9 種潤肺止咳中藥對小鼠鎮咳作用的比較研究

★ 凌珊 易炳學 龔千鋒 (江西中醫學院 南昌330006)

咳嗽是因外感六淫，臟腑內傷，影響于肺所致有聲有痰之證。“咳謂無痰而有聲，肺氣傷而不清也;嗽是無聲而有痰，脾濕動而為痰也。咳嗽謂有痰而有聲，蓋因傷于肺氣動于脾濕，咳而為嗽也”。中醫學治療咳嗽有宣肺止咳、清肺止咳、潤肺止咳、肅肺止咳4 大方法。所謂潤肺止咳藥以治療肺支氣管疾病引起的咳嗽為主，包括急性和慢性炎癥、結核、支氣管擴張、腫瘤等。對上呼吸道感染后較頑固之咳嗽也能使用，但其中大多數藥不用于感冒后咽癢而咳嗽者。潤肺止咳之中藥以藥效溫潤，安全性高為特色，一般可長期使用并作茶飲。本實驗主要以潤肺止咳中藥為研究對象，選取其中較常用的9 味中藥，并包含生品與炮炙品，進行鎮咳作用及安全性的比較研究。以期從中篩選鎮咳療效好，毒性相對小的藥物，為中醫臨床用藥提供更多理論依據。

1 實驗儀器與材料

1.1 試驗動物 小白鼠，昆明種，體重18 －22g，均由江西中醫學院動物中心提供，合格證號:SCXK －2005 －0001。

1.2 試驗藥材 款冬花、蜜炙款冬花、蜜炙紫菀、蜜炙百部、蜜炙枇杷葉、鼠曲草、紫金牛、天漿殼、浙貝母、川貝母。實驗中藥材均購自江西樟樹天齊堂中藥飲片有限公司。

1.3 試驗試劑 25 ﹪氨水，江西洪都生物化學有限公司產品，生產批號101101;枸櫞酸噴托維林片，天津藥業焦作有限公司產品，生產批號11022221。

1.4 儀器設備 超生霧化引咳裝置(江蘇魚躍醫療設備股份有限公司生產);電子分析天平ARll40/C(奧豪斯上海公司生產);電子天平(常州萬泰天平儀器有限公司生產);GZX －9070MBE 數顯鼓風干燥箱(上海博迅實業有限公司醫療設備廠生產);智能恒溫電熱套(鞏義市予華儀器有限責任公司生產);HH－S 恒溫水浴鍋(江蘇省金壇市醫療儀器廠生產);BCD－179K 冷藏冷凍箱(青島海爾股份有限公司生產)藥典篩(浙江上虞市道墟張興紗篩廠生產);一次性使用無菌注射器(江西三鑫醫療器械集團有限公司)。

2 實驗方法

2.1 實驗分組 設款冬花組、蜜炙款冬花組、蜜炙紫菀組、蜜炙百部組、蜜炙枇杷葉組、鼠曲草組、紫金牛組、天漿殼組、浙貝母組、川貝母組、空白組;枸櫞酸噴托維林組為陽性對照，生理鹽水組為陰性對照。

2.2 小鼠引咳實驗(濃氨水噴霧法)［1，2，3］昆明種小鼠，體重18 －22 g，雌雄各半，置于特制的玻璃鐘罩內，使用超聲霧化噴霧器進行25 ﹪濃氨水定量噴霧，10 秒后立即取出，記錄小鼠從接受噴霧開始到出現咳嗽的潛伏期，以及2 分鐘內的咳嗽次數。噴霧后2 分鐘不咳嗽者舍棄。合格小鼠2 天后按照上述分組方法隨機分組(空白組于引咳實驗前隨機選出分組，不進行濃氨水噴霧)。每組分別按表1 中各對應劑量連續灌胃5 天，空白組與陰性對照組給以等量生理鹽水，并于每日給藥前稱重并記錄。于末次給藥后1 小時，分別接受25 ﹪濃氨水定量噴霧，10 秒后立即取出。記錄小鼠從接受噴霧開始到出現咳嗽的潛伏期及2 分鐘內的咳嗽次數，2 分鐘內未見咳嗽者其潛伏期以120 秒記。

2.3 藥物的制備及給藥方法 稱取生款冬花50g，加蒸餾水浸泡1 小時，然后加500mL 和300mL 蒸餾水煮沸2 次，每次1 小時，合并水煎液，濃縮至水煎液濃度0.25g 生藥/mL。給藥量6.2g/kg，給藥0.25mL/10g。其他各組煎煮方法及給藥方法同上，僅川貝母組、浙貝母組、蜜炙百部組，給藥方法略有不同，川貝母組給藥量為2.1g/kg，浙貝母組與蜜炙百部組給藥量為3.1g/kg。

