黃芪減輕血管緊張素Ⅱ誘導的小鼠血管重塑

裴 芳，王新全，岳榮川，黃 驥，黃 婕，王旭開，于長青*

(1.中國人民武裝警察部隊 重慶市總隊醫院 心血管內科， 重慶 400061； 2.第三軍醫大學 大坪醫院 野戰外科研究所 心血管內科 重慶市心血管病研究所，重慶 400042)

血管重塑與高血壓、動脈粥樣硬化、糖尿病血管病變、支架術后再狹窄等多種疾病密切相關[1]。因此，尋找有效干預血管重塑過程的藥物并闡明其機制，將對上述疾病的防治起關鍵作用。黃芪是傳統中藥，近年研究發現黃芪對心血管系統有多種有益作用[2]，但其對血管重塑的影響尚不清楚。本研究擬探討黃芪對血管重塑的影響及可能機制。

1 材料與方法

1.1 動物、試劑

SPF級雄性8周齡、體質量(20±2)g C57BL/6小鼠[北京維通利華實驗動物技術有限公司，動物合格證號：SCXK(京)2013- 0001]。AngⅡ、 Losartan(氯沙坦)及Masson染色試劑盒(Sigma-Aldrich公司)。黃芪注射液(粗提物；每mL含黃芪甲甙不少于1.0 mg，相當于含生藥2 g，即黃芪濃度相當于2 g/mL)(成都地奧制藥有限公司)。PCR引物(大連寶生物公司合成)。RNA提取試劑Trizol及RT-PCR試劑盒(Promega公司)。兔抗血管緊張素轉化酶2(angiotensin converting enzyme 2, ACE2)及血管緊張素Ⅱ 1型受體(angiotensin Ⅱ type Ⅰ receptor, AT1R)多克隆抗體及小鼠抗β-actin單克隆抗體(Abcam公司)。HRP標記的抗兔及小鼠二抗(Jackson ImmunoResearch公司)。ECL化學發光試劑盒(Thermo公司)。

1.2 方法

1.2.1 動物分組與給藥：動物實驗獲得第三軍醫大學大坪醫院實驗動物倫理委員會批準。將40只小鼠隨機均分為對照組、Ang Ⅱ組，Ang Ⅱ+氯沙坦和Ang Ⅱ+黃芪(astragalus membranaceus)組。其中，對照組每天灌胃0.2 mL 0.9%氯化鈉注射液1次；Ang Ⅱ 組采用背部埋微滲透泵的方法，以200 ng/(kg·min)的劑量持續泵入AngⅡ；AngⅡ+ 氯沙坦組在AngⅡ處理的同時，以10 mg/(kg·d)的劑量每天灌胃1次；AngⅡ+黃芪組在AngⅡ處理的同時，以20 g/(kg·d)的劑量每天灌胃1次。……