復方垂盆草膠囊質量標準研究

2008-12-31 00:00:00林冬杰柯立堅

亞太傳統醫藥 2008年8期

摘要：目的：建立復方垂盆草膠囊的質量標準。方法：用薄層色譜法鑒定矮地茶；用高效液相色譜法對矮地茶中的巖白菜素進行含量測定。色譜柱：島津VP-ODS C18柱(4.6μm×250nm，5μm)；檢測波長：λ=275nm；柱溫：30℃；流速1.0mL.Min-1。結果：薄層圖斑點清晰，陰性對照無干擾。巖白菜素在0.13μg~1.04μg范圍內，濃度與峰面積呈良好的線性關系(r=0.9995)，平均回收率為98.47%，RSD=1.2%。結論：該質量控制方法簡便可靠、精密度高、分離效果好，可用于復方垂盆草膠囊的質量控制。

關鍵詞：復方垂盆草膠囊；巖白菜素；TLC；HPLC；質量標準

中圖分類號：R284 文獻標識碼：A 文章編號：1673-2197(2008)08-000-00

垂盆草膠囊是《中國衛生部藥品標準》中藥成方制劑第七冊品種“復方垂盆草沖劑”(WS3-B-1391-93)基礎上新研制的中藥制劑，由垂盆草清膏，矮地茶清膏組成。它能夠清熱解毒，活血利濕，降低谷丙轉氨酶，可用于急性肝炎及遷延性肝炎、慢性肝炎的活動期^[1]。為了有效控制本品質量，在復方垂盆草沖劑原標準的基礎上，用TLC鑒定矮地茶、HPLC法測定巖白菜素的含量，建立起復方垂盆草膠囊的質量標準。

1 儀器及試藥

1.1 儀器

日本島津LC-2010高效液相色譜儀，Lcsolution工作站，日本AND GR-202電子分析天平，超聲波清洗器(CQX25-06，50HZ，上海必能信超聲有限公司)

1.2 試藥

復方垂盆草膠囊為廣西強壽藥業公司提供，陰性對照品為自制；巖白菜素對照品(批號：1532-200202，供含量測定用)；均由中國藥品生物制品檢定所提供；硅膠G(青島海洋化工廠)；甲醇為色譜純，其他實試劑為AR級；水為重蒸餾水。

2 方法與結果

取本品內容物1g，加甲醇20mL，超聲處理30分鐘，濾過，濾液濃縮至1mL，作為供試品溶液；取巖白菜素對照品適量，加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。按同法制備得的缺矮地茶陰性對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇(5∶4∶2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2%三氯化鐵-2%鐵氰化鉀(1∶1)的混合溶液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；缺矮地茶陰性對照品溶液，在與對照品色譜相應的位置上無相同顏色的斑點(見圖1)。

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圖1 復方垂盆草膠囊薄層色譜1~3.樣品(sample)(批號：070605)，4.巖白菜素(Bergenin)，5.陰性樣品(negative sample)

3 結果

3.1 色譜條件

色譜柱：島津VP-ODS C18柱(4.6μm×250nm，5μm)；甲醇-水(20：80)為流動相；檢測波長為275nm。理論板數按巖白菜素峰計算應不低于4000。

3.2 對照品溶液的制備

精密稱取巖白菜素對照品適量，加甲醇制成每1mL含50μg的溶液，即得。

3.3 供試品溶液的制備

取本品內容物0.5g，精密稱定，置50mL量瓶中，加甲醇45mL，超聲處理30min，放冷，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，即得。

3.4 線性關系考察

精密稱取巖白菜素對照品10.40mg，置100mL量瓶中，加甲醇使溶解并稀釋到刻度，搖勻，作為對照品溶液(104μg/mL)。精密量取1.25、2.5、5、8mL，分別置10mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，分別作為對照品溶液(濃度分別為：83.2μg/mL、52μg/mL、26μg/mL、13μg/mL)。按3.1的色譜條件分別進樣10μL測定。以芍藥苷對照品進樣量(μg)為橫坐標(X)、峰面積積分值為縱坐標(Y)繪制標準曲線，結果提示：進樣量在0.13μg～1.04μg范圍內，巖白菜素的濃度與峰面積呈良好的線性關系。回歸方程為：Y=2841.5X–361854(r=0.9995)。

3.5 精密度試驗

取對照品溶液(52μg/mL)，按上述色譜條件，連續進樣5次，測定峰面積積分值，結果RSD為0.5%(n=5)。試驗結果表明，本法精密度較好。

3.6 穩定性試驗

取同一供試品(批號070605)溶液按上述方法，每隔3h進樣一次，共5次，測定峰面積積分值，結果RSD為0.8%(n=5)。試驗結果表明，在15h內待測物穩定。

3.7 重復性試驗

取同一供試品(批號070605)按上述方法測定6份，結果6份巖白菜素的平均含量為6.31mg/g，RSD=1.0%。試驗結果表明，本法重復性較好。

3.8 加樣回收試驗

精密稱取“重復性試驗”項下的復方垂盆草膠囊(批號070605)內容物約0.25g(巖白菜素含量為6.31mg/g)，平行取樣6份，分別精密加入濃度為1.51mg/mL巖白菜素對照品溶液(精密稱定巖白菜素15.10mg置10mL量瓶中，加甲醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。)1.0mL，按正文擬訂的方法制備供試品溶液、測定，計算回收率，結果平均回收率為98.47%，RSD=1.2%(n=6)，符合定量分析的要求。結果見表1。