Foxp3—924rs2232365基因多態性與成人牙周炎的關系初步探討

[摘要] 目的 對牙周炎患者行Foxp3-924 （rs2232365）基因分型， 探討Foxp3-924 （rs2232365）基因與牙周炎遺傳易感的相關性。方法 應用PCR-SSP技術為50例無親緣關系的牙周炎患者和103名無血緣關系的健康漢族人行Foxp3-924 （rs2232365）基因分型。 結果 Foxp3-924（rs2232365）位點AA、GA、GG三種基因型頻率在牙周炎患者中分別為24.0%（12/50）、34.0%（17/50）和42.0%（21/50）；而正常對照組分別為23.3%（24/103）、28.2%（29/103）和48.5%（50/103），Foxp3-924（rs2232365）位點A 、G等基因頻率在牙周炎患者中分別為 41.0 %和59.0%，正常對照組分別為37.38%和62.62%，Foxp3-924位點各基因型和等位基因在牙周炎患者和正常對照組中無統計學意義 （P > 0.05）。 結論 Foxp3-924（rs2232365）基因多態性與牙周炎無顯著相關。

[關鍵詞] 牙周炎；Foxp3-924 （rs2232365）；多態性

[中圖分類號] R781.4+2 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2013）18-0133-03

牙周炎是一種慢性感染性疾病，研究發現細胞因子參與牙周炎的致病機制，其中細胞因子的基因多態性與牙周炎關系已成為研究的熱點。學者發現人Foxp3基因發生多個突變，某些自身免疫性疾病的發病與Foxp3基因多態性相關，目前國內外對Foxp3-924 （rs2232365）基因多態性與牙周炎關系的研究較少，本文擬探討Foxp3-924（rs2232365）基因多態性在牙周炎病人中的分布及牙周炎和Foxp3基因的相關性。

1材料與方法

1.1研究對象

收集2011年1月～2013年1月我院口腔門診中重度成人牙周炎患者50例， 診斷標準參照《中華口腔學》，其中男23例，女27例；年齡（40±11）歲，病程5～33年，所有病例均攝曲面平展X線片結合臨床檢查確診。健康對照者103人，經檢查排除牙周炎疾病，年齡（36±14）歲，兩組患者的年齡及性別和對照者均無統計學的差異。

1.2 材料

1.3 制備標本基因組DNA

1.4 Foxp3-924（rs2232365）位點多態性檢測

1.5統計學分析

2 結果

2.1 PCR擴增

2.2 Foxp3-924（rs2232365）等位基因的指定

2.3 牙周炎患者Foxp3-924（rs2232365）基因型頻率與等位基因頻率的分布

見表1。如表1所示，Foxp3-924（rs2232365）位點AA、GA、GG三種基因型頻率在牙周炎患者中分別為24%、34%和42%；在正常對照中分別為23.3%、28.2%和48.5%。與正常對照組比較，牙周炎患者中的AA、GA、GG基因型頻率無明顯差異（P > 0.05）。

3討論

成人牙周炎是牙周組織慢性感染性疾病。細胞因子遺傳因素參與其免疫炎癥性發病過程，如認為細胞因子IL-1β、TNF、IL-1R等位基因多態性與牙周病的發病相關。Fox Forkhead （box）是脊索動物叉狀頭轉錄因子的簡稱， Foxp3是轉錄因子中的新成員，定位于染色體Xp11.23。HORI S研究發現，Foxp3基因是CD4+CD25+Treg細胞活化的標記，參與該細胞的發育和功能維持。人類Foxp3基因存在多種突變，并導致X連鎖自身免疫與過敏失調綜合征。因此，檢測CD4+CD25+Treg細胞上Foxp3mRNA表達水平對了解自身免疫性疾病的發病過程有重要意義。

