胃癌組織中PIK3CA基因熱點突變篩查及臨床意義

郝蘭香，潘 超*，蔡建春

(廈門大學 附屬中山醫院 1.病理科； 2.胃腸外科， 福建 廈門 361004)

磷脂酰肌醇-3-激酶催化亞單位a(phosphatidylinositol 3-kinase catalytic alpha，PIK3CA)是目前3-磷酸肌醇激酶(phosphoinositide 3-kinase，PI3K)家族成員中發現的唯一可以發生體細胞突變而致癌的基因，約30%的人類實體瘤存在PIK3CA基因的突變[1]。胃癌作為中國最常見的惡性實體瘤之一，其發病率及病死率較高，其中基因突變在胃癌的發生、發展過程中起著非常重要的作用。鑒于相當一部分單核苷酸多態性的頻率在不同民族、人群有顯著差異，中國人群胃癌組織中是否存在PIK3CA基因突變？其突變頻率與突變模式如何？目前國內未見大規模病例研究。本研究旨在檢測中國人群胃癌組織中PIK3CA基因突變情況，探討其突變與胃癌臨床病理特征之間的關系，為胃癌的臨床治療、預后判斷提供理論基礎。

1 材料與方法

1.1 一般資料

收集廈門大學附屬中山醫院2007至2010年間行胃癌根治手術切除并經病理證實為胃癌的標本400例，患者均為中國人，年齡20～80歲。所獲標本均征得患者知情同意。

1.2 主要試劑

石蠟組織DNA提取試劑盒(北京信然達科技有限公司)；人類PIK3CA基因突變檢測試劑盒(廈門艾德生物醫藥公司)。

1.3 方法

1.3.1 組織DNA抽提：對入選病例石蠟包埋組織樣本行5 μm厚切片，每例10片，切片置于4 ℃冰箱保存。按照石蠟組織DNA提取試劑盒操作說明提取DNA，使用紫外分光光度計對DNA進行定量。

1.3.2 熒光PCR法檢測胃癌PIK3CA基因突變：人類PIK3CA基因突變檢測試劑盒基于實時PCR平臺結合了特異引物和雙環探針兩種技術，檢測DNA樣品中含有的突變基因。……