丙環唑和戊唑醇殺菌劑在香蕉中的殘留檢測方法研究

張月

（中國熱帶農業科學院分析測試中心，海南 ?？?571101）

丙環唑和戊唑醇屬于三唑類殺菌劑，是甾醇脫甲基抑制劑，具有保護、治療、鏟除三大功能，殺菌譜廣、持效期長[1]。丙環唑的英文通用名稱：Propiconazole，分子式：C15H17N3O2Cl2，分子量：342.2，CAS號：60207-90-1，常用于防治香蕉葉斑病、葉條斑病，殘效期在1個月左右，一般只對皮膚和眼有刺激作用，經口誤服，可引起惡心、嘔吐等；戊唑醇的英文通用名稱：Tebuconazole，分子式：C16H22CN3O，分子量：307.8，CAS 號：107534-96-3[2]，常用于防治香蕉葉斑病、黑星病。試驗采用氣相色譜和高效液相色譜分析方法，在兩種儀器上同時檢測兩種農藥，優化色譜分析條件，對比兩種分析方法的回收率，為檢測單位提供更多分析方法的基礎資料。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

試驗儀器：氣相色譜儀TRACE GC Ultra（NPD），高效液相色譜儀Waters2695配2489紫外檢測器，電子頂載天平，旋轉蒸發儀及各種玻璃器皿。

試驗試劑：丙酮、氯化鈉、乙腈、正己烷、二氯甲烷、甲醇（分析純）；甲醇、乙腈（色譜純）。

1.2 藥劑和香蕉樣品

試驗藥劑：丙環唑標準品，100 mg/L國家標準樣品（農業部環境保護科研監測所研制）；戊唑醇標準品，100 mg/L國家標準樣品（農業部環境保護科研監測所研制）。

香蕉樣品：供試香蕉樣品來源于?？谑行阌^永莊香蕉基地，未噴施丙環唑和戊唑醇殺菌劑。

1.3 標準溶液的配制

1.3.1 GC法 從100 mg/L丙環唑和戊唑醇標準溶液中分別移取0.5 mL標準溶液于10 mL容量瓶中，加正己烷定容至刻度，貯備液濃度為5 μg/mL。從貯備液中分別移取 0.1、0.2、0.4、1.0、2 mL 于 10 mL容量瓶中，加正己烷定容至刻度，上機液濃度為0.05、0.1、0.2、0.5、1.0 μg/mL。

1.3.2 HPLC法 從100 mg/L丙環唑和戊唑醇標準溶液中分別移取0.5 mL標準溶液于10 mL容量瓶中，甲醇定容至刻度，貯備液濃度為5 μg/mL。從貯備液中分別移取 0.1、0.2、0.4、1.0、2 mL 于 10 mL容量瓶中，加甲醇定容至刻度，上機液濃度為0.05、0.1、0.2、0.5、1.0 μg/mL。

1.4 添加回收率

稱取25.00±1.00 g香蕉全果，置于150 mL燒杯中，分別滴加丙環唑和戊唑醇標準品1.25×10-3mg、2.5×10-3mg、1.25×10-2mg 于香蕉樣品中，得到濃度為0.05、0.1、0.5 mg/kg的待測試樣。

1.5 樣品前處理[3]

1.5.1 GC法提取 稱取待測試樣25.00±1.00 g，置于150 mL燒杯中，加入50 mL乙腈，在勻漿機中勻漿2 min，過濾于裝有7.0 g左右氯化鈉的具塞量筒中，收集濾液，蓋上蓋子，劇烈搖動2 min，在室溫下靜止30 min，待乙腈相與水相分層。

凈化：吸取10.0 mL上清液，放入旋轉蒸發瓶中，40℃旋轉蒸發至干，加入2 mL正己烷溶解，將SPE弗羅里硅柱依次用5.0 mL丙酮+正己烷（體積比 10∶90，下同）、5.0 mL 正己烷預淋洗，樣品全部轉移至色譜柱上，用10 mL丙酮+正己烷分3次淋洗，洗脫液收集于旋轉蒸發瓶中，于40℃旋轉蒸發至干，加正己烷定容至2.5 mL，待測。

1.5.2 HPLC法提取 稱取待測試樣25.00±1.00 g，置于150 mL燒杯中，加入50 mL乙腈，在勻漿機中勻漿2 min，過濾于裝有7.0 g左右氯化鈉的具塞量筒中，收集濾液，蓋上蓋子，劇烈搖動2 min，在室溫下靜止30 min，待乙腈相與水相分層。

