R2工程細(xì)菌纖維素酶酶活影響條件初探

摘要：以3，5-二硝基水楊酸（DNS）法測定纖維素酶活力，研究了不同濃度的表面活性劑（Tween 80）、不同緩沖液、不同pH對(duì)R2工程細(xì)菌纖維素酶酶活的影響。結(jié)果表明，在35 ℃、Tween 80濃度為1.6%、醋酸-醋酸鈉緩沖液pH 4.8的條件下纖維素酶酶活最高， 是對(duì)照的1.47倍。

關(guān)鍵詞：纖維素酶；Tween 80；pH；表面活性劑；緩沖體系

中圖分類號(hào)：Q935 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2013）18-4486-03

纖維素是地球上數(shù)量最大的可再生資源，也是地球上分布最廣、含量最豐富的碳水化合物[1]。纖維素是經(jīng)β-1，4葡萄糖苷鍵連接而成的直鏈高分子，具有很強(qiáng)的結(jié)晶性，糖苷鍵能通過酶的催化作用發(fā)生水解。可以通過纖維素酶系來分解纖維素，使之轉(zhuǎn)變?yōu)榭杀焕玫腄-葡萄糖，再進(jìn)一步發(fā)酵為酒精，對(duì)開發(fā)新能源具有重要的意義[2]。

纖維素酶酶解反應(yīng)過程主要受到溫度和pH[3，4]等多方面因素的影響，同時(shí)表面活性劑可以使高分子聚合物變成復(fù)雜的親水性化合物，使纖維素與纖維素酶有效結(jié)合，從而提高纖維素酶的酶解效率[5-7]。試驗(yàn)將表面活性劑、緩沖液和pH對(duì)纖維素酶酶活的影響進(jìn)行了研究，以期得到纖維素酶適宜的酶解條件，更高效地轉(zhuǎn)化和利用纖維素。

1 材料與方法

1.1 材料及儀器

卡那霉素、異丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷（IPTG）、羧甲基纖維素鈉（CMC）、Tween 80、3，5-二硝基水楊酸（DNS）、苯酚、CuSO4·5H2O、CaCl2·6H2O、ZnSO4·7H2O、葡萄糖均為分析純；R2工程細(xì)菌由重慶理工大學(xué)藥學(xué)與生物實(shí)驗(yàn)室提供[8]。

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