聯(lián)合檢測支氣管肺泡灌洗液中腫瘤壞死因子α 及人轉(zhuǎn)化生長因子β1 的臨床意義

于 露，黃 江，劉躍建

(四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科，四川 成都610072)

近年來，細(xì)胞因子和生長因子與肺纖維化的關(guān)系的研究越來越得到學(xué)者們的關(guān)注，20 余種細(xì)胞因子和生長因子被證實與肺纖維化相關(guān)［1］。腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor α，TNF-α)和轉(zhuǎn)化生長因子β1(transform growth factor β1，TGF-β1)正是其中比較重要的兩個炎癥細(xì)胞因子。我們檢測了結(jié)締組織疾病所致間質(zhì)性肺疾病(interstitial lung disease with connective tissue disease，CTD-ILD)患者、其他病因所致的間質(zhì)性肺疾病(NCTD-ILD)患者和健康體檢者支氣管肺泡灌洗液(BALF)中TNF-α、TGF-β1 水平，探討其臨床意義，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2010 年6 月至2011 年5 月在四川省人民醫(yī)院住院及門診診治的13 例CTD-ILD 患者(CTD-ILD 組)，包括系統(tǒng)性紅斑狼瘡所致間質(zhì)性肺疾病(SLE-ILD)患者6 例，均為女性，年齡(26．5±5．1)歲;類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎所致間質(zhì)性肺疾病(RAILD)患者5 例，男1 例，女4 例，年齡(48．2±10．3)歲;系統(tǒng)性硬化所致間質(zhì)性肺疾病(SSc-ILD)患者2例，均為女性，年齡(48．5±5．2)歲。NTCD-ILD 患者12 例(NCTD-ILD 組)，包括特發(fā)性肺纖維化(IPF)患者10 例，男5 例，女5 例，年齡(57．3±4．7)歲;非特異性間質(zhì)性肺炎(NSIP)患者2 例，男1 例，女1例，年齡(55．3±3．7)歲。同期健康體檢者(對照組)21 例，男12 例，女9 例，年齡(48．5±8．7)歲。SLEILD 患者均符合2009 系統(tǒng)性狼瘡國際協(xié)作組(SLICC)修改的美國風(fēng)濕病學(xué)會系統(tǒng)性紅斑狼瘡分類標(biāo)準(zhǔn)［2，3］;RA-ILD 患者均符合2010 年美國風(fēng)濕病學(xué)會聯(lián)合歐洲抗風(fēng)濕病聯(lián)盟的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎分類標(biāo)準(zhǔn)［4］;SSc-ILD 患者均符合2010 年風(fēng)濕病學(xué)會聯(lián)合歐洲抗風(fēng)濕病聯(lián)盟對系統(tǒng)性硬化的診斷標(biāo)準(zhǔn)［5］。ILD 診斷均符合2002 年美國胸科協(xié)會(ATS)和歐洲呼吸協(xié)會(ERS)制定的結(jié)締組織病相關(guān)ILD 的缺乏肺活檢的診斷依據(jù)［6］。NTCD-ILD 患者均符合2002 年美國胸科學(xué)會(ATS)和歐洲呼吸學(xué)會(ERS)對IPF 診斷達(dá)成的國際共識［7］;NSIP 患者依靠臨床-影像學(xué)診斷。對照組納入標(biāo)準(zhǔn):體檢發(fā)現(xiàn)肺外周孤立小結(jié)節(jié)而無癥狀者，長期隨訪結(jié)節(jié)穩(wěn)定無變化，臨床表現(xiàn):無發(fā)熱、咯黃痰等炎癥表現(xiàn)，肺部聽診未聞及啰音，輔助檢查:血象正常，胸片檢查無明顯炎癥表現(xiàn)，支氣管鏡下支氣管黏膜表現(xiàn)為正常。排除標(biāo)準(zhǔn):①急性肺部感染、活動性咯血及既往有肺結(jié)核病史者;②腫瘤患者;③嚴(yán)重心、肝、腎疾病，妊娠患者，精神病患者;④不符合診斷標(biāo)準(zhǔn)及納入標(biāo)準(zhǔn)者，以及臨床資料不完整，影響診斷者。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 研究對象于術(shù)前6 小時禁飲、禁食，術(shù)前以2%利多卡因做局部霧化吸入麻醉，使用日本Olympus 公司生產(chǎn)的BF-260 型電子支氣管鏡，將支氣管鏡沿鼻道緩慢插入患者氣管，取單側(cè)病變最嚴(yán)重處作為灌洗部位，將支氣管鏡的前端嵌入段或亞段開口，經(jīng)活檢孔快速注入37 ℃無菌生理鹽水。每次25 ml，總量100 ml，用負(fù)壓吸引，回吸收量一般為注入液量的40% ～60%［8］。

1.2.2 BALF 中TNF-α、TGF-β1 的檢測 使用深圳欣博盛生物科技有限公司生產(chǎn)的TNF-α、TGF-β1 試劑盒，兩個實驗均采用雙抗體夾心ELISA 方法，檢測BALF 中TNF-α、TGF-β1 水平。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 19．0 統(tǒng)計軟件對所有數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，多組樣本均數(shù)的比較采用方差分析及SNK-q檢驗，P＜0．05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

CTD-ILD 組和CTD-ILD 組兩項因子均明顯高于對照組，且CTD-ILD 組高于NCTD-ILD 組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0．05)。見表1。

表1 三組BALF 中TNF-α 和TGF-β1 比較 (pg/ml)

3 討論

間質(zhì)性肺疾病可繼發(fā)于結(jié)締組織疾病，是一類通過自身免疫反應(yīng)導(dǎo)致機體損傷的全身性疾病(包括類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性硬化病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡，原發(fā)性干燥綜合征等)，累及到肺泡、肺間質(zhì)及支氣管周圍組織造成不同程度的炎癥反應(yīng)及纖維組織增生，稱為CTD-ILD［9］。目前研究認(rèn)為，在眾多的細(xì)胞因子及生長因子中，TNF-α 及TGF-β1 在肺纖維化的發(fā)病過程中起著十分重要的作用，它們在組織損傷早期和組織修復(fù)過程中，都促進(jìn)了肺纖維化的發(fā)生發(fā)展。TNF-α、TGF-β1 參與間質(zhì)性肺病形成的始動和維持過程［10］。本研究結(jié)果顯示:CTD-ILD 組BALF 中TNF-α、TGF-β1 的數(shù)值高于NCTD 組，明顯高于對照組，提示TNF-α、TGF-β1 在CTD-ILD 患者BALF 中升高更為明顯，兩項聯(lián)合檢測有助于CTDILD 診治，但樣本數(shù)較少，觀察時間短，有待大樣本臨床研究完善。

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