高位臂叢神經撕脫傷大鼠血清及腦脊液中髓鞘堿性蛋白的動態變化

翟饒生，宋智奇

(佳木斯大學附屬第一醫院，黑龍江佳木斯154003)

臂叢神經高位撕脫傷常見多發，預后不良，后果嚴重，是一種能夠嚴重致殘的外傷[2]。該類外傷又可分為根性撕脫傷和非根性撕脫傷。正確判斷這兩類損傷對疾病診斷和手術方法的選擇意義重大。但是，該類神經損傷癥狀復雜多樣，癥狀和體征上的診斷方法尚不確切[3]。而影像學檢查受限于清晰度，分辨率，血腫干擾等各種局限性，仍不能應用于這兩類損傷的鑒別診斷。本實驗擬通過模擬臂叢神經高位撕脫傷，制造出根性撕脫傷和非根性撕脫傷兩類不同的動物模型，于傷后不同時間定量測定其血清和腦脊液中MBP的含量變化，探尋其變化規律，為探索一種非影像學的臂叢神經高位撕脫傷的鑒別診斷方法提供參考。

1 材料與方法

1.1 實驗動物分組

健康Wistar大鼠，數量39只，體重170～230g，成年，雌性。隨機分為13組，每組3只，其中包括臂叢神經撕脫傷6組，高位臂叢神經非根性撕脫傷6組以及對照組1組。實驗12 組觀察時間為 12h，36h，3d，7d，14d，21d。實驗動物由佳木斯大學的動物實驗中心提供。

1.2 動物模型制備和標本采集

大鼠用1%戊巴比妥鈉麻醉(30mg/kg，腹腔注射)。實驗大鼠俯臥[4]，取頸后正中切口，逐層分離，暴露臂叢神經干部，逆行探查至臂叢神經出椎間孔處。臂叢神經撕脫傷6組用顯微止血鉗鉗夾撕脫造模;高位臂叢神經非根性撕脫傷6組先用一把顯微止血鉗鉗夾神經出椎間孔處，牢固把持，再用另一顯微止血鉗撕脫該神經遠側造模。逐層縫合，分籠喂養。于造模后不同時間點采集標本。參照富宏[5]的經皮穿刺延髓池抽取大鼠腦脊液的方法采集腦脊液;斷頸取血，離心，采集血清。取出標本放－20℃冰箱保存待測。

1.3 MBP檢測及數據處理

用簡易的MBP酶聯免疫吸附定量測定法[6]分別測定腦脊液與血清中的MBP的含量，試劑盒來自于華西醫科大學重組DNA研究室。數據應用SPSS17.0統計學軟件包處理，組內采用配對樣本t檢驗，組間用單因素方差分析。

2 結果

2.1 各組臂叢神經根性撕脫傷MBP含量變化

與損傷前(對照組)相比較，血液及腦脊液的MBP含量在傷后12h、36h、3d與7d各組均有顯著增高，方差分析具有統計學意義(P＜0.01);而在損傷后14d、12d比較各組血液及腦脊液的MBP含量變化未有明顯改變，方差分析不具有統計學意義(P＞0.05)。結果見表1。

表1 臂叢神經根性撕脫傷后不同時間血液及腦脊液MBP含量結果(±s，μg/L)

表1 臂叢神經根性撕脫傷后不同時間血液及腦脊液MBP含量結果(±s，μg/L)

損傷時間 血液MBP含量 腦脊液MBP 含量損傷前12d 1.76±0.99 1.52±0.561.52±0.48 1.53±0.66損傷后12h 3.95±2.03 6.38±2.56損傷后36h 7.06±1.82 7.08±2.34損傷后3d 7.94±2.49 7.59±1.78損傷后7d 9.83±3.14 9.04±2.36損傷后14d 4.96±1.76 3.93±1.01損傷后

2.2 各組高位臂叢神經非根性撕脫傷MBP含量變化

與損傷前(對照組)相比較，血液中的MBP含量在傷后12h、36h、3d與7d各組均有顯著增高，方差分析具有統計學意義(P ＜0.01);而腦脊液的MBP含量在傷后12h、36h、3d與7d各組未有顯著增高，無統計學意義(P＞0.05)。在損傷后14d、12d相比較各組血液的MBP含量變化亦未有明顯改變，無統計學意義(P＞0.05)。結果見表2。

表2 臂叢神經高位非根性撕脫傷后不同時間血液及腦脊液MBP含量結果(±s，μg/L)

表2 臂叢神經高位非根性撕脫傷后不同時間血液及腦脊液MBP含量結果(±s，μg/L)

損傷時間 血液MBP含量 腦脊液MBP 含量損傷前12d 1.80±0.96 1.57±0.621.55±0.47 1.55±0.63損傷后12h 4.04±1.98 1.47±0.55損傷后36h 7.12±1.78 1.49±0.58損傷后3d 10.07±3.07 1.53±0.59損傷后7d 8.08±2.43 1.54±0.46損傷后14d 5.08±1.72 1.51±0.69損傷后

