局部應(yīng)用地塞米松和維生素C對(duì)拔牙創(chuàng)骨愈合的影響研究

[摘要] 目的 探討局部應(yīng)用地塞米松和維生素C對(duì)拔牙創(chuàng)骨愈合的影響。 方法 拔除40只Wistar大鼠的雙側(cè)上頜第一前磨牙，左側(cè)填入浸泡地塞米松和維生素C的明膠海綿（觀察側(cè)），右側(cè)僅填入明膠海綿（對(duì)照側(cè)），分析處理后不同時(shí)間點(diǎn)的牙槽骨骨密度、牙槽嵴高度吸收值、牙周組織中堿性磷酸酶（ALP）活性和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）的表達(dá)水平。 結(jié)果 ①觀察側(cè)術(shù)后4周、6周和12周的牙槽骨骨密度均高于對(duì)照側(cè)（P均< 0.05）；②術(shù)后6周和12周的牙槽嵴高度吸收值均低于對(duì)照側(cè)（P < 0.05或P < 0.01）；③術(shù)后4周、6周和12周的牙周組織ALP活性和VEGF表達(dá)水平均高于對(duì)照側(cè)（P均< 0.05）。 結(jié)論 局部應(yīng)用地塞米松和維生素C可加速拔牙創(chuàng)的骨愈合，減少骨吸收，可能是通過(guò)上調(diào)Ⅰ型膠原和VEGF的表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。

[關(guān)鍵詞] 局部應(yīng)用；地塞米松；維生素C；拔牙創(chuàng)骨愈合

[中圖分類號(hào)] R782.11 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-9701（2013）24-0007-03

牙拔除是口腔科的常規(guī)手術(shù)操作，但局部牙槽嵴會(huì)發(fā)生萎縮和吸收，導(dǎo)致牙槽骨骨量不足，影響牙列修復(fù)和種植，主要原因?yàn)槿狈ρ例X的支持和功能性刺激[1，2]。預(yù)防拔牙后牙槽嵴吸收是解決以上問(wèn)題的關(guān)鍵。盡管目前已研究出多種方法，但因效果不穩(wěn)定、操作步驟復(fù)雜、材料制備繁瑣及費(fèi)用高等原因，限制了廣泛使用[3]。地塞米松是一種糖皮質(zhì)激素，在成骨細(xì)胞增殖和分化中起著重要作用[4]，有報(bào)道指出其可促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞轉(zhuǎn)化為成骨細(xì)胞[5]。維生素C具有促進(jìn)骨細(xì)胞增殖和骨膠原合成的作用[6]，同時(shí)可促進(jìn)體外培養(yǎng)的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖[7]。以上均表明地塞米松和維生素C均是成骨誘導(dǎo)劑，因此推測(cè)對(duì)預(yù)防牙槽嵴吸收有作用。因此，本研究給予雙側(cè)上頜第一前磨牙拔除大鼠局部地塞米松和維生素C治療，收到了較好效果，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物與分組

拔除40只雄性Wistar大鼠的雙側(cè)上頜第一前磨牙，Wistar大鼠購(gòu)于北京維通利華公司，體重250～280 g，本研究采用同體對(duì)照，左側(cè)拔牙創(chuàng)內(nèi)填入浸泡地塞米松和維生素C的明膠海綿（觀察側(cè)），右側(cè)僅填入明膠海綿（對(duì)照側(cè)）。明膠海綿并剪成固定大?。?.3 cm×0.3 cm×0.7 cm），地塞米松和維生素的濃度為10-8 mol/L和50 mg/L，在地塞米松和維生素混合液中浸泡2 h，取出后凍干。兩側(cè)均保持填入明膠海綿12周。

1.2 牙拔除動(dòng)物模型的制備

采用根鉗拔除法制備牙拔除模型[8]，具體步驟如下：給予30 mg/kg 3%戊巴比妥鈉腹腔注射，常規(guī)消毒，采用根鉗直接拔除雙側(cè)上頜第一前磨牙。術(shù)后肌注青霉素預(yù)防感染，80萬(wàn)U/次，每天2次，連續(xù)3 d。術(shù)后止血后，立即于拔牙創(chuàng)內(nèi)填入明膠海綿。給予為期3 d的半流質(zhì)飲食。

1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo)

分析術(shù)后2周、4周、6周和12周的牙槽骨骨密度、牙槽嵴高度吸收值、牙周組織中堿性磷酸酶（ALP）活性和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）的表達(dá)水平。

1.4 評(píng)價(jià)方法及標(biāo)準(zhǔn)

收集雙側(cè)牙槽，并拍攝X線片，分析X線片灰度值來(lái)評(píng)價(jià)牙槽骨骨密度；同時(shí)采用游標(biāo)卡尺測(cè)量拔牙處最低點(diǎn)距牙槽嵴頂連線的距離，連續(xù)3次，取平均值作為牙槽嵴高度吸收值。收集拔牙創(chuàng)處的牙周組織，加入裂解液，冰上研磨充分后，離心處理（3 000 r/min×10 min），保留上清，分別采用ALP酶聯(lián)免疫試劑盒和免疫印跡法檢測(cè)ALP活性和VEGF的蛋白水平。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 13.0軟件包分析數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，多組比較采用單因素方差分析，組間比較采用成組t檢驗(yàn)，P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組治療后不同時(shí)間點(diǎn)的牙槽骨骨密度

