氣相色譜法測(cè)定平菇中16種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量

周長(zhǎng)紅

（云南省臨滄市臨翔區(qū)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)站，云南 臨滄 677000）

平菇在栽培種植過程中會(huì)發(fā)生蟲害，如蚊蠅的幼蟲、蛆、螨害[1]等，一般采用農(nóng)藥防除這些害蟲。有機(jī)磷農(nóng)藥是最常用的一類農(nóng)藥，約占全部農(nóng)藥的70%[2]。施用有機(jī)磷農(nóng)藥雖然可以防除這些害蟲，但如果施藥方法不當(dāng)，會(huì)在平菇上留下農(nóng)藥殘留，一旦這些農(nóng)藥殘留進(jìn)入人體，會(huì)對(duì)人體健康造成影響。因此，建立平菇中多種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的測(cè)定方法，在指導(dǎo)平菇栽培種植上正確使用有機(jī)磷農(nóng)藥、防止有機(jī)磷農(nóng)藥殘留超標(biāo)的平菇上市銷售以及保障人體健康等都具有重要的意義。一般測(cè)定有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的方法有氣相色譜法[3－5]、液相色譜法[6,7]、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法[8,9]、液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法等[10,11]。本文在參考以上文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，采用乙腈萃取平菇樣品中的16種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留，然后用DB－17中極性石英毛細(xì)管柱分離，氣相色譜－火焰光度檢測(cè)器（GC－FPD）測(cè)定平菇中的16種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量，方法簡(jiǎn)單、快捷、準(zhǔn)確且有實(shí)用價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 主要儀器與試劑

Agilent 6890N型氣相色譜儀，帶火焰光度檢測(cè)器、石英毛細(xì)管柱，DB－17型 (30 m×0.53 mm×1.0 μm)；飛利浦HR2864型搗碎機(jī)；美國(guó)DIAX900型勻漿機(jī)（13 500 R·min－1）；美國(guó)OA－SYS型氮吹儀；QL－861旋渦混勻器。丙酮（分析純），重蒸后使用；氯化鈉、乙腈均為分析純。150 mL錐形瓶、100 mL具塞量筒、10 mL刻度試管、150 mL燒杯等。

標(biāo)準(zhǔn)溶液敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、氧化樂果、二嗪磷、樂果、甲基對(duì)硫磷、毒死蜱、對(duì)硫磷、水胺硫磷、對(duì)硫磷、丙溴磷、三唑磷、伏殺硫磷、亞胺硫磷等，濃度均為1 000 μg·mL－1，購(gòu)于天津環(huán)境監(jiān)測(cè)中心。

1.2 氣相色譜條件

進(jìn)樣口溫度220℃；檢測(cè)器溫度250℃；柱溫為程序升溫，即150℃保留1 min，以8.0℃·min－1升至250℃，保持10 min；載氣為氮?dú)猓兌龋?9.999%，流速10 mL·min－1；燃?xì)鉃闅錃猓兌龋?9.999%，流速為75 mL·min－1；助燃?xì)鉃榭諝猓魉贋?00 mL·min－1；進(jìn)樣方式為不分流進(jìn)樣，自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣；進(jìn)樣量為1.0 μL。

1.3 實(shí)驗(yàn)材料

實(shí)驗(yàn)材料為平菇，2010年7月21日購(gòu)于昆明市江岸小區(qū)農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)。

1.4 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制及標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

取標(biāo)準(zhǔn)品溶液（濃度為1 000 μg·mL－1）1 mL移入25 mL的容量瓶，用丙酮稀釋后定容至25 mL，配制成濃度為40 μg·mL－1的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。氧化樂果、伏殺硫磷、亞胺硫磷各取5 mL，其余13種有機(jī)磷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液各取2.5 mL，移入50 mL容量瓶，用丙酮定容至50 mL，即得濃度為 2.0 μg·mL－1（氧化樂果、伏殺硫磷、亞胺硫磷濃度為4.0 μ·mL－1）的16種有機(jī)磷農(nóng)藥的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，再用丙酮稀釋，配制成 0.05 μg·mL－1、0.1 μg·mL－1、0.2 μg·mL－1、0.4 μg·mL－1、0.6 μg·mL－1、1.0 μg·mL－1等系列濃度，分別測(cè)定其對(duì)應(yīng)的峰面積，以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.5 試驗(yàn)步驟

將平菇樣品放入搗碎機(jī)中搗碎，準(zhǔn)確稱取25 g樣品放入150 mL錐形瓶中，加入乙腈50 mL，在勻漿機(jī)中高速勻漿40 s，過濾到裝有7 g～10 g氯化鈉的具塞量筒中，振搖1 min，靜置約0.5 h，使水相和乙腈相分層，取上層乙腈相液10 mL，置于150 mL燒杯中。

