纖維支氣管鏡檢測EGFR在非小細胞肺癌中的表達及意義

doi：10.3969/j.issn.1007-614x.2013.19.68

現有的研究表明，表皮生長因子受體（EGFR）相關信號通路在肺癌的發生和發展中起重要作用。EGFR酪氨酸激酶抑制劑（EGFR-TKIS）是目前針對EGFR治療非小細胞肺癌（NSCLC）的重要分子靶向藥物。EGFR的不同存在狀態與TKIS的療效相關。EGFR在非小細胞肺癌中高表達，免疫組化法是一種有效的檢測NSCLC標本中蛋白質水平的方法[1]，但多數集中在NSCLC手術切除標本的研究上[2]，對于纖維支氣管鏡（簡稱纖支鏡）活檢小標本的研究較少。在此我們應用免疫組化技術對纖支鏡NSCLC活檢標本的EGFR基因進行檢測，探討EGFR在非小細胞肺癌患者中的表達、檢測及臨床意義。

資料與方法

一般資料：2009年10月～2012年10月160例經病理診斷為NSCLC的活檢標本，其中男101例，女59例，年齡31～83歲，中位數62歲；有吸煙史112例；組織學類型：腺癌104例，鱗癌44例，腺鱗癌5例，大細胞癌7例。所檢患者均為初次診斷。另外收集10例正常肺組織活檢標本和10例癌前病變肺組織活檢標本進行對照。

試劑方法：石蠟包埋組織HE染色。免疫組織化學采用EnVisim二步法，抗體EGFR。CK5/6（標記鱗癌），CK8（標記腺癌），所有一抗均為單克隆抗體，均為工作液。參照試劑盒說明操作，關鍵步驟如下：切片常規脫蠟至水，高壓修復抗原，3%H2O2孵育10分鐘，滴加一抗4℃過液，滴加二抗37℃孵育20分鐘。DAB染色，蘇木精對比染色，透明封固，以PBC代替做空白對照。結果判定：EGFR表達主要定位于胞漿/胞核是棕黃色或棕褐色顆粒狀。

采用參考文獻的方法進行打分[1]，0分無色，1分淺著色，2分深著色，3分棕褐色；按400視野下陰性細胞所占百分比打分：0陰性，1分陽性細胞≤25%，2分26%～50%，3分51%～75%，4分≥75%。染色結果分1級標準為著色強度乘以陽性細胞比例，0分陰性（-），1～3分弱陽性（+），4～6分中度陽性（++），8～12分強陽性（+++）。

統計學處理：應用SPSS16.0統計軟件進行分析。采用χ2檢驗分析免疫組織化學結果；以P<0.05為具有顯著統計學差異，P>0.05差異無統計學意義。

結 果

160例NSCLC患者中，EGFR陽性66例（41.2%）。其中男45例（44.6%），女21例（35.6%）；腺癌55例（52.8%），鱗癌6例（13.6%）。腺鱗癌2例（40%），大細胞肺癌3例（42.8%）。經統計學分析，腺癌鱗癌兩者差異有統計學意義（P<0.05），大細胞癌、腺鱗癌與腺癌相比無統計學意義（P>0.05）。

160例中有120例獲得手術切除標本，將纖支鏡活檢標本和手術切除標本EGFR基因檢測結果對比，活檢標本陽性率低于手術標本，但差異無統計學意義（P>0.05）。

10例正常肺組織中只有1例EGFR表達弱陽性。10例癌前病變肺組織中2例EGFR弱陽性表達。由此可見肺癌組織中EGFR的表達明顯高于正常肺組織，而且EGFR在正常肺組織、癌前病變和肺癌組織中的表達是逐級升高的[3]。

討 論

結果顯示，EGFR基因檢測肺NSCLC，腺癌陽性率高于鱗癌，與大細胞肺癌差異無統計學意義；腺癌中男性與女性患者EGFR基因陽性率差異無統計學意義；EGFR陽性率與患者性別年齡無關，同相關資料一致[4，5]。160例中有135例獲得手術切除標本，將其EGFR基因檢測結果與纖支鏡活檢結果相比較，陽性率稍高但差異無統計學意義。由此可見EGFR基因檢測可行性好，對臨床進一步行手術切除、放化療或者靶向治療提供很好的參考價值。

近年來肺癌的發病率和死亡率迅速上升，躍居腫瘤第1位。雖然治療技術有了很大提高，但5年生存率沒有明顯改善[6]。因此預防并控制遠處轉移是肺癌治療中亟待解決的問題。我們應用纖支鏡技術檢測EGFR基因不僅可行，而且實現了早發現、早診斷、早治療；方法安全、直觀是中小醫院可普及的一項檢測方法；并且具有創傷小、痛苦少、費用低等人性化優勢，具有重要現實意義。

參考文獻

1 李榕，韓寶惠，等.EGFR檢測在肺癌中的臨床意義[J].臨床腫瘤學雜志，2004，9（4）：420-425.

2 梁智勇，曾暄，張靜，等.非小細胞肺癌290例表皮生長因子受體基因突變和拷貝數的檢測分析[J].中華病理學雜志，2008，37（10）：654-659.

3 Eberhand DA，Giaccone G，Johnson BE，et al.Biomarkers of response to epidermal growth factor receptor inhibitors in Non-Small-Cell Lung Cancer Working Group：standardardization for use in the clinical trial setting.J Clin Oncol，2008，26（6）：983-994.

4 林云恩，何莎，等.纖維支氣管鏡非小細胞肺癌活檢標本的表皮生長因子受體基因檢測[J].中華病理學雜志，2011，40（2）：529-5807.

5 曾暄，武莎斐，等.非小細胞肺癌EGFR和HERI基因狀態及相關性[J].中華病理學雜志，2006，35（7）：398-402.

6 Parkin DM，Bray FI，Devesa SS.Cancer burden in the year 2000.The global picture[J].Eur J Canceren，2001，37（8）：4-66.