臨床免疫檢驗質(zhì)量控制的影響因素和具體措施

（白城市婦幼保健院，吉林 白城 137000）

臨床免疫檢驗質(zhì)量控制的影響因素和具體措施

洪雁

（白城市婦幼保健院，吉林 白城 137000）

臨床免疫檢驗；質(zhì)量控制；影響因素；具體措施

質(zhì)量控制直接影響免疫檢驗結(jié)果的準確性。免疫學檢驗的質(zhì)量控制與其他臨床檢驗一樣，對于保證各種免疫檢驗質(zhì)量，使其具有較高的可重復性、準確性以及各實驗室之間結(jié)果的可比性都有十分重要的意義。在臨床免疫檢驗中，影響檢驗質(zhì)量的因素較多，找出相關(guān)影響檢測結(jié)果準確性的因素并采取有針對性的質(zhì)量控制措施，有利于提高免疫檢驗結(jié)果的精確性，對提高多種疾病的準確有效診斷具有重要的臨床價值。為此，筆者分析影響臨床免疫檢驗質(zhì)量的因素，并提出檢驗前、中和后的質(zhì)量控制措施，以保證檢驗質(zhì)量。

1 影響素的分析

國內(nèi)開展的各項免疫學檢驗，均要求使用國家食品藥品監(jiān)督管理局準入和批準的儀器和試劑。這樣做不僅能更加統(tǒng)一、規(guī)范各項檢驗，各實驗室之間檢查結(jié)果更具可比性，而且也可避免很多不必要的醫(yī)療糾紛。由此，分析影響臨床免疫檢驗質(zhì)量控制的因素主要包括以下幾個方面。

1.1 檢測試劑和設(shè)備：在免疫檢測工作中，選用的試劑是否合理，檢測儀器和設(shè)備是否得到良好的保養(yǎng)和較高的精確度，均會直接影響檢測結(jié)果。如在檢測前，實驗室內(nèi)所用的分光光度計、酶標儀、恒溫箱、濕度計等精密儀器如果沒有準確校正，檢測結(jié)果會直接產(chǎn)生偏差；如果沒有嚴格把關(guān)檢測所用試劑的生產(chǎn)廠家，較難保證試劑的性能良好，直接影響檢測結(jié)果與質(zhì)量。

1.2 標本因素：在采集、運輸和儲存標本的各個中間環(huán)節(jié)中，均存在影響檢測質(zhì)量的相關(guān)因素。標本采集是最基礎(chǔ)的因素。如在采集血液標本時，采集的姿勢是否符合要求，采血時間是否合理等，均會對檢測結(jié)果產(chǎn)生影響。標本的運輸過程中，一旦出現(xiàn)失誤，會導致標本效能部分失去，影響檢測結(jié)果和質(zhì)量。在存儲過程中，如溫度過高會使標本失效，難以保證檢測質(zhì)量。另外，在標本檢測過程中，如不能恰當處理樣本中的干擾因素，導致樣本檢測過程中受到過多干擾因素的影響，將難以保證檢測結(jié)果的準確性[1]。

1.3 檢驗人員因素：免疫檢驗質(zhì)量與檢驗操作者有著重要的相關(guān)性。檢驗人員是否具有較高的基本專業(yè)知識和技能，是否具備較高的責任意識和嚴謹?shù)墓ぷ鲬B(tài)度，操作技術(shù)是否是熟練，是否認真綜合性分析檢驗結(jié)果，均會不同程度地影響檢驗質(zhì)量。

2 檢驗前的質(zhì)量控制

2.1 加強設(shè)備維護和管理，嚴格保證試劑質(zhì)量：儀器設(shè)備和試劑均需有國家食品藥品監(jiān)督管理局進口準入證或生產(chǎn)許可證并在限期內(nèi)使用，試劑應按要求的條件進行保存。

在免疫檢驗中所用的各種設(shè)備和儀器，要注意加強日常的管理和維護，定期不定期檢查儀器設(shè)備的精密度，給予專業(yè)性保養(yǎng)，保證檢驗儀器性能良好，保證檢測結(jié)果的精確性和可靠性。一旦發(fā)現(xiàn)儀器誤差，應及時予以校正；尤其對于各種精密儀器，應縮短檢測的時間間隔，并保證每次檢查嚴格到位。

