阿維菌素和甲維鹽對家蠶的毒性測定

沈忠明，孫海燕，戴建忠，陳偉國

（1.許村鎮(zhèn)農(nóng)技水利服務(wù)中心，浙江海寧314409；2.海寧市蠶桑技術(shù)服務(wù)站，浙江 海寧 314400）

阿維菌素和甲維鹽對家蠶的毒性測定

沈忠明1，孫海燕2，戴建忠2，陳偉國2

（1.許村鎮(zhèn)農(nóng)技水利服務(wù)中心，浙江海寧314409；2.海寧市蠶桑技術(shù)服務(wù)站，浙江 海寧 314400）

本文測定了阿維菌素和甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽（簡稱“甲維鹽”）4種殺蟲劑制劑對家蠶的急性食下毒性和殘毒期，結(jié)果表明：對3齡起蠶的LC50值分別為阿維菌素乳油7.2343×10-4mg/L，阿維菌素水乳劑7.6512×10-4mg/L，甲維鹽微乳劑8.5940×10-4mg/L，甲維鹽乳油14.0112×10-4mg/L。阿維菌素和甲維鹽4種制劑的相同質(zhì)量濃度（13.33 mg/L）稀釋液噴灑桑樹，在桑葉上的殘毒期分別為3.2%阿維菌素乳油2400倍約為50 d，1.8%阿維菌素水乳劑1350倍、2.3%甲維鹽乳油1725倍約為60 d，2.2%甲維鹽微乳劑1650倍＞60 d；阿維菌素類4種制劑對家蠶的急性食下毒性極強，處理間差異較小，但在桑葉上的殘毒期很長，處理間差異較大。

阿維菌素；甲維鹽；家蠶；毒性

阿維菌素（Avermectin）是由灰色鏈霉菌（Strepto?myces avermitilis）發(fā)酵產(chǎn)生的，具有殺蟲、殺螨、殺線蟲活性的十六元大環(huán)內(nèi)酯化合物，被作為殺蟲劑在農(nóng)業(yè)和畜牧業(yè)中廣泛使用。為提高活性、擴大抗蟲譜和降低毒性，通過誘變、生物轉(zhuǎn)化和化學(xué)修飾等方法，產(chǎn)生了阿維菌素類衍生物，目前已商品化的有伊維菌素（Ivermectin）、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽（又名埃瑪菌素，簡稱甲維鹽，Emamectin Benzoate）、埃普里諾菌素（又名乙酰氨基阿維菌素，Eprinomectin）、和多拉菌素（Doramectin）等4種化學(xué)結(jié)構(gòu)改造產(chǎn)物［1-2］，其中阿維菌素、伊維菌素、甲維鹽主要用作農(nóng)作物殺蟲劑［3］。隨著對殺蟲劑的安全性和環(huán)保性要求提高，從傳統(tǒng)的乳油制劑向微乳劑和水乳劑等水性化農(nóng)藥劑型發(fā)展［4］，由此，使得阿維菌素類殺蟲劑的產(chǎn)品類型越來越豐富。盡管近年來阿維菌素類殺蟲劑對家蠶的毒性研究報道較多［5-10］，但涉及的殺蟲劑劑型種類不多，且以急性毒性研究為主，結(jié)合在桑葉上的殘毒期測定較少［9-10］。為此，我們比較了阿維菌素和甲維鹽4種制劑對家蠶的急性毒性和桑葉上的殘毒期，為該類殺蟲劑在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上的合理使用和對養(yǎng)蠶生產(chǎn)的安全性評價提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試農(nóng)藥：3.2%阿維菌素乳油，浙江錢江生物化學(xué)股份有限公司生產(chǎn)，農(nóng)藥登記證號PD20110266；1.8%阿維菌素水乳劑，浙江錢江生物化學(xué)股份有限公司生產(chǎn)，農(nóng)藥登記證號PD20110261；2.3%甲維鹽乳油，浙江錢江生物化學(xué)股份有限公司生產(chǎn)，農(nóng)藥登記證號PD20096698；2.2%甲維鹽微乳劑，浙江海正化工股份有限公司生產(chǎn)，農(nóng)藥登記證號PD20110495。

