用氣相色譜質譜聯用技術分析鼻竇炎口服液中正己烷萃取物

★ 劉明穎 馬晉芳 羅國安 葛發歡 (.江西中醫學院 南昌0004;.廣州中大南沙科技創新產業園有限公司 廣州5458;.清華大學 北京00084;4.中山大學 廣州5075)

1 引言

鼻竇炎口服液由辛夷、荊芥、薄荷、桔梗、竹葉柴胡、蒼耳子、白芷等14 味中藥組成，具有疏風清熱、祛濕通竅的功效。鼻竇炎口服液由辛夷、荊芥、薄荷、竹葉柴胡4 味藥材通過水蒸氣蒸餾提取芳香水，此4 味藥材蒸餾后的藥渣再與其余10 味藥材煎煮，然后將芳香水與煎煮液混合得到［1］。辛夷為鼻炎要藥，辛夷揮發油［2－4］具有抗炎、抗過敏、抗組胺、抗菌和抗病毒作用;薄荷具有抗炎［5］、抗過敏、抗組胺和抗菌［6］的作用;荊芥有解熱鎮痛和抗炎抗菌［7］的作用，荊芥揮發油中具有抗流感病毒［8］作用。鼻竇炎口服液對慢性鼻竇炎［9］、慢性副鼻竇炎［10］具有明顯的療效。目前，尚未有鼻竇炎口服液的揮發性成分的研究報道，本方的主藥辛夷、荊芥、蒼耳子、竹葉柴胡［11］為芳香通竅之藥，主要藥效成為揮發性成分，本文應用氣質聯用技術對其揮發性成分進行定性鑒別，為鼻竇炎口服液的質量控制和藥理作用機制的研究提供了基礎。

2 儀器與試藥

儀器:Trace 1300 － ISQ 氣相色譜質譜聯用儀(美國Thermo Fisher Scientific 公司)，Hettich Mikro22R 離心機(德國Hettich 公司)，Milli －Q 超純水系統(美國Millipore 公司)。

試劑:正己烷(色譜純，美國Fisher 公司，批號601037000)，無水硫酸鈉(分析純，國藥集團化學試劑有限公司，批號20120820)，超純水(自制)。

樣品:鼻竇炎口服液，批號10120102，太極集團重慶桐君閣藥廠有限公司。

3 方法與結果

3.1 氣相色譜條件

VF － 5ms 毛 細 管 柱(30m × 0. 25mm × 0.25μm);載氣為氦氣，流速1.0mL/分，分流進樣，分流比為10:1;進樣口溫度為250 ℃;檢測器溫度為280 ℃;程序升溫:起始溫度為50 ℃，以2℃/分升溫至120 ℃，再以5 ℃/分升溫至200 ℃，再以10 ℃/分升溫至280 ℃，保持3 分鐘。進樣量1μL。

3.2 質譜條件

電子轟擊離子源，電子能量70eV，離子源溫度220 ℃，傳輸線溫度280 ℃，溶劑延遲時間3 分鐘，掃描范圍40 －650m/z。

3.3 供試品溶液的制備

精密移取鼻竇炎口服液20mL，置氣相渦旋瓶中，精密加入1mL 正己烷，渦旋5 分鐘，于4 ℃5 000 rpm 離心10 分鐘，取有機層，加入適量無水硫酸鈉除水，即得。

3.4 分析結果

將上述供試品溶液注入氣質聯用儀，得到總離子流圖(見圖1)，與NIST2008 質譜數據庫進行檢索，應用峰面積歸一化法測得各成分的相對百分含量，結果見表1。

圖1 鼻竇炎口服液正己烷提取物總離子流圖

表1 鼻竇炎口服液正己烷提取物成分分析

初步共鑒定出56 個成分，其中L－薄荷醇、桉葉油醇、3 －甲基環己酮、水合莰烯、胡薄荷酮、α －萜品醇、薄荷酮等7 種含量較高，約占總成分含量的80%。

4 討論

4.1 提取溶劑的選擇

本文對乙酸乙酯、正己烷、二氯甲烷、石油醚等4 種有機溶劑進行考察，比較溶劑對鼻竇炎口服液萃取成分信息量的影響。得到正己烷萃取得到的圖譜信息量最大，能最大程度地表征鼻竇炎口服液中揮發性成分，因此選擇正己烷為提取溶劑。

4.2 提取方法的選擇

本文選擇水蒸氣蒸餾法、超聲法和萃取法3 種提取方式進行考察，比較提取方式對鼻竇炎口服液萃取成分信息量的影響。超聲法得到的信息量最小，萃取法與水蒸氣蒸餾法相當，萃取法較水蒸氣蒸餾法操作簡便、易于重復，因此選擇萃取法作為樣品的提取方法。

4.3 載氣流速的選擇

分別對不同載氣流速0.5 mL/分、0.8 mL/分、1.0 mL/分和1.2 mL/分進行色譜分析，考察不同載氣流速對各色譜峰色譜行為的影響。隨著載氣流速的增加，各色譜峰的保留時間變短，分離度增大;但是當流速增大到1.2 mL/分時，部分色譜峰分離度降低，無法達到完全分離，因此選擇載氣流速為1.0 mL/分。

本文共檢測到66 個主要色譜峰，通過數據庫匹配，初步鑒定出了56 個成分，其中43 個化合物為萜類化合物，有30 個化合物為單萜;2 個香豆素類化合物;11 個烷烴類化合物;1 個脂肪族化合物，另外10 個化合物結構未知，需要進一步的研究。經過文獻調研可知，結構鑒定中兩個含量較高的成分胡薄荷酮和薄荷酮［8］來源于荊芥和薄荷藥材，具有抗流感病毒的作用。目前鼻竇炎口服液的質量控制指標成分主要為水溶性成分梔子苷［1］、木蘭脂素［13］、黃芩苷［14］，此3 種指標成分不能全面地反映鼻竇炎口服液的質量。為了更加全面有效的對鼻竇炎口服液進行質量控制，需要對該方中揮發油成分藥材歸屬和有效成分含量進行進一步的研究。

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