凈化：吸取10.0 mL上清液，放入旋轉蒸發瓶中，40℃旋轉蒸發至干，加入2 mL二氯甲烷+甲醇（體積比95∶5，下同）溶解，將NH2柱用5.0 mL二氯甲烷+甲醇預淋洗，樣品全部轉移至色譜柱上，再用10 mL二氯甲烷+甲醇分3次淋洗，洗脫液收集于旋轉蒸發瓶中，于40℃旋轉蒸發至干，用甲醇定容至2.5 mL，待測。

1.6 色譜條件

1.6.1 GC法 色譜柱：ZB-35（30 m×0.32 mm×0.25 μm）；升溫程序：初始溫度100℃，保持0.3 min，再以30℃/min速度升溫至255℃，保持8 min，然后以35℃/min升溫至280℃，保持4 min。進樣口溫度：250℃；NPD 檢測器溫度：300℃；高純氮氣（純度99.999%）為載氣；氮氣流速：1.5 mL/min；空氣流速：60 mL/min；氫氣流速：2.5 mL/min；進樣量：1 μL。

1.6.2 HPLC法 色譜柱：C18（150 m×4.6 mm×5 μm）；流動相：乙腈:水為 55:45；流速：1.0 mL/min；進樣量：10 μL；波長：225 nm。

2 結果與分析

2.1 氣相色譜方法

在氣相色譜分析方法中，丙環唑為雙峰，丙環唑和戊唑醇的保留時間是5.61 min和5.76 min，峰型對稱，出峰集中。標準溶液譜圖見圖1。

圖1 丙環唑和戊唑醇標準溶液譜圖（GC法）

2.2 高效液相色譜方法

在高效液相色譜分析方法中，丙環唑和戊唑醇的保留時間是9.415 min和7.250 min，峰型對稱，出峰集中。標準溶液譜圖見圖2。

圖2 丙環唑和戊唑醇標準溶液譜圖（HPLC法）

2.3 兩種方法的準確度、精密度和靈敏度

丙環唑和戊唑醇在香蕉全蕉中的最低檢測濃度是0.05 mg/kg。采用外標法峰面積定量，添加回收率用標準曲線法定量，添加濃度及回收率結果見表1。GC方法中，用正己烷作溶劑，配制丙環唑和戊 唑 醇 混 合 標 準 溶 液 ：0.05、0.10、0.20、0.50、1.0 mg/L，在上述儀器的條件下測定，得出丙環唑標準曲線方程：y=1.204 11×10-7x，相關系數R2=0.997；戊唑醇標準曲線方程：y=1.533 67×10-7x，相關系數R2=0.997。HPLC方法中，用甲醇作溶劑，配制丙環唑和戊唑醇混合標準溶液：0.1、0.2、0.5、0.8、1.0 mg/L，在上述儀器的條件下進行測定，得出丙環唑標準曲線方程：y=3.29×104x-6.13×102，相關系數R2=0.998；戊唑醇標準曲線方程：y=1.84×104x+1.11×102，相關系數 R2=1.000。

從表1中可知，GC方法中，丙環唑在香蕉中平均回收率為86.9%～111.0%，相對標準偏差為3.0%～7.4%；戊唑醇在香蕉中平均回收率為104.0%～115.0%，相對標準偏差為3.1%～6.5%；HPLC方法中，丙環唑在香蕉中平均回收率為77.2%～93.0%，相對標準偏差為3.1%～8.9%；戊唑醇在香蕉中平均回收率為102.0%～106.0%，相對標準偏差為5.5%～7.5%；均符合農藥殘留分析的要求[4]。相關譜圖見圖 3～圖 6。

表1 丙環唑和戊唑醇在香蕉全蕉中的添加回收率

3 結論

試驗采用氣相色譜法和高效液相色譜法同時檢測香蕉中丙環唑和戊唑醇。其方法操作簡單，方法準確度、精密度均符合農藥殘留量檢測要求。

[1]王愛華，徐寶強.戊唑醇使用方法[J].河北果樹，2009，（3）：41.

[2]湯 婕，岳永德，花日茂，等.香蕉中戊唑醇殘留分析方法的比較研究[J].安徽農業大學學報，2008（35）：275-279.

[3]NY/T 761-2008.蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留檢測方法[S].北京：中國農業出版社，2008.

[4]NY/T 788-2004.農藥殘留試驗準則[S].北京：中國農業出版社，2004.