家蠶品種：白玉×秋豐，浙江省海寧市新興蠶種制造有限公司生產(chǎn)。

桑樹品種：海寧市鹽官鎮(zhèn)城北村郭建鑫農(nóng)戶的桑園。強桑1號，3年生，中干偏低養(yǎng)成，栽植密度為每667 m2桑園栽植800株。

1.2 對家蠶的急性食下毒性測定

經(jīng)預(yù)備試驗，將阿維菌素乳油、阿維菌素水乳劑、甲維鹽乳油、甲維鹽微乳劑等4種殺蟲劑均稀釋成5～7個梯度濃度，取適熟桑葉分別浸入不同處理的藥液中1 min，取出后自然晾干，置于保鮮盒內(nèi)備用，各處理區(qū)用20頭3齡起蠶供試，在26.5±1℃、相對濕度75%～85%的恒溫室內(nèi)飼養(yǎng)，24 h后改用新鮮無毒桑葉繼續(xù)飼養(yǎng)至4齡餉食，每天調(diào)查幼蟲中毒死亡率，以清水處理為空白對照，3次重復(fù)。采用DPS統(tǒng)計軟件對藥液質(zhì)量濃度對數(shù)與幼蟲死亡率概率值進行線性回歸分析［11］，求出致死中濃度（LC50）和95%置信限。

1.3 在桑葉上的殘毒期試驗

將阿維菌素類4種供試殺蟲劑均稀釋成有效成份為13.33 mg/L的藥液，即3.2%阿維菌素乳油2400倍，1.8%阿維菌素水乳劑1350倍，2.3%甲維鹽乳油1725倍，2.2%甲維鹽微乳劑1650倍。每種藥液分別噴10株桑樹，枝條頂端最大葉位以上用標(biāo)簽標(biāo)記，防止采摘未噴藥的桑葉。噴藥后15 d開始每隔5 d采摘桑葉飼喂3齡起蠶，直至未見中毒蠶出現(xiàn)，分別于噴藥后15 d、20 d、25 d、30 d、35 d、40 d、45 d、50 d、55 d、60 d采葉飼喂3齡起蠶，共10批供試蠶，每個批持續(xù)喂飼1個齡期，以蠶能就眠蛻皮為正常，至4齡起蠶時統(tǒng)計中毒蠶頭數(shù)，各試驗小區(qū)30頭蠶，3次重復(fù)。

1.4 對家蠶的中毒癥狀觀察

將桑葉分別浸入有效成份均為13.33 mg/L的阿維菌素類4種供試殺蟲劑稀釋液中1 min，取出后自然晾干，喂飼3齡起蠶和5齡第3 d蠶，觀察記錄中毒癥狀。

2 結(jié)果與分析

2.1 阿維菌素和甲維鹽對家蠶的急性食下毒性

采用浸葉法測定阿維菌素類4種殺蟲劑對3齡起蠶的急性食下毒性，試驗結(jié)果見表1。對家蠶的毒性大小依次為：阿維菌素乳油的LC50值7.2343×10-4mg/L＞阿維菌素水乳劑的LC50值7.6512×10-4mg/L＞甲維鹽微乳劑的LC50值8.5940×10-4mg/L＞甲維鹽乳油的LC50值14.0112×10-4mg/L，極差為6.7769×10-4mg/L，即供試的阿維菌素和甲維鹽4種制劑對3齡起蠶的急性食下毒性均極強，但不同制劑產(chǎn)品的毒性差異較小。

2.3 阿維菌素和甲維鹽對家蠶的殘毒期

阿維菌素和甲維鹽4種制劑稀釋藥液噴于桑樹后間隔不同時間采葉喂飼3齡起蠶，統(tǒng)計中毒死亡率，結(jié)果見表2。3.2%阿維菌素乳油2400倍，噴藥后20 d內(nèi)死亡率為100%，噴藥后25 d～45 d的死亡率逐漸下降，50 d后無中毒死亡蠶；1.8%阿維菌素水乳劑1350倍，噴藥后25 d內(nèi)死亡率為100%，噴藥后30 d～55 d的死亡率逐漸下降，60 d后無中毒死亡蠶；2.2%甲維鹽微乳劑1650倍噴藥后40 d內(nèi)死亡率為100%，噴藥后60 d的死亡率仍達54.44%；2.3%甲維鹽乳油1725倍，對3齡起蠶的殘毒表現(xiàn)與1.8%阿維菌素水乳劑1350倍相似。

表1 阿維菌素和甲維鹽4種制劑對3齡起蠶的急性食下毒性測定Table 1 The acute peroral toxicity determination of 4 insecticides on the third period silkworm

表2 阿維菌素和甲維鹽4種制劑對3齡起蠶的殘毒期測定Table 1 The residual time determination of 4 insecticides on the third period silkworm

試驗結(jié)果表明，阿維菌素和甲維鹽4種制劑在桑葉上的殘毒期均很長，3.2%阿維菌素乳油2400倍約為50 d，1.8%阿維菌素水乳劑1350倍、2.3%甲維鹽乳油1725倍約為60 d，2.2%甲維鹽微乳劑1650倍＞60 d。