對(duì)照側(cè)和觀察側(cè)治療后不同時(shí)間點(diǎn)的牙槽骨骨密度水平有差異（P < 0.05）；除術(shù)后2周外，觀察側(cè)的牙槽骨骨密度均高于對(duì)照側(cè)，且除治療12周（P < 0.01）外，其余均存在差異（P < 0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 兩組治療后不同時(shí)間點(diǎn)的牙槽嵴高度吸收值

兩組治療后不同時(shí)間點(diǎn)的牙槽嵴高度吸收值有差異（P < 0.05）；除術(shù)后2周和4周外，觀察側(cè)的術(shù)后6周和12周的牙槽嵴高度吸收值均低于對(duì)照側(cè)（P < 0.05或P < 0.01）。見(jiàn)表2。

2.3 兩組治療后不同時(shí)間點(diǎn)的牙周組織ALP活性

對(duì)照側(cè)和觀察側(cè)治療后不同時(shí)間點(diǎn)的牙周組織ALP活性有顯著差異（P < 0.01）；除術(shù)后2周外，觀察側(cè)牙周組織ALP活性均高于對(duì)照側(cè)，其中術(shù)后12周（P < 0.01），其余均存在差異（P < 0.05）。見(jiàn)表3。

2.4 兩組治療后不同時(shí)間點(diǎn)的牙周組織VEGF表達(dá)水平

兩組治療后不同時(shí)間點(diǎn)的牙周組織VEGF表達(dá)水平有顯著差異（P < 0.05）；除術(shù)后2周外，觀察側(cè)牙周組織VEGF表達(dá)水平均高于對(duì)照側(cè)（P < 0.05），其中術(shù)后12周有極顯著差異（P < 0.01）。見(jiàn)表4、圖1。

3 討論

牙拔除后牙槽嵴局部會(huì)發(fā)生吸收，導(dǎo)致骨量較少，影響義齒修復(fù)，因此需加強(qiáng)拔牙創(chuàng)的愈合。拔牙創(chuàng)愈合是拔牙后骨組織的再修復(fù)過(guò)程，在新骨形成中意義重大。作為一個(gè)動(dòng)態(tài)過(guò)程[9]，拔牙創(chuàng)愈合過(guò)程中涉及骨改建中的多種因子水平和酶活性的改變，其中ALP是早期成骨細(xì)胞分化的標(biāo)志，且ALP活性與成骨細(xì)胞分化有關(guān)，常規(guī)用于評(píng)價(jià)骨活性[10]。而在拔牙創(chuàng)愈合過(guò)程中，新生血管生成可增加愈合部位的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)，VEGF可促進(jìn)血管再生，加速骨改建過(guò)程中的血管化，是評(píng)價(jià)血管生成情況的關(guān)鍵指標(biāo)[11]。

臨床上常用的促進(jìn)拔牙創(chuàng)愈合的方法：①局部給予堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子促進(jìn)早期愈合，對(duì)減少牙槽嵴吸收效果顯著，但由于該商品價(jià)格較高，推廣難度較大[12]；②于拔牙創(chuàng)內(nèi)填塞羥基磷灰石，但該法有一定的感染率，不能對(duì)位縫合拔牙創(chuàng)，同時(shí)羥基磷灰石不易吸收，易殘留，影響種植效果[13]；③注射磷酸鈣陶瓷懸浮物填充拔牙創(chuàng)，有利于后期種植牙，但仍有殘留[14]。促進(jìn)拔牙創(chuàng)愈合的理想方法：①生物相容性好，異物感小且無(wú)過(guò)敏反應(yīng)；②不影響自然愈合；③不易殘留，具有良好的吸收性；④減少牙槽嵴的吸收，保持其高度和寬度；⑤成本低、操作簡(jiǎn)單等[15]。

多項(xiàng)研究指出，地塞米松和維生素C具有成骨誘導(dǎo)作用，推測(cè)可促進(jìn)拔牙創(chuàng)內(nèi)愈合，并抑制骨吸收[4-7]。因此，本研究分析地塞米松和維生素C對(duì)牙槽骨骨密度水平和牙槽嵴高度吸收值的影響來(lái)評(píng)價(jià)骨愈合和牙槽骨吸收情況，并探討對(duì)ALP活性和VEGF水平的影響。同時(shí)本研究采用同體對(duì)照，避免了異體對(duì)照的差異。本研究發(fā)現(xiàn)觀察側(cè)術(shù)后4周、6周和12周的牙槽骨骨密度水平均高于對(duì)照側(cè)，表明局部應(yīng)用地塞米松和維生素C可促進(jìn)拔牙創(chuàng)愈合，而術(shù)后6周和12周的牙槽嵴高度吸收值低于對(duì)照側(cè)，提示局部應(yīng)用可較好預(yù)防牙槽骨吸收，以上均表明在拔牙創(chuàng)局部應(yīng)用地塞米松和維生素C的效果較好。

進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，術(shù)后4周、6周和12周的牙周組織ALP活性和VEGF表達(dá)水平均高于對(duì)照側(cè)，提示局部應(yīng)用地塞米松和維生素C可提高ALP活性并提高VEGF，可能是促進(jìn)拔牙創(chuàng)內(nèi)骨愈合的基礎(chǔ)。

綜上所述，局部應(yīng)用地塞米松和維生素C可加速拔牙創(chuàng)的骨愈合，減少骨吸收，可能是通過(guò)上調(diào)Ⅰ型膠原和VEGF的表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。

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（收稿日期：2013-05-06）