中藥制劑對大腸桿菌耐藥性逆轉的作用研究

摘要：目的：探討中藥制劑對大腸桿菌耐藥性逆轉作用。方法：將標準菌株應用慶大霉素進行耐藥菌株培養，使標準大腸桿菌菌株對慶大霉素產生耐藥性，三等分后分別放入三黃湯、五味消毒飲以及黃連解毒湯中進行培養，于固體平板培養基上進行涂布使其生長，之后再次進行藥敏試驗，判斷三種中藥制劑對大腸桿菌耐藥性逆轉效果，進行統計學分析，得出結論。結果：五味消毒飲對大腸桿菌標準菌株最低抑菌質量濃度較高，為0.7g/ml，而三黃湯較低，為0.5g/ml，由此可知三黃湯在較低濃度即可起到一定的抑菌效果；三黃湯藥敏紙片直徑最大，且逆轉率最高（80.00%），而五味消毒飲藥敏紙片直徑最小，且逆轉率最低（40.00%）；五味消毒飲最佳逆轉時間最長，而黃連解毒湯最佳逆轉質量濃度最大，三種藥物對比分析結果具有統計學意義（P>0.05）。結論：在今后的研究中，應當以中醫辯證論治作理論指導，結合中藥四性五味，以現代藥物研究方法為手段，抓住治療耐藥細菌感染研究的契機，開拓中藥制劑治療耐藥菌感染的領域。

關鍵詞：大腸桿菌；耐藥性；逆轉率；中藥制劑；臨床作用

中圖分類號：R378.2+1 文獻標識碼：A 文章編號：1005-0515（2013）9-033-02

本文將對產生抗生素耐藥性的大腸桿菌進行臨床研究，從而探討中藥制劑對大腸桿菌耐藥性逆轉作用，為臨床改善抗生素耐藥性大腸桿菌治療效果提供可靠依據，提高患者臨床療效及生活質量，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 材料 ①大腸桿菌標準菌株。由省醫院檢驗中心提供，ATCC25922；②蛋白胨水培養基。即普通瓊脂培養基，由上海伊華醫學科技有限公司提供；③水解酪蛋白瓊脂，由杭州微生物試劑廠提供；④藥敏紙片。由蘭州麥迪生物科技有限公司提供，頭孢噻肟30ug、頭孢他啶30ug。

1.2 方法

1. 2. 1 中藥制劑制備 三種中藥制劑方劑組成：①黃連解毒湯，黃連、梔子、黃芩、黃柏；②三黃湯，黃芩、大黃、黃連；③五味消毒飲，野菊花、紫花地丁、金銀花、紫背天葵子、蒲公英。取上述三種中藥方劑粗粉20g加入蒸餾水，蒸餾水量應恰好沒過藥材約5cm，室溫環境下浸漬30min后使用文火煎煮30min，之后將藥液濾出，重復上述過程一次，將兩次所得藥液混合均勻后調節pH值為7.4-7.6，將其蒸發濃縮至原藥材質量與煎液體積比為每毫升1.0g，于4攝氏度保存待用。

1. 2. 2 研究方法 將標準菌株應用慶大霉素進行耐藥菌株培養，使標準大腸桿菌菌株對慶大霉素產生耐藥性，經美國臨床實驗室標準化委員會（CLSI/NCCLS）指定抗微生物藥敏試驗檢測獲得超廣譜β-內酰胺酶大腸桿菌 [1]。將所得耐藥菌株三等分，分別放入三黃湯、五味消毒飲以及黃連解毒湯中進行培養（濃度分別為0.1g/ml、0.2g/ml、0.3g/ml、0.4g/ml、0.5g/ml、0.6g/ml、0.7g/ml、0.8g/ml、0.9g/ml、1g/ml，培養時間分別為12h、24h、36h、48h、60h以及72h），于固體平板培養基上進行涂布使其生長，之后再次進行藥敏試驗，判斷三種中藥制劑對大腸桿菌耐藥性逆轉效果，進行統計學分析，得出結論。

1. 3 統計學方法 所有數據均使用SPSS13.0軟件包進行統計學分析，對于計量資料用 ±s表示，采用t檢驗，計數資料采用X2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2. 1 MIC 三種中藥制劑對大腸桿菌標準菌株MIC對比分析，具體情況見表1。（在標準質控菌株的最低抑菌濃度符合規定范圍的前提下，以無菌生長的最低抗菌藥物溶液的濃度為最低抑菌濃度，即MIC）

由表1可知，五味消毒飲對大腸桿菌標準菌株最低抑菌質量濃度較高，為0.7g/ml，而三黃湯較低，為0.5g/ml，由此可知三黃湯在較低濃度即可起到一定的抑菌效果。

2. 2 耐藥性逆轉 五味消毒飲、三黃湯以及黃連解毒湯對耐藥性大腸桿菌的逆轉率及逆轉后藥敏紙片直徑對比分析，具體情況見表2。

由表2可知，三黃湯藥敏紙片直徑最大，且逆轉率最高（80.00%），而五味消毒飲藥敏紙片直徑最小，且逆轉率最低（40.00%），三種藥物對耐藥性大腸桿菌逆轉效果對比分析結果具有統計學意義（P<0.05）。

2. 3 最佳時間及質量濃度 五味消毒飲、三黃湯以及黃連解毒湯對耐藥性大腸桿菌的逆轉最佳時間及最佳質量濃度