3 討論

MBP在正常髓鞘組織中大量表達，是髓鞘組織中的主要蛋白質之一，正常情況下其特異性存在于神經組織中。在各種類型中樞神經系統損傷中，MBP可進入腦脊液和血液，并且腦脊液和血清中MBP含量與髓鞘破壞程度和范圍呈正相關[7]。因此，MBP可作為判斷中樞神經系統實質性損害程度的特異指標。有文獻報道腦脊液中MBP水平高低可反映腦實質損害的程度，血清中MBP水平則反映了血腦屏障損害的情況。臂叢神經是上肢外周神經的唯一總根系，是脊髓司上肢感覺運動的通路。臂叢神經的各種損傷均可造成嚴重后果，致殘率很高。其中的臂叢神經高位撕脫傷常見，治療棘手，諸多學者探索了各種治療方法[8]。臂叢神經高位撕脫傷又可分為累及神經根型和未累及神經根型。這兩種類型的治療方法及預后有所差別。選擇正確的治療方案，其前提是明確診斷，因此早期鑒別這兩種損傷即具有確切的臨床實用價值。臂叢神經具有交錯混雜，盤根錯節的解剖學特點[9]。累及高位臂叢神經的撕脫傷，因其解剖學特點而致其癥狀復雜多樣。而現階段醫學影像學的發展尚不足以提供一種確切有效的影像學診斷參考。如核磁共振檢查，對脊髓組織的損傷，血腫，水腫有明確信號。但是，如果是臂叢神經根性撕脫傷，因其損傷處的血腫，水腫干擾，早期的核磁共振檢查常出現假陰性結果。本實驗即通過對不同類型的實驗性臂叢神經高位撕脫傷動物血液和腦脊液中特異性因子MBP的檢測，探尋在臂叢神經根性撕脫和非根性撕脫中MBP的表達特點，進而討論一種鑒別兩種臂叢神經損傷的檢驗方法。大鼠臂叢神經的諸多解剖和生理特征與人類相似，可用于制造臂叢神經高位撕脫傷動物模型。CarlstedtT經頸椎后入路臂叢神經高位撕脫傷造模，該方法可靠確切，應用廣泛。本實驗即將該方法略加改進，造模大鼠分為兩組，即一組為常規臂叢神經根性撕脫傷組，而另一組于椎間孔處鉗夾臂叢神經予以保護，再造臂叢神經非根性高位撕脫傷模型。如此即獲得有效可靠的動物模型。在取樣階段參考了富宏的經皮穿刺延髓池抽取大鼠腦脊液的方法采集腦脊液，該方法對大鼠小腦延髓池進行解剖定位，采集腦脊液的成功率較高。本實驗結果中:臂叢神經根性撕脫傷組與損傷前(對照組)相比較，血液及腦脊液的MBP含量在傷后12h、36h、3d與7d各組均有顯著增高，方差分析具有統計學意義。而高位臂叢神經非根性撕脫傷組與損傷前(對照組)相比較，血液中的MBP含量在傷后12h、36h、3d與7d各組均有顯著增高，方差分析具有統計學意義;而腦脊液的MBP含量在傷后12h、36h、3d與7d各組未有顯著增高，方差分析不具有統計學意義。作者分析認為，出現這種差異的原因在于:①臂叢神經根性撕脫傷可累及神經根管，硬脊膜以內，MBP可釋放進入腦脊液;而高位臂叢神經非根性撕脫傷則不會影響到硬脊膜。②該兩組損傷中的MBP皆可通過椎管靜脈系統吸收入血。因此，高位臂叢神經撕脫傷后，腦脊液中MBP的含量可以作為鑒別該損傷是否累及神經根的一項實驗室檢驗指標。當然，其確切的臨床實用價值尚待進一步討論。

[1]Carlstedt T.Nerve fibre regeneration across the peripheral－ central transtitional zone[J].J Anatomy，1997，190:51-56

[2]劉勁睿，李元朋，張明石，等.彌漫性軸索損傷(DAI)預后與髓鞘堿性蛋白(MBP)的相關性研究[J].黑龍江醫藥科學，2009，32(6):9-10

[3]魯向鋒，邱洪斌，汪志國，等.脂多糖致胎鼠腦白質損傷探討[J].黑龍江醫藥科學，2004，27(3):14

[4]楊成林，張信英.大鼠脊神經根再植入脊髓治療臂叢撕脫傷的實驗研究[J].中華顯微外科雜志，2001，2(2):137

[5]富宏，陶迎紅，王學美，等.經皮穿刺延髓池抽取兔和大鼠腦脊液的方法[J].中國比較醫學雜志，2006，16(11):684-687

[6]陳俊杰，王若菡，李昌隆，等.簡易的髓鞘堿性蛋白及其抗體酶聯免疫吸附同步定量測定法[J].華西醫科大學學報，1995，26(2):125-130

[7]毛慶，陳俊杰，李能德，等.血清髓鞘堿性蛋白對急性閉合性顱腦損傷程度的判斷價值[J].華西醫科大學學報，1995，26(2):135-137

[8]顧玉東，吳敏明.臂叢神經根性撕脫傷的顯微外科治療[J].中華顯微外科雜志，1987，10(5):132

[9]Mukherjee A，Vagt RF，Linthicum DS.Measurement of myelin basic protein by radioimmunoassay in closed head trauma，multiple sclerosis and other neurological disease[J].Clin Biochen，1985，18(5):304