血清HBV—DNA熒光定量PCR檢測與乙肝病毒標志物模式的相關性

【摘要】目的分析討論血清HBV-DNA熒光定量PCR檢測與乙肝病毒標志物模式的相關性。方法對1196例患有乙肝的患者同時進行血清HBV-DNA熒光定量PCR檢測與乙肝病毒標志物檢測，對其結果進行統(tǒng)計分析。結果對于比較常見的模式1，3，5陽性503，HBV-DNA陽性率95.8；1，4，5陽性469例，HBV-DNA陽性率23.8；1，5陽性103例，HBV-DNA陽性率35.8；1，3陽性103例，HBV-DNA陽性率3.8。結論僅僅依靠乙肝病毒標志物的檢測進行早期診斷以及判斷病毒含量、病程發(fā)展情況是遠遠不夠的，要結合HBV-DNA熒光定量PCR檢測，這樣才能對乙型肝炎基因診斷，特別是進行抗病毒治療和治療監(jiān)測方面起到重要作用。

【關鍵詞】血清HBV-DNA熒光定量PCR；乙肝病毒標志物；相關性

乙型肝炎是一種嚴重威脅人類健康的傳染病，據(jù)世界衛(wèi)生組織估計，每年有100萬人死于本病，我國為乙肝高發(fā)區(qū)，約有1.2億人為乙肝病毒攜帶者[1]。臨床上乙肝病原學診斷傳統(tǒng)上采用ELISA法來檢測HBV，它檢測的是人體對HBV的免疫反應狀態(tài)，是目前診斷乙型肝炎最常用的指標；實時動態(tài)熒光定量PCR檢測乙型肝炎病毒脫氧核糖核酸（DNA），能反映血液中病毒核酸的確切數(shù)量。現(xiàn)就血清HBV-DNA熒光定量PCR檢測與乙肝病毒標志物模式的相關性做以下討論分析：

1資料與方法

1.1一般資料2011年1月——2013年1月間的1196例乙肝的患者，男673例，女523例，年齡11-67歲，臨床診斷符合2000年全國傳染病學術會議診斷標準[2]。

1.2方法乙肝病毒標志物檢測采用ELESA法，檢測試劑盒為（上?？迫A有限公司）提供，完全按照試劑說明書操作；血清HBV-DNA熒光定量PCR檢測使用BIO-RAD i-Cycler熒光定量PCR檢測儀進行檢測，試劑為（深圳匹基生物工程股份有限公司）提供，完全按照試劑說明書操作。對5項乙肝病毒標志物報告順序為HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb。

2結果

對于比較常見的模式1，3，5陽性503，HBV-DNA陽性率95.8；1，4，5陽性469例，HBV-DNA陽性率23.8；1，5陽性103例，HBV-DNA陽性率35.8；1，3陽性103例，HBV-DNA陽性率3.8，見表1。

3討論

乙型肝炎血清標志物檢測是目前診斷乙型肝炎最常用的指標，現(xiàn)仍是檢測乙型肝炎的常用方法，隨著分子生物學的發(fā)展，熒光定量PCR技術廣泛用于臨床的診斷與治療，它是直接檢測血清中的乙型肝炎病毒DNA，是反應人體內(nèi)乙型肝炎病毒復制的直接指標，也是最特異，最靈敏的指標，反映了乙型肝炎病毒數(shù)量不同在患者肝臟中的復制情況[3]。

從本組實驗表明：乙型肝炎患者血清HBV標志物模式不同，其HBV-DNA陽性率也有所差異，對于比較常見的模式1，3，5陽性503，HBV-DNA陽性率95.8；與有關文獻報道一致[4]。1，4，5陽性469例，HBV-DNA陽性率23.8；1，5陽性103例，HBV-DNA陽性率35.8；1，3陽性103例，HBV-DNA陽性率3.8。結果顯示HBeAg陽性者HBV-DNA含量明顯高于陰性者，而陰性者中仍有HBV-DNA陽性，說明即使HBeAg轉(zhuǎn)陰HBV-DNA復制并不一定停止，提示HBV-DNA復制處于較低水平。

綜上所述，乙肝病毒標志物它主要反映人體對乙型肝炎免疫反應狀態(tài)，但不能直接反應HBV在患者體內(nèi)的具體含量，但因其價格低廉，操作方便快捷，依然是實驗室常用的檢測手段，使用熒光定量PCR技術檢測HBV DNA，與乙肝病毒血清標志物結合使用，可為臨床提供更為有效、更有價值的信息，臨床上要盡可能同時檢測兩者，為臨床提供更可靠的診斷依據(jù)。

參考文獻

[1]劉樹林，鄒菊賢.PCR檢測HBV-DNA與HBV血清標志物常見模式和Pre-S2相互關系研究[J].重慶醫(yī)學，2001，30（2）：100-101.

[2]中華醫(yī)學會傳染病與寄生蟲病學分會.病毒性肝炎防治方案[J].中華傳染病雜志，2001，19（1）：5662.

[3]李校坤，吳凡.實行定量PCR在乙型肝炎（HBV）診斷中的應用[J].中國生物工程雜志，2002，22（3）：68.

[4]郭晏海，張菊，趙錦榮，等.聚合酶鏈反應熒光偏振技術與乙型肝炎病毒檢測中的應用及價值.中華檢驗醫(yī)學雜志，2004，27：26.