常振華,何 成
(1.渭南職業技術學院,陜西渭南714000;2.渭南市畜牧技術推廣中心,陜西渭南714000)
甘油三酯是乳脂和體脂的主要成分,其中磷酸甘油酰基轉移酶(1-acyl-sn-glycerol-3-pho sphate acyltransferase,AGPAT)是甘油三酯合成的關鍵酶[1]。研究發現,人AGPAT有8種異構體。鼠的AGPAT1基因和AGPAT3 基因在多種組織中表達,而AGPAT2 基因、AGPAT4 基因和AGPAT5基因的表達具有組織特異性[2],AGPAT6基因在小鼠的內臟、乳腺上皮細胞及皮下脂肪中高水平表達[3]。缺失AGPAT6基因的小鼠泌乳期會出現乳腺小泡和導管不發達的癥狀,而且會導致乳腺導管和乳腺上皮細胞中乳脂肪滴的大小和數量都顯著下降[4]。因此,AGPAT6 酶對乳脂肪的產生至關重要,AGPAT6基因可作為影響奶牛泌乳性能的候選基因。昝林森等[5]發現AGPAT6基因對荷斯坦奶牛乳脂率和奶產量有影響,而在奶山羊中尚未有AGPAT6基因多態性對產奶性狀的報道。為此本文采用PCR-RFLP技術分析了西農薩能奶山羊和關中奶山羊品種AGPAT6基因多態性對產奶性狀的影響,旨在為其產奶性狀選育提供理論依據。
從陜西千陽縣西農薩能奶山羊種羊場(202只)和西北農林科技大學種羊場(66只)采集西農薩能奶山羊(SN)268份血樣,從陜西省三原縣關中奶山羊良種繁育中心采集關中奶山羊(GZ)血樣281份,共計549 份血樣。每個個體采集血液10 mL,加ACD 抗凝劑帶回實驗室,-20 ℃冷凍保存備用;同時收集549頭奶山羊的羊奶進行奶成分分析,收集西農薩能奶山羊268只羊的產奶量。
1.2.1 基因組DNA 提取與AGPAT6基因引物奶山羊DNA 提取參照Chen[6]的方法。本試驗所用到的引物全部參照GenBank中公布的牛的AGPAT6基因序列(NC_007328.3),用Primer premier5.0軟件自行設計,如表1所示。……