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豬傳染性胸膜肺炎的診斷和防控

2013-11-22 00:51:38翁善鋼
豬業科學 2013年2期
關鍵詞:檢測方法

翁善鋼

( 外高橋出入境檢驗檢疫局,上海 200137)

豬傳染性胸膜肺炎的病原為胸膜肺炎放線桿菌(Actinobacillus P1europeumoniae,APP)。因分離的年代和時間不同,曾被稱為副溶血嗜血桿菌(H.parahaemolyticus) 和胸膜肺炎嗜血桿菌(H. pleuropneumoniae)。

APP 已有15 個公認的血清型,分別命名為APP-1 至APP-15,這15 種血清型的致病力大不相同。豬群內不同血清型的流行情況在不同的國家也大不相同。這也使得不同國家采取的檢測以及診斷方法有所不同。有些國家主要檢測幾種毒力較強的血清型,還有些國家檢測所有血清型的APP。

影響APP 毒力的因素有多種,其中最為重要的是ApxI,ApxII 和ApxIII 3 個基因。這些基因使細菌產生的毒素,抑制豬的中性粒細胞和巨噬細胞的產生,即抑制細胞的吞噬功能,損害急性感染豬機體的防御機制。某些血清型的APP 只含有一種Apx 基因,也有些血清型的APP 含有2 種Apx 基因,這使其具有更強的細胞毒性(見表1)。幾乎所有血清型的APP 都存在ApxIV基因,該基因的致病潛力還沒有被確定。但ApxIV 具有高度的種特異性,因此,近幾年發展起來的多種診斷方法都基于該基因。

表1 不同血清型APP 所含有的毒力基因

已有多種實驗室方法用于診斷APP感染。采用何種診斷方法要注意結合臨床情況,同時也要考慮APP 的血清型以及毒力情況很復雜的實際情況。

1 檢測方法

1.1 抗原檢測

1)采集肺部以及扁桃體的病變組織作細菌培養,純培養物進一步進行血清型分型。

2)PCR 方法可直接用于檢測ApxIV 基因。病變的肺部組織,扁桃體拭子以及鼻拭子樣品或者來源于這些樣品的純培養物都可以采用PCR 方法鑒定出不同的血清型。

3)對APP 的純培養物采用PCR檢測ApxI、ApxII 和ApxIII 基因有助于了解APP 的毒力。

4)也可以采集新鮮的病變肺組織制作成壓片或者冰凍切片,利用免疫熒光實驗檢測肺組織中的APP 抗原。

1.2 抗體檢測

1)現在已有檢測針對ApxIV 基因抗體的ELISA 方法。

2)檢測針對APP 的莢膜多糖的ELISA 方法,有助于鑒定出針對不同血清型的APP 的抗體。

3)檢測針對不同血清型APP 抗體的ELISA 方法也有很多報道。

盡管上文介紹了不少檢測抗原和抗體的方法,很多方法事實上并沒有廣泛應用,每個國家的APP 感染流行現狀不同,科技水平也不同,這直接影響到具體檢測方法的使用。

2 診斷方案

2.1 先前未出現過胸膜肺炎的豬群中疑似急性胸膜肺炎暴發

在這種情況下,關鍵因素是及時確認豬群是否存在APP 感染。最好的辦法是將死豬和發病豬送實驗室進行剖檢。采集典型的急性胸膜肺炎病變的樣本,采用恰當的方法進行細菌培養(見圖1)。純培養物可以進一步用于血清分型。樣品保存好后也可以使用PCR,間接免疫熒光等方法進行檢測。

病豬的扁桃體試子樣品可以采用PCR 方法檢測ApxIV 基因。

2.2 對豬呼吸道疾病綜合征中出現的APP 感染進行診斷

出現較為復雜的胸膜肺炎時很有可能存在多種病原共同感染。此時,需要采集新鮮的肺組織進行細菌學和病毒學檢查,采用PCR 的方法檢測是否還存在其他病原。在3 個不同的部位采集具有典型肺部病變的組織進行病理組織學觀察有助于進一步了解肺部病變的性質。慢性病例中,APP 感染引起的病變逐漸皺縮,最終局限于斑點狀的病變(見圖2)。這種情況下,對肺組織進行PCR 檢測,或者對處于恢復期的豬檢測抗體有助于診斷。通常,APP 感染10~14 d 后就可以檢測到抗體。

3 防控

3.1 免疫接種

疫苗是控制APP 感染的重要手段。目前市場上有亞單位苗和滅活苗出售,但各種疫苗都有其不足之處,不能抵抗所有血清型的攻擊,不能消除患病動物的帶菌狀態。近來各國都在積極探索基因缺失弱毒苗對胸膜肺炎的保護效果,有望取代目前的滅活苗,因為基因缺失弱毒苗的交叉保護力更強,初步的動物實驗表明可抵抗多數血清型的攻擊。

3.2 藥物預防

根據近來國內外的用藥情況及相關報道顯示,APP 對頭孢噻夫、替米考星、氟甲砜霉素、先鋒霉素、環丙沙星、單諾沙星、恩諾沙星、四環素、慶大霉素、卡那霉素等較敏感。金霉素與泰樂菌素的聯合用藥在臨床上使用也較多。對有明顯臨床癥狀的發病豬,可用首選藥物進行口服和注射同時給藥,具有良好的效果。對未發病豬群在飼料或飲水中添加給藥,先用治療劑量給藥數天后,改用預防量給藥數周或數月可控制此病的發生。

各種細菌都會產生抗藥性,且不同的菌株產生的耐藥性也不相同。因此,在本病的防治過程中,對用于預防的藥物應有計劃地定期輪換使用,最好做藥敏實驗。

3.3 綜合防治

很多豬場存在多種病原微生物的混合感染。偽狂犬病、豬瘟、PRRS、支原體肺炎、副豬嗜血桿菌感染等疾病或破壞豬的免疫系統,或破壞豬肺臟的防御功能,很容易使豬只對 APP 的易感性增加,因而一定要做好這些疾病的防控工作。豬舍及環境均定期消毒,減少病原微生物的生存。減少豬的應激,改善和加強飼養管理,采用全進全出的飼養方式。

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