阿司匹林和游離水楊酸高效液相色譜檢定新方法的研究

游秋屏 馬遜娜

結合阿司匹林在醫療領域內廣泛使用的現狀, 加強對該藥物和其內部制劑的質量檢定十分關鍵。游離水楊酸是一種帶有微弱毒性的物質, 其在阿司匹林內的含量多少直接關系到藥品的質量［1］。傳統的檢定阿司匹林內游離水楊酸的方法是比色法, 但受到個人視力限制該方法容易導致誤差, 因此,本文對阿司匹林和游離水楊酸進行新型檢定方法的探索, 相關報告整理如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器設備 紫外分光光度計型號為UV-1800, 產自島津公司；高效液相分析儀產自島津公司, 泵型號為LC-10ATVP, 以Kromasil C18柱為色譜柱, 外形為250×4.6 mm,5 μm。

1.1.2 試劑 對照品均產自山東某公司, 標定含量均超過99.5%。檢測用水為超純水, 色譜純為甲醇, 其余均為分析純,均由天津某公司生產。

1.2 方法 阿司匹林及游離水楊酸的檢測步驟類似, 均包括標準曲線的繪制、精密度試驗與回收率試驗。其中標準曲線的繪制主要步驟為：配置不同濃度的檢測試劑, 各取20 μl注入高效液相分析儀, 進行測試, 計算峰面積, 繪制標準曲線；精密度試驗的主要步驟為：取三種不同濃度溶液(阿司匹林取 64.8 μg/ml、81.0 μg/ml和 92.7 μg/ml, 游離水楊酸取 648 ng/ml、810 ng/ml、972 ng/ml), 行含量測試, 各進樣7次。計算RSD。回收率試驗的主要步驟為：取同樣濃度的藥物對照溶液, 行高效液相色譜分析, 計算回收率。

2 結果

物質回收率和試驗精密度結果見表1。

表1 新色譜檢定方法中阿司匹林和游離水楊酸的物質回收率和試驗精密度

3 結論

在進行高效液相色譜法檢定時, 檢驗人員需要從以下幾個方面著手, 確保各項數據和溶液量的精確, 減少人為因素導致的鑒定結果誤差。

①適用于新型檢定方法的色譜條件以及內標物 將阿司匹林、游離水楊酸以及安息香酸制成溶液, 用紫外分光光度儀對這三種溶液進行光譜特征掃描。將安息香酸和甲基腈制成濃度為50%的溶液［2］。色譜檢定條件中Methanol與水和冰醋酸的比例、流速、色譜檢測波長都需要試驗人員根據檢定要求進行適當的調整, 其中阿司匹林的色譜檢測波長和游離水楊酸的色譜檢測波長設定需要有所差別, 前者以250 nm為宜, 后者以300 nm為宜。②阿司匹林標準曲線計算分析 在進行標準曲線計算前, 試驗人員需要制出阿司匹林對照品液, 確保不同濃度的阿司匹林溶液濃度的精確性, 降低試驗誤差［2］。阿司匹林主峰面積和內標液峰面積比值是計算標準曲線公式的前提, 另外, 計算標準曲線公式時, 試驗人員需要準確計算出不同濃度阿司匹林進量和峰面積的關系, 結合相關系數進行總結。③阿司匹林試驗精密度檢定 精密度檢定需要實驗人員對同一濃度的阿司匹林溶液進行重復進樣, 提高試驗的精確度, 減少誤差, 在試驗結束后, 相對標準偏差的計算必不可少, 這是后期分析活動開展的依據。④水楊酸標準曲線計算分析 水楊酸標準曲線計算公式的總結也離不開水楊酸對照品液的制作, 需要選用相同濃度的溶液進行分析, 試驗人員對照色譜圖, 根據水楊酸溶液主峰面積和安息香酸的峰面積的比值進行外標和內標兩項內容落實公式總結。

從本次研究的成果來看, 高效液相色譜檢定法是能夠較好的對阿司匹林及游離水楊酸進行含量檢定的, 其試驗精密度、物質回收率等內容都符合檢定的相關要求, 因此, 在相關藥物檢測中, 工作人員可以將此項方法進行推廣, 提高藥物質量檢驗的科學性和準確性。

［1］丁家梅, 楊圣, 陸霄雄, 等.導數光譜多組分標定法對阿司匹林、撲熱息痛及水楊酸的同時測定.分析測試學報, 2011(06):612-617.

［2］石增強, 魏順尚.HPLC法測定阿司匹林腸溶片系列產品中游離水楊酸的含量.西北藥學雜志, 2010(08):255-256.