卵巢癌組織中GRP78表達與臨床病理參數相關性的研究

【摘要】目的探討卵巢癌中GRP78表達與臨床指標及預后的相關性。方法采用免疫組織化學方法檢測145例卵巢癌和37例正常卵巢標本中GRP78的蛋白表達，并分析GRP78表達與臨床病理參數的相關性、化療耐藥和預后的相關性。結果卵巢癌中GRP78表達陽性率74.5%，癌旁組織中GRP78表達陽性率29.7%，兩者相比有顯著性差異（P=0.001）；在卵巢癌組織中，GRP78表達水平與患者年齡、病理類型無關，而與患者組織學分級和臨床分期相關，低分化和III-IV期進展患者GRP78表達水平顯著明顯增高；此外，GRP78表達與患者順鉑耐藥和預后亦具有相關性。結論GRP78在卵巢正常細胞向惡性細胞轉化的過程中可能扮演了重要角色，檢測GRP78的表達可能有助于對卵巢癌的預防及早期診斷。

【關鍵詞】卵巢癌；GRP78；預后

卵巢癌是嚴重威脅婦女健康的惡性腫瘤，具有高發病率和高致死率的特點。研究表明，葡萄糖調節蛋白78（GRP78），是位于內質網上的重要分子伴侶，屬于熱休克蛋白70家族的一員。GRP78在內質網中參與阻止內質網新生肽聚集、調節內質網鈣穩態、抗內質網相關性細胞凋亡以及啟動未折疊蛋白反應等細胞生命過程[1]。本研究檢測了145例卵巢癌與37例癌旁組織中GRP78蛋白表達情況，并就其與臨床指標以及預后等病理參數的相關性進行了分析。

1資料與方法

1.1標本來源與病例資料收集阜新婦產醫院2002年1月——2010年10月間經病理診斷明確的、手術切除的卵巢癌標本145例和相應的癌旁“正常”組織37例。年齡在32-75歲。

1.2免疫組化染色方法采用免疫組化SP法檢測145例標本中GPR78在卵巢癌中的表達。兔抗人GPR78抗體購自美國Santa Cruz公司，SP試劑盒、DAB顯色劑均購自北京中杉金橋公司。免疫組化染色步驟參照SP試劑盒操作說明進行，一抗稀釋度為1∶100，二抗稀釋度為1∶200。陰性對照采用PBS液代替一抗。

1.3結果判定標準采用雙盲法隨機記數5個高倍視野（×400），由兩名病理醫生獨立觀察，細胞被染色為棕黃色或棕褐色者為陽性。采用PBS代替一抗染色作為陰性對照，結果判定標準參照Fromowitz陽性細胞半定量分級法[2]。

1.4統計學處理采用SPSS16.0統計軟件包處理數據。GRP78表達水平與臨床指標相關性采用卡方檢驗，P<0.05為有統計學意義。

2結果

2.1GRP78在卵巢癌組織中表達情況GRP78陽性著色主要分布于胞漿，呈棕色；在145例卵巢癌標本中GRP78陽性率74.5%；在37例癌旁組織中，GRP78表達陽性率29.7%；GRP78表達陽性率卵巢癌與癌旁組織相比有統計學差異（P<0.05）。

2.2GRP78表達與卵巢癌臨床指標相關性在卵巢癌組織中，GRP78表達水平與患者病理類型無關，與患者年齡、組織學分級、臨床分期有關。卵巢癌年齡越大、組織學分級越高、臨床分期越晚，GRP78表達陽性率越高，具有明顯統計學差異（P<0.05），見表1。

2.3卵巢癌組織中GRP78與化療耐藥、生存期相關性分析145例患者次術后均接受了至少3個療程的以順鉑為基礎的聯合化療，對其進行化療反應評價，并與GRP78表達進行相關性分析，108例GRP78陽性表達者中24例對化療耐藥；37例GRP78陰性者中3例耐藥，二者比較，差異有統計學意義（P<0.05）。進一步對GRP78表達與患者生存情況進行了分析，結果發現GRP78表達陽性患者5年生存率為38.9%，GRP78表達陰性患者5年生存率為56.8%，差異具有統計學意義（P<0.05）。

3討論

本研究結果顯示卵巢癌組織中GRP78陽性的表達指數顯著高于癌旁組織，這可能是因為實體腫瘤的血供不足導致局部的酸中毒、缺氧和營養缺乏，從而激活GRP78基因的啟動子，導致GRP78的過度表達。本研究還發現不同分化程度的卵巢癌細胞中GRP78表達的水平也不同[3]，低分化癌多呈強陽性表達，而在高、中分化癌中多呈弱陽性或陽性表達。以上研究結果提示研究GRP78可能會成為協助判斷卵巢癌細胞分化程度和臨床分期的一種新的有價值的分子標記物。類藥物是卵巢癌一線化療方案的基礎，順鉑的主要作用靶點是DNA，干擾DNA的復制與轉錄，從而誘導腫瘤細胞的凋亡。卵巢癌組織中GRP78的檢測可成為預測卵巢癌患者對化療是否敏感的指標之一。

綜上，GRP78可作為分子伴侶蛋白在卵巢癌的發生、發展中作為促癌基因，值得我們對之進行更深入的研究。從而為卵巢癌發病機理以及卵巢癌的基因治療提供可行性的依據。

參考文獻

[1]Higa A，Chevet E.Redox signaling loops in the unfolded protein response[J].Cell Signal，2012，24（8）：1548-55.

[2]Hetz C.The unfolded protein response：controlling cell fate decisions under ER stress and beyond[J].Nat Rev Mol Cell Biol，2012，13（2）：89-102.

[3]Fromowitz FB，Voilg MV，Chaos M，et al.Ras p21 expression in the progression of brain cancer[J].Human Pathol，1987，18（4）：1268-1275.