牙周炎的病因和發病機制較為復雜[1-3]，有學者發現牙周炎時患者受到細菌、病毒等微生物刺激后引發牙周組織的破壞，主要表現為上皮和結締組織的破壞及牙槽骨的喪失，出現炎癥分子和骨代謝相關蛋白的激活和異常表達，Th0向Th2細胞過度分化是參與牙周炎發病的重要因素，Treg細胞的產生、減少或Treg細胞功能障礙，導致不能發揮正常的免疫抑制功能。Karagiannidis[4]等報道接受糖皮質激素治療可以改善患者 Foxp3 表達水平同時增加Treg細胞數量。據研究報道稱[5]， Foxp3和CD4+CD25+T細胞對Th2細胞調節異常可能是自身免疫性疾病發生的重要原因。通過免疫組化和實時定量RT-PCR檢測了牙周炎患者的Foxp3表達水平，證實了牙周炎患者Foxp3表達降低，表明牙周炎的患者發生調節性T細胞抑制功能的異常，進一步導致Th2細胞因子表達增強，但究竟什么原因造成牙周炎的CD4+CD25+T細胞下調的原因有待進一步研究證明。Foxp3的基因的多態性可引發多種自身免疫性疾病，均是由于功能性Treg細胞缺失造成，Duarte PM等[6]研究證實Foxp3 基因多態性改變能夠降低非活性型的Treg細胞的表達。已有研究發現，在人類Foxp3基因有13個突變被報道，其中研究得較多的是-3279位點，楊韶艷等[7]和Zhang L等[8]發現Foxp3 -3279基因多態性位點分別與斑禿、系統性紅斑狼瘡、過敏性鼻炎發病等疾病相關；而Foxp3 -924基因多態性位點與疾病的相關研究不多，André GM等[9]發現Foxp3 -924基因多態性分別與習慣性流產和子宮內膜異位導致的不孕癥發病相關。 為此，我們對牙周炎Foxp3-924（rs2232365）位點基因多態性進行了檢測，結果表明牙周炎Foxp3-924（rs2232365）各基因型頻率和基因頻率與對照組相比，各等位基因無顯著性差異，提示了牙周炎可能與Foxp3-924（rs2232365）多態性無關聯，由于研究樣本量較少，而且沒探究其他細胞因子的多態性位點及其他危險因素的影響，今后有待于增加檢測樣本，進行多因素分析確定牙周炎的主要危險因素。

[參考文獻]

[1] Liu D，Xu J，Liu O，et al.Mesenchymal stem cells derived from inflamed periodontal ligaments exhibit impaired immunomodulation[J]..J Clin Periodontol，2012，39（12）：1174-1182.

[2] Napimoga MH，da Silva CA，Carregaro V，et al.Exogenous administration of 15d-PGJ2-loaded nanocapsules inhibits bone resorption in a mouse periodontitismodel[J].J Immunol，2012 ，189（2）：1043-1052.

[3] Okui T，Aoki Y，Ito H，et al.The presence of IL-17+/FOXP3+ double-positive cells inperiodontitis[J].J Dent Res，2012，91（6）：574-579.

[4] Karlsson MR，Rugtveit J，Brandtzaeg P.Allergen-responsive CD4+CD25+ regulatory T cells in children who have outgrown cow’s milk allergy[J].J Exp Med，2004，199：1679-1688.

[5] Zhang L， Zhang Y， Desrosiers M，et al. Genetic association study of FOXP3 polymorphisms in allergic rhinitis in a Chinese population[J].Hum Immunol，2009，70（11）：930-934.

[6] Duarte PM，Miranda TS，Lima JA，et al. Expression of immune-inflammatory markers in sites of chronicperiodontitis in patients with type 2 diabetes[J].J Periodontol，2012，83（4）：426-434.

[7] Yang Shao-Yan， Guo xiong，Song zhiqiang， et al. FOXP3 gene polymorphism and alopecia areata association studies[J]. Journal of Immunology， 2010， 26（4）：320.

[8] Zhang L， Zhang Y， Desrosiers M，et al. Genetic association study of FOXP3 polymorphisms in allergic rhinitis in a Chinese population[J].Hum Immunol，2009，70（11）：930-934.

[9] André GM， Barbosa CP， Teles JS， et al.Analysis of FOXP3 polymorphisms in infertile women with and without endometriosis[J].Fertil Steril，2011，95（7）：2223-2227.

（收稿日期：2013-04-11）