異甘草素增強大鼠腦基底動脈平滑肌細胞BKCa電流

田偉偉，王 蕊，張傳林，趙 磊，馬克濤，李 麗，司軍強

(石河子大學 醫學院 1.生理教研室；2.新疆地方與民族高發病教育部重點實驗室, 新疆 石河子 832002)

缺血性腦血管病約占腦血管病的80%，腦缺血后引起的腦卒中、血管性癡呆和認知功能障礙合并阿爾茨海默病等嚴重威脅人類健康[1]。大電導鈣激活鉀通道(large-conductance calcium-activated potassium channels; BKCachannel; BKCa)是血管平滑肌細胞(vascular smooth muscle cell, VSMC)上具有負反饋調節的重要K+通道。BKCa通道的激活會產生一個瞬時外向鉀電流，使VSMC膜電位發生超極化，導致血管舒張[2]。異甘草素(isoliquiritigenin, ISL)源于豆科植物甘草的根, 串果藤和香殊蘭的球莖等，具有抗腫瘤、抗氧化和抗感染等作用[3]，對腦缺血再灌注損傷和老年性癡呆也具有改善和保護作用[4]，但其對腦血管的作用及其機制尚不清楚。本研究觀察ISL對Wistar大鼠腦基底動脈VSMC BKCa通道的調節作用。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

Wistar大鼠，SPF級，雌雄不拘，體質量為200～300 g(新疆自治區疾病控制中心動物飼養科提供，許可證編號SCXK 新2011- 0001)。

1.2 試劑

所用藥物用DMSO 液配制，通過開關控制藥物灌流速度、溫度和其他成分。ISL(純度>98%)、四乙胺(tetraethyl ammonium，TEA)、苯腎上腺素(phenylephrine，PE)(Sigma公司)，其余均為國產分析純試劑。

1.3 單個腦基底動脈VSMC的制備

給大鼠腹腔注射10%水合氯醛(0.3 mL/100 g)麻醉后，斷頭處死，迅速取腦，置于預先配制的細胞外液中，快速取出腦基底動脈并將周圍結締組織分離。單個腦基底動脈VSMC的制備參照文獻[5]。

1.4 腦基底動脈直徑的測量

腦基底動脈血管段操作方法參照文獻[6]，血管段在水浴槽中孵育20 min穩定后，分別給予1×10-5mol/L PE(1)、1×10-5mol/L PE+1×10-4mol/L ISL和1×10-5mol/L PE(2)，記錄血管段直徑的變化。

1.5 全細胞膜片鉗記錄技術

在室溫條件下(22 ℃～25 ℃) 使用Axon700B放大器(Axon公司)進行單個腦基底動脈VSMC全細胞膜片鉗實驗，全細胞膜片鉗技術參照文獻[7]。