嬰幼兒哮喘53例外周血Leptin、Eotaxin、總IgE檢測及其臨床意義

延安大學附屬醫院兒科（延安716000） 張慧平 李元霞 龐隨軍 馮 娜 王春芬

支氣管哮喘是由多種細胞和細胞因子共同參與的氣道慢性炎癥性疾病。近年來，國內外對Leptin、Eotaxin及TIgE與哮喘關系的研究不斷深入，但大量臨床研究多限于成年人及年長兒童，上述因子對嬰幼兒哮喘的確切機制及其相互關系并不完全清楚。本組旨在通過測定嬰幼兒哮喘患兒外周血中Leptin、Eotaxin及TIgE的表達，并分析其相互關系，為嬰幼兒哮喘的防治提供新的思路。

資料與方法

1 臨床資料 觀察組選擇2010年1月至2011年5月延安大學附屬醫院兒科門診就診或住院的急性發作期嬰幼兒哮喘患兒53例，其中男34例，女19例，年齡6～36月，平均24.38±8.38月。均符合2008年中華醫學會呼吸病學分會哮喘學會修訂的支氣管哮喘防治指南中的兒童哮喘診斷標準［1］。哮喘急性發作期患兒給予吸氧、糖皮質激素吸人、支氣管舒張劑等對癥支持治療。同時除外并發有呼吸衰竭、心力衰竭的極重度患兒、先天性心臟病、結核感染、支氣管異物、全身使用糖皮質激素者及肥胖癥者。經正規治療達臨床緩解出院。癥狀緩解后按GINA方案進行分級治療，并于我院兒科門診隨診觀察或電話聯系。患兒定期隨診，癥狀、體征消失，并維持3個月以上者為臨床緩解期。對照組選擇健康兒童42例，其中男28例，女14例，年齡6～36月，平均26.63±2.38月，無個人及家族過敏性疾病，無寄生蟲感染史，近3個月無糖皮質激素用藥史。

2 標本留取及保存 哮喘組于急性發作期、臨床緩解期及健康對照組分別留取空腹靜脈血3ml，室溫下30min后，用離心機以3000r／min離心5min，取其血清，分裝在3個0.5ml經高溫消毒的無熱原、無內毒素EP管，暫時保存于-200C冰箱，2個月內轉移至-700C超低溫冰箱保存。

3 標本檢測 采用酶聯免疫吸附法檢驗Eotaxin，試劑盒由美國ADL公司生產，上海銳聰實驗室設備有限公司提供Eotaxin測定值范圍：0～240pg／ml，敏感度：0.1pg／ml。熒光酶聯免疫法測定TIgE，試劑盒購自天津新傳生物技術有限公司生產。用放射免疫分析法測定Leptin，用λ放射免疫計數儀測量標本的放射性，由專人負責檢測，檢測儀器為FJ2008-G放射免疫計數儀，Leptin試劑盒購于晶美生物技術有限公司。均按試劑盒說明規范操作，標本采用同一批測定。

結 果

1 嬰幼兒哮喘患兒外周血中Leptin、Eotaxin及TIgE的表達 見附表。嬰幼兒哮喘患兒急性發作期與臨床緩解期及健康對照組血清Leptin、Eotaxin及總IgE水平比較均有顯著性差異（P＜0.05）；臨床緩解期血清Leptin、Eotaxin及TIgE水平與對照組比較均有顯著性差異（P＜0.05）。

附表 嬰幼兒哮喘患兒外周血中Leptin、Eotaxin及TIgE的表達（±s）

附表 嬰幼兒哮喘患兒外周血中Leptin、Eotaxin及TIgE的表達（±s）

組 別 n Leptin（ng／ml） Eotaxin（pg／ml） TIgE（U／L）哮喘組 急性期 53 13.19±3.85 50.32±15.98 498.88±69.93緩解期 53 6.51±2.24 19.56±6.08 208.19±56.84對照組 42 3.96±2.02 6.72±2.49 49.66±10.51

2 相關性分析 嬰幼兒哮喘患兒急性發作期Eotaxin與TIgE成正相關（r＝0.686，P＜0.05）；嬰幼兒哮喘患兒臨床緩解期Eotaxin與TIgE成正相關（r＝0.770，P＜0.05）；嬰幼兒哮喘患兒急性發作期Leptin與Eotaxin（r＝0.125，P＞0.05）、Leptin與TIgE（r＝0.102，P＞0.05）均不相關；嬰幼兒哮喘患兒臨床緩解期Leptin與Eotaxin（r＝0.127，P＞0.05）、Leptin與TIgE（r＝0.261，P ＞0.05），均不相關。

