黃芪多糖對Hhcy大鼠心肌缺血再灌注過氧化的影響

孫 倩，劉曉舒，楊 鑫，馬越嬌，韓 健，宋光熠 (遼寧衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院，遼寧 沈陽 110101)

高同型半胱氨酸血癥(Hhcy)是引發(fā)動脈粥樣硬化及心腦血管疾病的病因之一。為尋找有效的防治藥物，同時(shí)探討相關(guān)藥物的防治機(jī)制，應(yīng)用腹腔注射2%L－半胱氨酸5 ml/kg復(fù)制Hhcy大鼠模型，在此基礎(chǔ)上觀察黃芪多糖對Hhcy大鼠心肌缺血再灌注的防治作用?，F(xiàn)將部分結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 材料:①動物及飼料:8周齡(體重190～210 g)SD(Sprague Dawley)大鼠(遼寧長生生物技術(shù)有限公司)。實(shí)驗(yàn)動物許可證為遼寧省科學(xué)技術(shù)廳簽發(fā)，許可證號:SCXK(遼)2010－0001。飼料為繁育鼠全價(jià)固體顆粒飼料(遼寧長生生物技術(shù)有限公司)。②藥品及試劑:L－半胱氨酸(美國Sigma公司)。CK、LDH、Tn－ Ⅰ、Hcy、CAT、SOD、MDA 測定試劑盒(南京建成生物工程研究所)。黃芪多糖(成都龍泉高科天然藥業(yè)有限公司)。③主要儀器:RM6240多道生理信號采集系統(tǒng)(成都儀器廠);UV－265FW紫外分光光度計(jì)(日本光電工業(yè)株式會社);ALC－V動物呼吸機(jī)(上海奧爾科特生物技術(shù)有限公司);318C酶標(biāo)儀(上海三科儀器有限公司)。

1.2 方法:取SD大鼠40只，隨機(jī)分為4組，每組各10只，雌雄各半?？瞻讓φ战M:每天腹腔注射生理鹽水5 ml/kg;正常對照組:每天腹腔注射生理鹽水5 ml/kg;HHcy模型組:每天腹腔注射2%L－半胱氨酸5 ml/kg;黃芪多糖干預(yù)組:每天腹腔注射2%L－半胱氨酸5 ml/kg，灌胃給予10%黃芪多糖10 ml/kg。所有大鼠均飼以常規(guī)動物飼料和水。連續(xù)給藥10周，10周后于末次給藥30min后腹腔注射戊巴比妥鈉(30 mg/kg)，麻醉后氣管插管安裝呼吸機(jī)，開胸結(jié)扎冠狀動脈左室降支90min后松開結(jié)扎線再灌注90min?？瞻讓φ战M開胸冠狀動脈左室降支穿線不結(jié)扎，于180min后取血，其他組于再灌注90min后取血。各組標(biāo)Ⅱ?qū)?lián)全程記錄心電圖，血漿按照測定試劑盒操作說明書測定Hcy、CK、LDH、Tn－Ⅰ、CAT、SOD、MDA、Hcy。

2 結(jié)果

2.1 心肌缺血再灌注心電圖的變化:各組大鼠結(jié)扎冠狀動脈左室降支90min后及松開結(jié)扎線再灌注90min后均表現(xiàn)為R波下降，ST段抬高并與T波融合為單項(xiàng)曲線，符合急性心肌梗死心電圖特點(diǎn)。

2.2 血漿同型半胱氨酸的變化:SD大鼠腹腔注射2%L－半胱氨酸5 ml/kg 10周后，Hhcy模型組和黃芪多糖干預(yù)組大鼠血漿Hcy含量明顯高于空白對照組或正常對照組(P＜0.01)。見表1。