目前市場上的試劑種類繁多，質(zhì)量參差不齊，應慎重選擇，并鑒定其性能，在合格的情況下方可使用。要嚴格保證各種檢驗試劑質(zhì)量，選購時嚴格進行驗收，盡量避免頻繁更換試劑生產(chǎn)廠家，防止對試驗結(jié)果產(chǎn)生不利影響[2]。如果實在需要更換，也必須做比對試驗。要注意試劑的有效期和保存條件[3]。要定期檢查試劑是否在有效期內(nèi)，保證每一批號試劑在下一次檢查前有效，按照要求進行保存，避免因試劑失效對試驗結(jié)果產(chǎn)生影響。

2.2 合理選擇試驗方法和正常上限值：同一檢測目的常常有很多免疫學檢測方法，但并非都符合要求。一種理想的免疫學試驗方法必須具有較高的敏感性、特異性、符合率、陽性預測值和陰性預測值，應在嚴格選擇患者和非患者對照測定的基礎(chǔ)上，逐一用上述指標評價每一種試驗方法。只有符合要求的方法，才能用于常規(guī)免疫學檢驗。

恰當設(shè)置正常上限值，直接關(guān)系到試驗的敏感性與特異性。設(shè)置不恰當，易產(chǎn)生大量的假陽性和假陰性結(jié)果。確定正常上限的原則是要兼顧試驗的特異性與敏感性，以免誤診和漏診。心通常采用ROC曲線來確定，即選用曲線敏感性和特異性都處于最優(yōu)水平又搭配最好的臨界（cut-off）值作為正常值上限。

2.3 嚴格做好標本采集至檢驗前各環(huán)節(jié)工作：采集標本時，要保持采集姿勢、時間等影響因素的準確性，囑患者認真遵守標本采集前的基本要求，如抽血一般在空腹12 h后進行，采集血液前2周應盡量保證規(guī)律性的作息和飲食習慣等。要合理選擇穩(wěn)定劑和抗凝劑。對于一些藥物或激素類測定的血液標本，體位變化和采血時間或影響檢驗結(jié)果[4]，在采集時要特別注意。如果在造成4～46點之間采集血液標本，檢測結(jié)果會出現(xiàn)一個峰值，促卵泡激素、生長激素和粗黃體激素會以陣發(fā)性的方式釋放出來[5]。對于此類標本，應連續(xù)采集數(shù)份標本，以其中間值作為測定值。

在標本運輸過程中，盡量減少外界因素干擾，對于因特定目的需用的尿液、糞便和腦脊液等，應防止在處理前標本出現(xiàn)變性現(xiàn)象。

對于需要儲存處理的血液標本，一般需要按照要求放置于冰箱中，注意嚴格掌握保存的適宜溫度；同時，應詳細標注清楚標本對應患者的姓名、性別、年齡等基本信息，以防張冠李戴。

在標本送檢時，應嚴格驗收標本，避免不合格標本進入檢驗流程[6]。應按規(guī)定合理處置樣本中的干擾因素，至標本符合檢驗要求時方可進行檢驗處理，以盡量減少檢驗誤差。

2.4 提高檢驗人員的綜合素質(zhì)：應注意加強包括專業(yè)知識、專業(yè)技能和職業(yè)素養(yǎng)等檢驗人員的培訓工作，使之具備熟練的操作技術(shù)和較高的責任意識，能在檢驗中嚴謹細致，認真完成每一項檢驗的操作細節(jié)，以保證較高的檢驗質(zhì)量。

3 檢驗中的質(zhì)量控制

在檢驗中，要保證檢驗結(jié)果準確可靠，應做到：①保證基質(zhì)和待測樣本的一致；②準備進行藥物檢測的濃度要與試驗水平一致；③確保沒有已知的污染危險性；④檢驗過程要符合說明書內(nèi)容，嚴格按照說明書進行[5]。同時還應做到：

3.1 保證儀器設(shè)備和試劑符合要求：檢驗中必須保證檢測儀器設(shè)備處于規(guī)定的工作狀態(tài)，保證所需試劑性能的穩(wěn)定性。對于配制而成的試劑，要保證成分和性能的合理性和穩(wěn)定性。

3.2 室內(nèi)環(huán)境因素達標：對樣本進行檢驗時，應嚴格控制檢驗室內(nèi)環(huán)境微小氣候，保證室內(nèi)有較為適宜的溫濕度，嚴格保證室內(nèi)無菌化，室內(nèi)的通風、照明等均應達到檢驗項目所需要的既定要求。