討 論

嗜酸細胞（Eosinophil，EOS）是哮喘炎癥反應中造成組織損傷和肺功能異常的主要效應細胞，EOS浸潤是哮喘的基本病理特征。嗜酸粒細胞趨化因子（Eotaxin）是一種選擇性嗜酸性粒細胞（EOS）趨化因子和強有力的激活劑，通過結合EOS表面的受體，趨化EOS招募回氣管導致一系列級聯反應，引起過敏性炎癥損傷的各種呼吸道表現。Eotaxin在氣管內皮細胞和上皮細胞上表達［2］，參與哮喘氣管的炎癥反應。本組結果顯示：嬰幼兒哮喘患兒急性發作期血清Eotaxin水平明顯高于臨床緩解期及健康對照組，且臨床緩解期血清Eotaxin水平也明顯高于健康對照組，與國外文獻報道相似［3］，提示血清Eotaxin可能作為炎性因子參與嬰幼兒哮喘發病，并且哮喘患兒在臨床緩解期氣道炎癥仍持續存在。Eotaxin對EOS具有特異趨化活性，故從抑制EOS募集的角度探討哮喘治療可能成為新的方向。

IgE介導的速發型哮喘及炎癥誘導的遲發型哮喘均引起支氣管痙攣、氣流受阻，而氣流受阻是哮喘病理生理改變的核心。近年來雖然哮喘的發病機制有新的發現，但IgE仍是參與哮喘變態反應的主要抗體，哮喘及變態反應性疾病患者多數IgE升高。本組結果顯示：哮喘患兒急性發作期血清TIgE水平明顯于臨床緩解期，急性發作期及臨床緩解期血清IgE水平顯著高于健康對照組，與國內外研究結果一致［4］。因此，哮喘患兒血清IgE水平的變化與哮喘的病情變化有密切關系，嬰幼兒哮喘患兒血IgE的檢測可作為觀察哮喘的指標之一。

近來研究表明：瘦素（Leptin）可能是哮喘發生的獨立危險因素，可能通過BCL-2（Bcell lymphoma／leu-kemia-2，B細胞淋巴瘤／白血病-2）通路，抑制炎癥細胞的凋亡，而嗜酸性粒細胞的凋亡障礙亦是近年來提出的支氣管哮喘的發病機制之一，喘息兒童中具有高嗜酸性粒細胞血癥者是反復喘息發作的危險因素之一［1］。同樣是可能發展為支氣管哮喘的危險因素，故瘦素是否通過抑制炎癥細胞的凋亡參與嗜酸性粒細胞的上調值得關注，但目前未有直接證據表明此點。還有研究指出：瘦素可以通過抑制調節性T細胞的功能而導致哮喘的發生。瘦素除影響炎癥細胞外，也與炎癥介質的釋放密切相關：瘦素可增加白三烯的合成，增加血清特異性IgE，這些炎癥因子及炎癥介質的上調可能促進炎癥細胞的趨化及引起炎癥因子瀑布式釋放，從而在兒童喘息的氣管炎癥反應中起到作用。雖然并非所有的喘息兒童都有氣管高反應性，但氣管的高反應性與持續反復的兒童喘息密切相關［5］。瘦素在哮喘氣管炎癥發生中起重要作用，氣管炎癥的發生反過來又引起瘦素產生的增加，從而形成一個惡性循環。而實驗表明［6］：給予外源性瘦素可以增強野生型小鼠的氣管炎癥反應及小鼠氣管對乙酰膽堿的反應性，推測瘦素可能參與了氣管反應性的調控。本研究結果顯示：哮喘患兒急性期血清Leptin水平高于緩解期及對照組，哮喘臨床緩解期Leptin水平與對照組比較有顯著性差異，與Jang等研究結果相似［7］。表明Leptin可能影響氣管功能，增加哮喘發病風險，在哮喘細胞因子的精細網絡調節中可能起一定的作用。結合本實驗結果考慮哮喘患兒血清Leptin水平的變化是哮喘發作的結果。

哮喘的病因和發病機制相當復雜，細胞因子失衡是導致哮喘患者體內IgE增高的關鍵。本組結果表明：血清Eotaxin與IgE水平在哮喘急性發作期及臨床緩解期均呈正相關關系，與國外研究結論一致［8］。提示哮喘是由多細胞和細胞因子參與的呼吸道慢性炎癥性疾病，細胞因子失衡是哮喘的重要表現，Eotaxin與TIgE在哮喘發病中可能彼此之間相互影響，共同參與哮喘的病理生理改變。哮喘的診斷相對更重視癥狀、體征的價值，本組結果表明：動態觀察哮喘患兒血清Eotaxin與TIgE水平，可更全面評價細胞因子在哮喘發病中的作用及相互關系。了解Eotaxin與TIgE之間的關系，有助于探討哮喘的病理生理機制，對于哮喘的診斷和病情評估有指導性意義，為通過阻斷Eotaxin及IgE產生途徑治療哮喘的新思路提供理論依據。

本組結果提示：不論是嬰幼兒哮喘患兒急性發作期還是臨床緩解期，Leptin與Eotaxin及總IgE無相關性，與目前報道不太一致，研究發現［9］：血清Leptin水平在哮喘兒童中比健康兒童顯著升高，哮喘兒童血中IgE與Leptin回歸分析僅存在微弱的相關性；Parameswaran等［10］認為 Leptin抑制IL-13誘導的Eotaxin的產生，參與哮喘的發生機制，提示Leptin對Thl／Th2細胞之間平衡的調節尚無一致的結論。但本研究僅對Leptin在嬰幼兒哮喘發病中作用做初步探討，且患兒年齡段在＜3歲，樣本含量相對較少，Leptin在嬰幼兒哮喘發病中的作用需進一步研究。

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