2.3 心肌缺血再灌注CK、LDH、Tn－Ⅰ的變化:Hhcy模型組大鼠血漿CK、LDH、Tn－Ⅰ含量明顯高于正常對照組(P＜0.01)。黃芪多糖干預(yù)組大鼠血漿CK、LDH、Tn－Ⅰ明顯低于Hhcy模型組(P＜0.01)。見表1。

2.4 心肌缺血再灌注CAT、SOD、MDA的變化:Hhcy模型組大鼠血漿MDA含量明顯高于正常對照組(P＜0.01);CAT、SOD活性明顯低于正常對照組(P＜0.01)。黃芪多糖干預(yù)組大鼠血漿MDA含量明顯低于Hhcy模型組(P＜0.01)，CAT、SOD活性明顯高于Hhcy模型組。見表2。

表1 心肌缺血再灌注血漿hcy、CK、LDH、Tn－Ⅰ變化(n=10，)

表1 心肌缺血再灌注血漿hcy、CK、LDH、Tn－Ⅰ變化(n=10，)

組別Hcy(μmol/L)CK(U/ml)LDH(U/ml)Tn－Ⅰ(Pg/ml)5.26±0.611.27±0.495.59±0.44 102.8±28.2正常對照組 4.93±0.514.14±0.368.24±0.22 191.1±12.4 Hhcy模型組 19.88±5.035.78±0.6510.61±1.91220.4±18.4黃芪多糖組空白對照組8.56±5.051.67±0.526.71±0.89 179.2±13.0

表2 心肌缺血再灌注血漿CAT、SOD、MDA變化(n=10，)

表2 心肌缺血再灌注血漿CAT、SOD、MDA變化(n=10，)

組別 MDA(nmol/ml) CAT(U/ml) SOD(U/ml)4.99±1.01 22.36±1.74 132.79±14.79正常對照組 8.05±1.59 10.37±1.31 101.24±15.06 Hhcy模型組 12.60±2.12 5.70±1.71 65.49±8.68黃芪多糖組空白對照組8.88±1.26 17.51±2.90 94.54±14.61

3 討論

黃芪(Leguminosae)為豆科草本植物蒙古黃芪、膜莢黃芪的根，具有補(bǔ)氣固表、利水退腫、托毒排膿、生肌等功效?，F(xiàn)代研究證實(shí)黃芪含皂甙、蔗糖、多糖、多種氨基酸、葉酸及硒、鋅、銅等多種微量元素。大量的實(shí)驗(yàn)表明黃芪有強(qiáng)心及心肌保護(hù)作用，其對心肌缺血缺氧、感染病毒以及藥物中毒的心肌均有明顯的保護(hù)作用[1]，對血壓具有雙相調(diào)節(jié)作用[2，3]，能緩解動脈粥樣硬化[4，5]。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，Hhcy可加重心肌缺血再灌注損傷，黃芪多糖可緩解這一損傷，體現(xiàn)在心肌損傷或壞死所釋放的CK、LDH、Tn－Ⅰ的減少。其機(jī)制與提高CAT、SOD活性的抗過氧化作用密切相關(guān)。

[1]劉 洋，華樹東，賀永貴，等.黃芪對心房收縮力及心房鈉尿肽分泌的影響[J].中國中藥雜志，2008，33(19):2226.

[2]查益中.黃芪對血壓的雙相調(diào)節(jié)作用[J].中醫(yī)雜志，2000，41(6):329.

[3]陳治奎，胡中江，夏強(qiáng)，等.黃芪對自發(fā)性高血壓大鼠的抗高血壓效應(yīng)及其機(jī)制的初步研究[J].中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2008，12(6):705.

[4]張小衛(wèi)，余 靜，常 鵬，等.黃芪注射液對高血壓病患者炎癥介質(zhì)的影響[J].蘭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)，2007，33(4):47.

[5]劉冠男，陳國權(quán)，趙 明，等.黃芪總黃酮對病毒性心肌炎小鼠心臟血流動力學(xué)及心肌細(xì)胞鈣電流的作用[J].中國心血管雜志，2008，13(6):431.