3.3 常用臨床免疫檢驗質(zhì)量控制要點[7]：①單向免疫擴散、火箭免疫電泳試驗（測定Ig、補體成分、其他蛋白成分）：每塊擴散板上均應用參考品制備標準曲線。②補體溶血活性（CH50、AP50）測定：應將混合的新鮮豚鼠血清滴定效價后，小量分裝，-30 ℃保存，每次試驗時用作質(zhì)量控制標準。③細胞免疫（花環(huán)試驗、淋巴細胞轉(zhuǎn)化試驗、膜表面免疫球蛋白、T細胞亞群等）試驗：通過預試驗選擇合格供者，自靜脈取血分離淋巴細胞，混懸于細胞冷凍保存液中，小量分裝后放置于液氮中保存，在每批試驗中用作質(zhì)量控制。流式細胞儀測定時，應采用配套的的質(zhì)控物。④免疫復合物測定：每批試驗用熱聚合人IgG進行質(zhì)量控制。⑤熒光抗體試驗：每批試驗均應設(shè)陽性與陰性對照，熒光抗體的最適工作濃度應經(jīng)常用強陽性、陽性、弱陽性、陰性對照血清核定。⑥酶免疫試驗：免疫組化法應準確選擇最適檢樣濃度和最適酶標抗體濃度，每批試驗均應設(shè)陽性與陰性對照。ELISA法均應用酶聯(lián)檢測儀測定吸光度判定結(jié)果。每批試驗應設(shè)陽性與陰性對照。定量測定時每批試驗均應用標準品制備標準曲線。血清標本應避免溶血和細菌污染，以防止過氧化物酶樣物質(zhì)造成的假陽性。標本應新鮮，4 ℃保存不宜超過5 d，以免因標本中的IgG聚合導致本底加深，影響判斷。⑦放射免疫與發(fā)光免疫試驗：每批試驗均應設(shè)置陽性與陰性對照，并應用參考品制備標準曲線。

4 檢驗后的質(zhì)量控制

檢驗工作結(jié)束后，相關(guān)工作人員應保證嚴格進行信息核對和記錄等，具體內(nèi)容包括儀器的審核、信息的核對和錄入以及填寫檢驗報告單等。結(jié)果應由2名以上檢驗人員進行核對和分析，并聽取臨床醫(yī)師的意見，以便及時彌補檢驗工作中的疏漏，盡量減少和避免對檢驗結(jié)果的影響，以免誤導臨床實踐。注意將檢驗結(jié)果按照要求留存適當?shù)臅r間，以便需要時能隨時查對。

能否有效控制免疫檢測質(zhì)量，直接影響能否對多種疾病進行臨床合理診斷，而免疫檢驗質(zhì)量受到多種因素的影響，檢驗設(shè)備和試劑、標本因素和檢驗人員等因素，均是影響檢驗質(zhì)量的重要因素，應在檢驗前、中和后的各個環(huán)節(jié)，加強對以上因素的嚴格控制，保證檢驗按照既定的要求嚴格進行，并保證各個檢驗細節(jié)的科學性和合理性，盡量減少檢驗中誤差的產(chǎn)生，提高免疫檢驗質(zhì)量。

[1] 瞿新.臨床免疫檢驗的質(zhì)量控制[J].醫(yī)學信息(中旬刊),2010,5(8): 2281.

[2] 莊婧.臨床免疫檢驗的質(zhì)量控制[J].臨床合理用藥雜志,2012,5 (30):96.

[3] 趙潔.對免疫學檢驗分析質(zhì)量控制的探討[J].中國醫(yī)藥指南,2012, 10(36):657-658.

[4] 鄭家深,黃澤禮.臨床免疫檢驗質(zhì)量控制研究[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥, 2011,7(14):44-45.

[5] 朱中梁,汪宏良,馬娟.免疫檢驗的質(zhì)量控制分析與研究[J].檢驗醫(yī)學與臨床,2013,8(10):1332-1333.

[6] 許軍海.臨床免疫檢驗的質(zhì)量控制問題研究[J].中外醫(yī)療,2013, 32(7):173,175.

[7] 葉應嫵,王毓三,申子瑜,主編.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學出版社,2006.

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：1671-8194（2014）30-0378-02