標準：符合以上中、西醫診斷標準，年齡為18～65周歲，堅持治療者并簽署知情同意書。 排除標準：由陣發性睡眠性血紅蛋白尿癥、骨髓增生異常綜合征中的難治性貧血、急性造血停滯、骨髓纖維化、急性白血病、惡性組織細胞病等引起的全血細胞減少性疾病，對實驗藥品過敏者，合并嚴重心腦血管、肝、腎、造血系統及免疫系統疾病、精神病患者，妊娠或哺乳期婦女，不愿合作者。

1．2 病例資料 確診的66例CAA均為來源于濰坊醫學院附屬醫院2010年9月至2012年6月的住院及門診患者。采用隨機數字表法分為兩組。實驗組和對照組各33例，另設正常對照組20名，均為志愿者或患者健康的家屬。其中實驗組男性15例，女性18例；年齡18～65 歲，平均（39．33±8．74）歲；病程 0．8～156 個月，平均（40．06±24．32）個月。 對照組男性 16 例，女性 17例；年齡 18～65 歲，平均（37．72±10．67）歲；病程 0．5～221 個月，平均（36．57±24．60）個月。 正常對照組男性12 名，女性 8 名；年齡 18～45 歲，平均（30．24±9．28）歲。兩組資料經統計學分析，差異無統計學意義 （P＞0．05）。

1．3 治療方法 實驗組采用補腎活髓顆粒（中藥配方顆粒，四川綠色藥業科技發展股份有限公司）加減：生地黃30 g，熟地黃30 g，菟絲子20 g，枸杞子 20 g，雞血藤 30g，女貞子 15g，墨旱蓮 15g，當歸 10g，穿山甲 10g，地龍10 g。對照組采用西藥常規治療，予口服康力龍，每次 2～4mg，每日 3 次；環孢素 A 每次 50～100mg，每日3次。兩組患者在用藥期間合并感染者予經驗性抗感染治療；HGB低于60 g/L者輸注濾白懸浮紅細胞；出血傾向明顯 PLT＜30×109/L，或 PLT＜20×109/L 者輸注單采少白血小板。兩組均以6個月為1個療程，治療前及療程結束后均常規行骨髓穿刺及外周血檢查。正常對照組不作任何處理。

1．4 觀察指標 （1）對患者進行一般項目檢查，血、尿常規檢查，心（心電圖）、肝、腎功能檢查，觀察患者癥狀體征、外周血象變化及不良反應；并分別于療前、療后取骨髓液3mL，分離血清后，采用ELISA法檢測骨髓血清中FGF-1含量，實驗操作嚴格按照說明書進行，試劑盒購自武漢博士德生物工程有限公司。（2）對患者癥狀進行評分，以下癥狀分4級評分，其中心悸氣短、頭暈、乏力、面色蒼白，無計0分，輕度計2分，中度計4分，重度計6分；尿黃、形寒肢冷、食少、潮熱盜汗、手足心熱、口渴欲飲、便溏，無計0分，輕度計1分，中度計2分，重度計3分。

1．5 療效評價 西醫療效評價標準參照《血液病診斷及療效標準》［1］。基本治愈：貧血和出血癥狀消失，Hgb達 120 g/L（男性）或 110 g/L（女性），WBC 達 4．0×109/L，PLT達100×109/L，隨訪1年以上未復發）。緩解：貧血和出血癥狀消失，Hgb男性達120 g/L，女性達100 g/L），WBC 達 3．5×109/L 左右，PLT 也有一定程度增加，隨訪3個月病情穩定或繼續進步。明顯進步：貧血和出血癥狀明顯好轉，不輸血，Hgb較治療前1個月內常見值增長30 g/L以上，并能維持3個月。判定以上標準，均應3個月內不輸血。無效：經充分治療后，癥狀、血象未達明顯進步。中醫療效判定標準參照《中藥新藥臨床研究指導原則（試行）》［3］。 臨床痊愈：中醫臨床癥狀、體征消失或基本消失，證候積分減少≥95%。顯效：中醫臨床癥狀、體征明顯改善，證候積分減少≥70%，＜95%。有效：中醫臨床癥狀，體征均有好轉，證候積分減少≥30%，＜70%。無效：中醫臨床癥狀、體征均無明顯改善，甚或加重，癥狀積分減少不足30%。根據積分法判定中醫證候總療效。癥狀積分計算公式（尼莫地平法）為：（治療前積分-治療后積分）/治療前積分×100%。

1．6 統計學處理 應用SPSS15．0統計軟件。計量資料以（±s）表示，采用 t檢驗、χ2檢驗。 P＜0．05 為差異有統計學意義。

2 結 果

2．1 兩組臨床療效比較 見表1。實驗組與對照組療效相當（P＞0．05）。

表1 兩組臨床療效比較（n）

2．2 兩組中醫證候療效比較 見表2。實驗組中醫證候療效明顯優于對照組（P＜0．05）。

表2 兩組中醫證候療效比較（n）

2．3 兩組治療前后臨床癥狀積分比較 見表3。兩組療后癥狀積分均低于治療前（P＜0．01），且組間癥狀積分有明顯差異，實驗組積分低于對照組（P＜0．05）。

表3 兩組治療前后臨床癥狀積分比較（分，±s）

表3 兩組治療前后臨床癥狀積分比較（分，±s）

與本組治療前比較，*P＜0．01；與對照組治療后比較，△P＜0．05。 下同。

組 別 n 治療前 治療后實驗組 33 24．30±8．06 15．24±5．38*△對照組 33 23．60±8．26 20．81±5．97*

2．4 兩組治療前后外周血象比較 見表4。兩組患者療后 WBC、HGB、及 PLT 均得到明顯提升（P＜0．01），實驗組 HGB、PLT 改善優于對照組（P＜0．05）。