用滴管將量筒中剩余的乙腈相取出，棄掉，留水相層。用移液管取水相10 mL放入25 mL具塞試管中，加入10 mL乙腈，在旋渦混勻器上提取1 min，靜置15 min后取上層乙腈相9 mL并入150 mL燒杯中，將燒杯放到水浴鍋上（水浴溫度80℃）并通入氮?dú)猓挂译嬲舭l(fā)近干，取出燒杯使杯內(nèi)的溫度降至室溫，加入2 mL的丙酮溶解樣品，蓋上鋁箔，備用。

將上述樣液完全轉(zhuǎn)移至10 mL的刻度試管中，再用約3 mL丙酮，分3次沖洗燒杯，并轉(zhuǎn)移至刻度試管中，最后定容至5 mL，在旋渦混勻器上混勻，倒入2 mL進(jìn)樣瓶中，上機(jī)分析。

1.6 方法回收率及檢出限的測(cè)定

稱取不含上述16種有機(jī)磷農(nóng)藥的平菇樣品4份，每份25 g，其中1份為對(duì)照，其余3份分別加入濃度為2.0 μg·mL－1（氧化樂果、伏殺硫磷、亞胺硫磷濃度為4.0 μg·mL－1）的16種有機(jī)磷農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)工作液1.25 mL，搖勻，放置30 min后按照上述處理方法和儀器條件進(jìn)行回收率測(cè)定，方法檢出限按3倍信噪比計(jì)算。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜圖

2.1.1 平菇樣品基質(zhì)色譜圖

平菇樣品基質(zhì)色譜圖見圖1。

由圖1可以看出，平菇樣品基質(zhì)色譜圖基線平穩(wěn)，對(duì)16種有機(jī)磷農(nóng)藥的測(cè)定沒有影響。

2.1.2 平菇樣品中添加16種有機(jī)磷標(biāo)樣色譜圖

在平菇樣品中添加16種有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)，使樣品中氧化樂果、伏殺硫磷、亞胺硫磷的濃度為0.2 mg·kg－1，其余13種有機(jī)磷農(nóng)藥的濃度為0.1 mg·kg－1，然后按1.4處理樣品得到的色譜圖見圖2。

2.2 保留時(shí)間和標(biāo)準(zhǔn)曲線

16種有機(jī)磷農(nóng)藥保留時(shí)間及標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)見表1。

表1 16種農(nóng)有機(jī)磷農(nóng)藥保留時(shí)間及線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)

由表1可以看出，相關(guān)系數(shù)為0.9959～0.9999，說(shuō)明標(biāo)準(zhǔn)曲線線性相關(guān)性好，滿足定量分析需要。

2.3 16種有機(jī)磷農(nóng)藥保留時(shí)間以及在平菇樣品中的回收率、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差及檢出限測(cè)定結(jié)果

在不含農(nóng)藥殘留的平菇樣品中添加16種有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)液，使樣品中氧化樂果、伏殺硫磷、亞胺硫磷濃度為0.2 mg·kg－1，其余 13 種有機(jī)磷農(nóng)藥的濃度為 0.1 mg·kg－1，然后按1.4處理樣品，測(cè)定16種有機(jī)磷農(nóng)藥在平菇樣品中的回收率、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差及檢出限，結(jié)果見表2。

表2 16種有機(jī)磷農(nóng)藥在平菇中的回收率、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差及檢出限測(cè)定結(jié)果

由表2可見，在平菇基質(zhì)樣品中添加16種有機(jī)磷農(nóng)藥，其平均回收率介于75.2%～105%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于 9.9%，檢出限為 0.004 mg·kg－1～0.03 mg·kg－1。

2.4 討論

本文試驗(yàn)采用乙腈提取樣品中的16種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留，然后用DB－17石英毛細(xì)管柱分離，火焰光度檢測(cè)器測(cè)定。標(biāo)準(zhǔn)曲線線性相關(guān)性好，16種有機(jī)磷農(nóng)藥的平均回收率、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差和檢出限測(cè)定結(jié)果表明，方法具有較好的準(zhǔn)確度、精密度和靈敏度，滿足測(cè)定多農(nóng)藥殘留時(shí)對(duì)準(zhǔn)確度、精密度和靈敏度的要求[12]。方法同時(shí)具有操作簡(jiǎn)單、分析速度快等優(yōu)點(diǎn)。采用以上方法，對(duì)100余份平菇樣品中的16種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量進(jìn)行了測(cè)定，得到滿意結(jié)果。

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