氣相色譜法測定恩替卡韋中三氯甲烷殘留量

2013-12-09 05:00:52廖寶源李長達孫蔚華方慧瓊江西省贛州市食品藥品檢驗所贛州34000江西贛州市第三人民醫院贛州34000

江西中醫藥 2013年1期

★ 廖寶源李長達孫蔚華方慧瓊（.江西省贛州市食品藥品檢驗所贛州34000；.江西贛州市第三人民醫院贛州34000）

藥物中的殘留溶劑是指在原料藥或賦型劑的生產中，以及在制劑制備過程中使用的，但在工藝過程中未能完全去除的有機溶劑[1]。由于殘留溶劑不僅沒有療效，還可能增加藥物的毒副作用，而且影響藥物的穩定性，故所有的有機溶劑應盡可能除去。為了保護患者免受藥物中殘留有機溶劑的傷害，需對藥品在生產過程中引入的有機溶劑殘留量進行測定[2]。恩替卡韋是一種用于治療乙肝病毒感染的新一代鳥嘌呤核苷類似物口服藥[3]，主要用于治療成人伴有病毒復制活躍和血清轉氨酶持續增高，或肝組織學為活動性病變的慢性乙型肝炎，是目前降病毒最快最強、變異幾率最低的核苷類似物[4]。由于合成本品過程中使用三氯甲烷等有機溶劑，故有可能會殘留在產品中。資料表明，氯仿具有致癌、致畸、致突變作用，長期接觸將對人體產生嚴重影響[5，6]。本文參考中國藥典2005 年版二部有關品種三氯甲烷殘留量檢測方法，建立了氣相色譜法，結果表明本法分離度高、靈敏、準確且簡便。

1 儀器與試劑

Agilent 7890A氣相色譜儀（配有ECD檢測器），恩替卡韋原料（廠方提供，批號20090515、20090520、20090526）。三氯甲烷、二甲基亞砜均為色譜純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱：DB-624 毛細管柱（30m×0.53mm×3.0μm）；柱溫：初始60℃，保持6 分鐘，再以20℃∕分鐘的升溫速率升溫至200℃，保持4 分鐘；檢測器：ECD；檢測器溫度：300℃；進樣口溫度：200℃；載氣：氮氣（流量4.5mL∕min）；進樣方式：分流進樣；分流比：15：1；進樣體積：1.0μL。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱取三氯甲烷12.4mg，迅速加入已裝有適量二甲基亞砜溶劑的100mL 量瓶中，定容至刻度，搖勻，精密量取1mL 至50mL 量瓶中，定容至刻度，搖勻，即得三氯甲烷對照溶液。

2.3 供試品溶液的制備

精密稱取本品0.2g，置5mL量瓶中，加二甲基亞砜溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

2.4 空白干擾試驗

取三氯甲烷對照品溶液、供試品溶液及有機溶劑二甲基亞砜照上述色譜條件分別進樣，結果空白溶劑對恩替卡韋的三氯甲烷殘留量測定無干擾。見圖1。

圖1 氣相色譜圖

2.5 最低檢測量

取對照溶液稀釋10-9倍得三氯甲烷的檢出限溶液，按上述色譜條件測定，結果最低檢出量為2.457 54×10-9μg∕mL，相對供試品最低檢出量為6×10-14g∕g。

2.6 精密度試驗

取上述三氯甲烷對照品溶液，照上述色譜條件進行氣相分析，連續進樣5次，RSD為0.99%。

2.7 線性關系

精密量取上述三氯甲烷對照溶液1mL、2mL、5mL、8mL、10mL，分別置10mL 量瓶中，分別加入二甲基亞砜稀釋至刻度，搖勻，即得濃度分別為10%、20%、50%、80%、100%的溶液，作為線性回歸測定溶液。分別照上述色譜條件進樣測定，每個濃度測定3 份，取平均值，以濃度為X軸，以峰面積為Y值，計算線性回歸方程：Y= 4030.204 1X+380.918 4，r＝1.000 0。結果表明三氯甲烷在0.2457 54-2.457 54 μg∕mL濃度范圍內呈良好線性關系。