表4 兩組治療前后外周血常規比較（±s）

表4 兩組治療前后外周血常規比較（±s）

組 別HGB（g/L） WBC（×109/L）PLT（×109/L）實驗組 治療前 37．90±10．33（n=33） 治療后 65．22±20．67*△對照組 治療前 36．8±12．52 51．88±11．68 2．44±0．51 101．4±16．59*△ 3．51±0．73*56．24±12．88 2．62±0．48（n=33） 治療后 58．38±29．41*88．69±26．52* 3．55±0．84*

2.5 兩組治療前后骨髓血清中FGF-1水平比較 實驗組治療前 FGF-1水平為（35.21±6.54）ng/L，治療后為（70.46±8.95） ng/L；對照組治療前為（38.96±7.84）ng/L， 治療后為 （55.81±10.39）ng/L； 正常對照組為（102.33±20.57）ng/L。結果示治療前兩組間比較，無明顯差異 （P＞0.05），但表達水平低于正常對照組 （P＜0.01），治療后實驗組和對照組兩組均較治療前明顯增高（P＜0.01），實驗組表達較對照組高（P＜0.05），與正常對照組比較差異有統計學意義（P＜0.05）。

2.6 不良反應 兩組患者治療中均存在不良反應，經對癥處理后不良癥狀消失或緩解，不影響療效。其中實驗組手足震顫1例，肝功損害2例。對照組齒齦增生1例，肝功損害4例，痤瘡、多毛3例，不良反應發生率高于實驗組（P＜0.05）。

3 討 論

FGFs家族與造血調節有關，微環境平衡的維持和血細胞生成過程都有賴于FGFs的參與。FGF-1作為FGFs家族中的一員，研究表明其有明確的胚胎發育、血管生成、損傷修復、營養神經、骨骼生長作用［4］；其與造血功能的調節方面研究尚少，但其已發現的生物學功能都表明FGF-1與造血功能聯系密切。在成纖維細胞、血管內皮細胞、和成骨細胞等細胞表皮均有FGF-1的受體，作為一種多功能的細胞生長因子，FGF-1與這些細胞表面的受體結合后，啟動信號轉導通路［5-6］，發揮其促進骨組織、血細胞等的有絲分裂，影響多序列的造血細胞的擴增，并協同粒-巨噬細胞集落刺激因子（GM-CSF）增加非定向造血干/祖細胞集落的形成，從而促進粒細胞和巨核細胞生成和成熟。

本研究通過補腎活髓顆粒治療CAA，觀察治療前后癥狀積分、外周血象變化，以及骨髓血清中FGF-1的表達情況，來研究補腎活髓中藥在治療CAA中的作用及其對FGF-1的影響。補腎活血中藥可促進骨髓成纖維細胞的的生成，形態、功能的修復，從而改善造血微環境［7］。本研究提示，以補腎活髓顆粒治療CAA療效確切，且骨髓血清中FGF-1，治療后水平均有所提升，提示FGF-1參與再生障礙性貧血貧血的發生與疾病進展，補腎活血顆粒對FGF-1有調節作用，從而改善造血微環境，使骨髓指標及血常規發生變化。

目前對于FGF-1的研究基于其改善造血微環境角度的報道尚少，如果從微觀上進一步研究補腎活髓顆粒治療CAA的作用機理，進一步探究CAA的發病機制，從而為防治CAA提供更多策略。

［1］ 張之南，沈悌.血液病診斷及療效標準［M］.3版.北京：北京科技出版社，2007：20-21.

［2］ 鄧成珊，周藹祥.當代中西醫結合血液病學［M］.北京：中國醫藥科技出版社，1997：68.

［3］ 中華人民共和國衛生部.中藥新藥臨床研究指導原則 （試行版）［M］.北京：中國醫藥科技出版社，2002：178-180.

［4］ 譚亞清，劉德虎.人酸性成纖維細胞生長因子的研究進展［J］.生物技術通報，2013，29（5）：22-27.

［5］ 勞興珍，高向東.酸性成纖維細胞生長因子與肝素結合的結構與功能研究進展［J］.藥物生物技術，2010，17（4）：372-376.

［6］ 吳雷.補髓生血顆粒對慢性再障患者骨髓單個核細胞MEK表達的影響［J］.中醫藥信息，2011，28（3）：67-69.

［7］ 于志峰，戴錫孟.補腎活血法改善免疫介導型再障小鼠骨髓造血微環境的實驗研究［J］.中國中醫藥科技，2001，8（5）：332.