2.3 家蠶的中毒癥狀

阿維菌素和甲維鹽4種制劑對家蠶的中毒癥狀和中毒反映時間基本一致，這與不同種類的急性食下毒性比較接近的結(jié)果相符。家蠶食下質(zhì)量濃度均為13.33 mg/L的4種供試殺蟲劑藥液處理的桑葉后，3齡起蠶約1 h后表現(xiàn)出拒食，靜伏不動；未見明顯吐液或吐液量極少；部分蠶死亡前后尾部向背彎曲，側(cè)倒；12 h左右全部死亡，體色清白，蠶體軟癟。5齡第3 d蠶約1 h后食桑明顯減緩，2 h后出現(xiàn)靜伏，拒食；可見少量吐液，約12 h后死亡，蠶體軟癟，尾部有明顯縮皺。

3 結(jié)論和討論

隨著阿維菌素類衍生物及其新劑型的開發(fā)，阿維菌素類殺蟲劑作為高效無公害生物農(nóng)藥在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用仍將擴大，對養(yǎng)蠶生產(chǎn)安全的不利影響隨之增加，因此，正確評價阿維菌素類殺蟲劑對家蠶的毒性及安全性顯得更加重要。

本試驗結(jié)果表明，阿維菌素和甲維鹽4種不同制劑產(chǎn)品對家蠶的急性食下毒性均極強，對3齡起蠶的LC50值為7.2343×10-4～14.0112×10-4mg/L，甚至高于擬除蟲菊酯類和殺蟲雙等農(nóng)藥［12-14］，屬于目前大量使用的對家蠶毒性等級最高的殺蟲劑品種。本試驗測定阿維菌素和甲維鹽4種制劑產(chǎn)品在桑葉上的殘毒期，質(zhì)量濃度均為13.33 mg/L的稀釋液處理的桑葉，對家蠶的殘毒期最短的約50 d，最長的經(jīng)過60 d后對家蠶的死亡率仍超過50%。

供試的阿維菌素和甲維鹽4種制劑對家蠶的急性食下毒性差異不大，但在桑葉上的殘毒期則相差很大，由此可見，阿維菌素類殺蟲劑的急性食下毒性與殘毒期的相關(guān)性不強，因此，不能以急性食下毒性結(jié)果來評價其對家蠶的風(fēng)險大小，也不能以某種阿維菌素類殺蟲劑的殘毒期來推測其它不同種類或劑型，以避免由此造成的家蠶中毒損失。

由于影響阿維菌素在桑葉上殘毒期長短的因素很多，其中光照條件對桑葉上阿維菌素的毒性消解十分明顯［15-16］。因此，在判斷阿維菌素類殺蟲劑污染桑園時也必須考慮類似因素，在桑樹生長旺盛期，枝葉生長茂盛，光照強度弱，會使阿維菌素類殺蟲劑在桑葉上的殘留毒性消解減慢。

阿維菌素類殺蟲劑的應(yīng)用趨勢是制劑含量逐步提高，種類和劑型不斷增加，混配應(yīng)用十分普及，因此，對于蠶桑地區(qū)防止阿維菌素類殺蟲劑引起的家蠶中毒必須引起高度重視。

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Determination of Silkworm Toxicity of Avermectin and Emamectin Benzoate

SHEN Zhong-ming1,SUN Hai-yan2,DAI Jian-zhong2,CHEN Wei-guo2
(1.Xucun Agriculture and Water Conservancy Service Center,Haining 314409 Zhejiang,China;
2.Haining Sericultural Technology Service Stations,Haining 314400 Zhejiang,China）

In this paper,the acute peroral toxicity and residual times of 4 insecticides with Avermectin and Emamectin Benzoate preparations were determined.The results showed that the LC50on the third period silkworm were 7.2343×10-4mg/L of Avermectin EC,7.6512×10-4mg/L of Avermectin EW,8.5940×10-4mg/L of Emamectin Benzoate Microemulsion and 14.0112×10-4mg/L of Emamectin Benzoate Emulsifiable Concentrate.The same concentration(13.33 mg/L)of 4 di?luted preparations with Avermectin and Emamectin Benzoate were sprayed on the mulberry,and the residual time were 50 d of 2400 times'3.2%Avermectin EC,60 d of 1350 times'1.8%Avermectin EW and 1725 times'2.3%Emamectin Benzoate Emulsifiable Concentrate,and more than 60 d of 1650 times'2.2%Emamectin Benzoate Microemulsion.It was concluded that the 4 Avermectin preparations were extremely toxic on the acute peroral toxicity,and the residual times on the mulberry leaves were very long.

Avermectin;Emamectin Benzoate;silkworm;toxicity

S884.9+6

A

0258-4069［2014］01-015-04

沈忠明（1967-），男，浙江海寧人，農(nóng)藝師，主要從事蠶桑技術(shù)推廣工作。E-mail:tsycom@163.com

陳偉國，推廣研究員。E-mail:bscwg@163.com