氯沙坦對慢性心力衰竭大鼠血清TNF－а和IL－18變化的影響

歐葉濤，張東東，孫 權(quán)，陳乃峰，韓 曦，鐘堂武，田國忠

(佳木斯大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院解剖教研室，黑龍江佳木斯154007)

慢性心力衰竭(CHF)是許多心血管系統(tǒng)疾病發(fā)生發(fā)展的最終結(jié)果，也是導(dǎo)致患者死亡的主要原因。近年來隨著對其發(fā)病機(jī)制研究的逐步深入，越來越多的證據(jù)表明，在慢性心衰的發(fā)生發(fā)展過程中，炎性細(xì)胞因子的過度激活在此過程中扮演著關(guān)鍵的角色。腫瘤壞死因子а(TNF－а)和白介素18(IL－18)是引起免疫炎性反應(yīng)的重要因子，廣泛的參與機(jī)體各個組織器官的免疫炎性進(jìn)程，本研究采用酶聯(lián)免疫法，探討氯沙坦對CHF大鼠血清中TNF－а和IL－18含量的變化的影響，旨在闡明TNF－а和IL－18活化在CHF時的病理意義及作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 動物模型制作和分組

健康雄性Wistar大鼠，體重(250±20)g(佳木斯大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供)，乙醚麻醉后于左側(cè)第四肋間隙打開胸腔，暴露心臟，結(jié)扎左前降支制成心衰大鼠模型;同時部分大鼠進(jìn)行假手術(shù)，即不結(jié)扎左前降支，其余操作同模型組[1]。

待手術(shù)動物傷口愈合后，隨機(jī)將動物分成A組(模型組)、B組(治療組)、C組(假手術(shù)組)和D組(正常組)，每組12只。其中治療組(B組)給予氯沙坦治療，其余各組給予生理鹽水，2個月后取血檢測。

1.2 試驗(yàn)試劑

TNF－а和IL－18 ELISA試劑盒購于武漢博士德生物有限公司，氯沙坦由杭州默沙東制藥公司生產(chǎn)。

1.3 檢測方法

參照試劑說明書，酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA方法)于450nm波長下檢測樣品濃度，血清中TNF－а的濃度以ng/L表示，血清IL－18濃度以pg/L表示。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，結(jié)果以表示，檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)а =0.05。

2 結(jié)果

各組大鼠血清中TNF－а和IL－18的含量經(jīng)過ELISA檢測，統(tǒng)計學(xué)軟件分析后可見，模型組與其他三組動物血清中TNF－а和IL－18的含量均存在明顯差異，P＜0.05;治療組與正常組和假手術(shù)組之間也存在顯著差異，P＜0.05;正常組和假手術(shù)組清中TNF－а和IL－18的含量無差異，P ＞0.05。

表1 各試驗(yàn)組大鼠血清樣品TNF－а和IL－18檢測結(jié)果(±s，n=12)

表1 各試驗(yàn)組大鼠血清樣品TNF－а和IL－18檢測結(jié)果(±s，n=12)

注:●與正常組相比P＜0.05;▲與模型組相比P＜0.05。

對象 TNF－а(ng/L) IL－18(pg/L)A 組 14.25±3.51● 361.16±92.53●B 組 10.67±2.52●▲ 265.91±77.07●▲C 組 6.91±1.30▲ 188.43±49.37▲D 組 7.02±1.15▲ 184.59±40.25▲

3 討論

慢性心力衰竭的發(fā)病機(jī)制有很多學(xué)說，目前備受關(guān)注的是免疫炎性反應(yīng)學(xué)說，近年來很多研究結(jié)果顯示，免疫炎性反應(yīng)在CHF的發(fā)生發(fā)展過程中起著重要作用，主要表現(xiàn)為炎性細(xì)胞因子的異常表達(dá)和炎性細(xì)胞浸潤。目前比較公認(rèn)的炎性細(xì)胞因子有核因子－ΚB(NF－ΚB)、TNF－а和白細(xì)胞家族成員(IL －1、6、10、18)等[2，3]。目前，對于免疫炎性反應(yīng)在CHF時的具體作用機(jī)制尚未十分明了，TNF－а主要由單核/巨噬細(xì)胞分泌，今年來研究發(fā)現(xiàn)，TNF－а具有抑制心肌細(xì)胞收縮，誘發(fā)心肌細(xì)胞凋亡，參與心臟重塑作用，在CHF的發(fā)生發(fā)展過程中扮演著重要的角色[4];同時也有研究顯示，在CHF過程中，TNF－а能夠通過正反饋調(diào)節(jié)增加自身合成，因而隨著CHF的進(jìn)展，血清中的TNF－а的含量呈逐漸增高的趨勢[3]。IL－18是IL－1家族的成員，研究顯示，IL－18主要通過誘導(dǎo)IFN－γ、TNF－а等炎性因子的表達(dá)，在CHF的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮作用[5]，另外也有研究表明，IL－18還可以直接通過受體影響心肌細(xì)胞的功能[6]。本研究結(jié)果顯示，CHF大鼠血清中TNF－а和IL－18的含量均明顯高于正常組，說明在CHF發(fā)生發(fā)展過程中，TNF－а和IL－18所引起的免疫炎性反應(yīng)起著重要的推動作用。給予氯沙坦治療后，氯沙坦可以有效阻斷NF－ΚB的活化，進(jìn)而減少免疫炎性因子的釋放[7，8]，心衰大鼠的心功能出現(xiàn)明顯好轉(zhuǎn)。因此，血清中TNF－а和IL－18含量與模型組相比，出現(xiàn)明顯的下降。綜上所述，TNF－а和IL－18是CHF表現(xiàn)異常活躍的炎性因子，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果不僅反應(yīng)二者在CHF的發(fā)生發(fā)展過程中起著重要的作用，同時隨著病情的進(jìn)展，在血清的中敏感反應(yīng)，亦可作為評價心功能等級和治療效果的一個指標(biāo)。隨著對炎性因子在CHF發(fā)病機(jī)制研究的逐步深入，抗細(xì)胞因子治療將會成為臨床治療CHF的一個嶄新的方案。

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