趙健亞 ,王曉珂,劉天娥 ,肖 靜
(1南通大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院營養(yǎng)與食品衛(wèi)生教研室,江蘇226019;2南通大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院職業(yè)醫(yī)學(xué)和環(huán)境毒理學(xué)教研室)
水通道蛋白(aquaporin,AQP)是一類對水具特殊通透性的跨膜蛋白,其亞型AQP3、7、9、10同時對甘油具有通透性,其中AQP7在脂肪組織中表達(dá)豐富。動物實驗發(fā)現(xiàn)AQP7基因敲除小鼠脂肪細(xì)胞甘油輸出能力受損,可能與肥胖及高脂膳食誘導(dǎo)的胰島素抵抗發(fā)生有關(guān)[1-3]。而人類實驗則結(jié)論不一,有文獻(xiàn)報道肥胖人群脂肪組織AQP7表達(dá)減少[4-6],也有實驗觀察到肥胖患者出現(xiàn)AQP7代償性增加[7-8]。這可能與研究涉及的是皮下脂肪還是內(nèi)臟脂肪的脂肪組織部位不同以及肥胖嚴(yán)重程度不同有關(guān)。本研究擬采用高脂膳食喂養(yǎng)的方式建立與人類肥胖相似度很高的大鼠肥胖模型(dietary induced obesity,DIO),觀察8周和20周不同肥胖病程大鼠內(nèi)臟脂肪(腎周脂肪)組織AQP7 mRNA表達(dá)的變化情況,并探討肥胖發(fā)生的作用機理。
1.1 材料 (1)實驗動物:健康SD大鼠48只,雄性,體重110~130g,購自上海西普爾-必凱實驗動物有限公司。(2)飼料:基礎(chǔ)飼料和高脂飼料(上海斯萊克實驗動物有限責(zé)任公司),三大供能營養(yǎng)素質(zhì)量比和供能比見表1。(3)主要試劑:血清甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)測定試劑盒(羅氏診斷有限公司);Trizol(Invitrogen公司);逆轉(zhuǎn)錄和Real-Time PCR試劑盒(Takara公司)。

表1 基礎(chǔ)飼料和高脂飼料主要成分質(zhì)量比和供能比(g/100g,%)
1.2 方法(1)建立DIO大鼠模型:大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后按體重隨機分為兩組,正常對照組(C組)12只,喂飼基礎(chǔ)飼料,其余36只喂高脂飼料。……