2.4 數據處理 數據用SPSS17.0 軟件處理，組間比較用t 檢驗。

3 結果

3.1 各組潤肺止咳藥物對小鼠的鎮咳作用 結果見表1。在末次給藥后1 小時，各潤肺止咳中藥組對小鼠咳嗽潛伏期均有一定的延長作用，其中生款冬花組、蜜炙款冬花組、紫金牛組、川貝母組、浙貝母組、蜜炙百部組、蜜炙枇杷葉組、蜜炙紫菀組與陰性對照組相比，均有顯著性差異，且其中生款冬花組、川貝母組、蜜炙枇杷葉組、蜜炙紫菀組效果最佳。

在減少小鼠咳嗽次數方面，各給藥組與陰性對照組比較，均有顯著性差異。其中炙紫菀組與陽性對照組、陰性對照組相比均有顯著性差異。

表1 各組潤肺止咳藥物對小鼠的鎮咳作用 (ˉx±s)

3.2 各組藥物對小鼠體重的影響 見圖1。結果表明，陽性對照組、生款冬花組、蜜炙款冬花組、天漿殼組小鼠體重呈下降趨勢。其他組小鼠體重總體呈增長趨勢。由表2 可知，生款冬花組小鼠體重下降最多，顯著低于空白對照組(P ＜0.01)。蜜炙款冬花組、鼠曲草組與空白對照組相比也有降低(P ＜0.05)。

空白組動物一般形態外觀、行為活動、飲食、皮毛、運動功能等均無異常。生款冬花組，陽性對照組小鼠表現為活動減少，皮毛無光澤，攝食量減少，以25 mL·kg－1每日灌胃給藥，生款冬花組小鼠5 天內死亡3 只，其他組小鼠未見死亡。

表2 各組藥物對小鼠體重的影響 (ˉx±s)

圖1 各組小鼠體重變化曲線圖

4 討論

通過對咳嗽潛伏期、咳嗽次數兩指標的測定，根據各潤肺止咳藥物組是否與陰性對照組有顯著性差異，初步可得出各組藥物鎮咳效果的強弱。綜合考察以上指標，各潤肺止咳藥物組對濃氨水誘導的小鼠咳嗽，均有明顯鎮咳作用。尤以蜜炙紫菀組鎮咳效果最為明顯，與陽性對照組相比亦表現顯著性。現代藥理研究表明，紫菀水煎劑具有祛痰作用，但無明顯鎮咳作用［4］，本實驗中紫菀鎮咳效果顯著，其原因可能是經蜂蜜炮炙后，其藥性轉瀉為潤，以潤肺止咳力勝，能瀉肺氣之壅滯，故鎮咳作用加強。

給藥期間小鼠體重變化的測定結果顯示，生款冬花組小鼠活動減少，皮毛無光澤，攝食量減少，5天內死亡3 只。該現象可能與款冬花中所含的吡咯里西啶生物堿(如千里光寧(senecionine)、腎形千里光堿(senkir kine)、千里光非靈(seneciphylline)、全緣千里光堿(integerrimine)等［5］)的肝毒性有關。初步分析這類生物堿對肝臟的損傷導致小鼠免疫力下降，進而表現出體重降低，及以上外觀表征。此外，與生款冬花相比，蜜炙款冬花組小鼠體重略有降低，但未見死亡。兩者在降低小鼠咳嗽次數與延長咳嗽潛伏期方面，與陰性對照組相比均有顯著性差異;咳嗽抑制率顯示，生品與蜜炙品分別為87.2%、82.8%，差異不大。可能是由于蜂蜜味甘性平，熟品性偏溫，以補脾氣、潤肺燥之力勝。經甘潤滋補的蜂蜜炮炙后，補脾益氣作用增強，故蜜炙款冬花組小鼠體重降低情況較生品組少，且未出現外觀及活動異常。至于蜜炙是否能夠降低款冬花的肝毒性以及其具體作用機制，需進行進一步的研究與觀察。建議我國醫藥衛生行政部門應根據我國的實際用藥情況，對款冬花等藥材中的肝毒性吡咯里西啶生物堿作出限量規定，以提高用藥安全性。此外，可從配伍研究入手，尋找款冬花減毒增效藥對，從而使款冬花這一潤肺下氣、止咳化痰之要藥能夠更好的應用于臨床，造福廣大人民群眾。

［1］陳奇.中藥藥效研究思路與方法［M］. 北京:人民衛生出版社，2005.

［2］王四旺，施新猷，黃傳貴，等. 中藥藥效學研究與評價［M］. 第1版.西安:陜西科學技術出版社，2005:125.

［3］白芥子提取物的鎮咳、祛痰、平喘作用研究［J］.中草藥，2003，34(7):635 －637.

［4］LIZ，FAN BL，YU QH，etal. Experimental studies on the antitussive and expectorant effects of Ligularia fischeri Turca.and Aster tataricus L.［J］.J Shenyang CoilPtulrm(沈陽約學院學報)，1987，4(2):136－139.

［5］濮社班，徐德然，張勉，等.中藥款冬花中肝毒吡咯里西啶生物堿LC/MSn 檢測［J］.中國天然藥物，2004，2(5):293.