章清華 吳深濤 周 祥 閆冬雪 史翠娟 周 靜
(天津中醫藥大學第一附屬醫院,天津 300193)
近年來,糖尿病的發病率及患病率逐年升高,胰島β細胞分泌缺陷和胰島素抵抗(insulin resistance,IR)是糖尿病的重要病理生理基礎。脂聯素是新近發現由脂肪組織特異分泌的具有重要功能的一個細胞因子,具有調節糖脂代謝,改善胰島素抵抗,抗炎及抗動脈粥樣硬化等作用,在延緩2型糖尿病及其慢性并發癥的發生發展中起了重要作用。前期臨床研究表明化濁解毒法及方藥——化濁解毒顆粒在對抗糖、脂毒性相關IR方面療效確切[1],本研究通過觀察化濁解毒方藥對胰島素抵抗大鼠的干預作用,進一步探討其對脂聯素及胰島素分泌的影響,明確部分作用機制。
1.1 動物及飼料 6周齡雄性SPF級SD大鼠,中國醫學科學院醫學動物研究所提供。普通飼料由華榮科技有限公司提供,高脂飼料依照文獻[2]配制,即普通飼料中加入20%的脂肪(50%豬油和50%蛋黃粉)和20%蔗糖。
1.2 藥物及試劑 化濁解毒方顆粒(組成:黃連15g、大黃6g、姜黃 15g、僵蠶 6g、蟬蛻 6g、枳實 20g、清半夏 10g、柴胡15g、白芍 20g、黃芩 15g、干姜 5g、佩蘭 20g),由天津中醫藥大學第一附屬醫院藥廠制備,批號101003,實驗時用蒸餾水配制成所需濃度的溶液。鏈脲佐菌素(STZ)購自美國Sigma公司;高純總RNA快速提取試劑盒(離心柱型)購自北京百泰克生物技術有限公司;Prime ScriptRT reagent Kit,perfect Real Time試劑盒與SYBRPremix ExTaqTMⅡ (perfect Real Time)試劑盒均購自寶生物工程(大連)有限公司,PCR引物由寶生物工程(大連)有限公司設計并合成;脂聯素ELISA試劑盒購自美國invitrgeon公司,胰島素放免試劑盒購自中國原子能科學研究院同位素研究所。……