COULTER-LH750血液分析儀測定網(wǎng)織紅細(xì)胞應(yīng)用評價

丁利勝,徐瑞軍,管靈奶,方麗娟,趙洪燦,童向民

(1.杭州市蕭山區(qū)第四人民醫(yī)院;2.杭州市第一人民醫(yī)院;3.浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院,浙江 杭州 310000)

網(wǎng)織紅細(xì)胞(reticulocyte,Ret)是計數(shù)是觀察人體骨髓紅系細(xì)胞造血功能重要指標(biāo)也是臨床貧血及有關(guān)疾病治療療效的重要觀察指標(biāo)[1]。人工顯微鏡鏡檢法受到技術(shù)人員形態(tài)學(xué)水平、責(zé)任性等多種因素影響,所以穩(wěn)定性和重復(fù)性差[2]。近年來,隨著全自動血液分析儀檢測技術(shù)的不斷發(fā)展,為RET檢測提供了科學(xué)的方法,COULTER LH750全自動血液分析儀利用激光和核酸染色技術(shù)同時對上萬個紅細(xì)胞進(jìn)行分析自動得出RET結(jié)果,但其結(jié)果與性能究竟如何?需要進(jìn)一步分析與評價

一、材料和方法

1.病例來源。隨機(jī)抽取門診、病房EDTA-K2抗凝的血常規(guī)標(biāo)本80份,每份標(biāo)本均進(jìn)行手工網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)和LH750儀器RET檢測。

2.實驗方法。取溶血性貧血患者標(biāo)本(RET>5.0%)、健康體檢者標(biāo)本、再生障礙性貧血患者標(biāo)本(RET<0.5%)各一份EDTA-K2抗凝血備用。用于儀器高、中、低值RET檢測精密度及線性范圍評價。批內(nèi)精密度:取患者高、中、低值RET標(biāo)本各一份,每份儀器連續(xù)測定10次,計算±s及變異系數(shù)(CV);批間精密度:每天同一時間用配套原裝質(zhì)控品檢測RET,連續(xù)測定22天,計算±s及CV。儀器穩(wěn)定性檢測:用1 份抗凝血樣本,分別于即時,1、2、4、8、24、48、72h 測定 RET,要求每個時間段測三次求均值。攜帶污染率檢測:選取高值樣本(6.51%)連續(xù)測定3次,再檢測低值樣本(0.52%)連續(xù)測定3次,按照公式計算攜帶污染率(%)=[(L1-L3)/(H3-L3)×100%]。線性范圍檢測:用生理鹽水將RET高值樣本分別作100%、80%、60%、50%、40%、20%、10%、5%稀釋,每個稀釋度平行測3次結(jié)果,取均值。每一稀釋度測得的RET絕對值與理論值比較,以理論值為X軸,實測值為Y軸,得出線性回歸方程。

1.精密度。(1)批內(nèi)精密度。LH750測定高、中、低 Ret值抗凝血樣本,每份標(biāo)本連續(xù)測定10次,其批內(nèi)精密度結(jié)果見表1。(2)批間精密度。用原裝高值質(zhì)控品檢測RET,連續(xù)測定22天,計算±s及CV。其批間精密度結(jié)果見表2。(3)

二、結(jié) 果

表1 三分標(biāo)本測定10次結(jié)果及CV值

表2 批間精密度測定結(jié)果(CV%)

儀器結(jié)果穩(wěn)定性和攜帶污染率。在2-8℃條件下,48h內(nèi)Ret測定值無明顯變化,CV<1%,72h略有降低。攜帶污染率:選取高值樣本(6.51%)連續(xù)測定3次,再檢測低值樣本(0.52%)連續(xù)測定3次,攜帶污染率為0.33%。(4)線性范圍。以理論值為X軸,以實測值為Y軸,得出回歸方程為Y=0.993X+7.26。(5)與手工結(jié)果比較及相關(guān)性。LH750測定Ret的結(jié)果與人工顯微鏡計數(shù)法的結(jié)果比較(t=1.739,P>0.05),結(jié)果無統(tǒng)計學(xué)差異,兩種結(jié)果的相關(guān)性良好(r=0.98,P<0.01)。

三、討 論

全自動COULTERLH750血細(xì)胞分析儀是采用單個流式通道進(jìn)行細(xì)胞及網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測,將網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)殘存的RNA著色,并結(jié)合儀器VCS(容量、電導(dǎo)、激光散射)等技術(shù),自動分析30000個紅細(xì)胞,大大提高了網(wǎng)織紅細(xì)胞分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。有報道提示,全自動法及顯微鏡法(均抗凝標(biāo)本)Ret檢測間差異有統(tǒng)計學(xué)意義[3],但也有相反報道[4]。從我們的實驗結(jié)果表明,LH750自動檢測與人工顯微鏡法計數(shù)Ret比較,相關(guān)性良好。批間重復(fù)性實驗顯示準(zhǔn)確可靠,其變異系數(shù)和攜帶污染率小。

人工顯微鏡法不適合大標(biāo)本量開展,LH750全自動分析儀是在封閉的系統(tǒng)中進(jìn)行,受外來因素影響少且分析的細(xì)胞數(shù)量多,其結(jié)果精密度、準(zhǔn)確度較高,更能滿足現(xiàn)代醫(yī)院的批量檢測。不僅如此,LH750血液分析儀還提供了不成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞分?jǐn)?shù),平均網(wǎng)織紅細(xì)胞體積,高、中、低熒光網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比等多項新型參數(shù),為臨床骨髓造血恢復(fù)、貧血治療療效等提供有效指標(biāo)。

綜上所述,對COULTERLH750全自動血液分析儀與傳統(tǒng)人工顯微鏡法相比優(yōu)越性明顯,能取代人工顯微鏡檢查。

[1]羅春麗.臨床檢驗基礎(chǔ)[M].第二版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2007.32.

[2]張采芬,李鑒峰.網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)、絕對值、網(wǎng)織紅細(xì)胞指數(shù)的臨床意義[J].中國實用內(nèi)科雜志,2002,22(1):31-33.

[3]趙燕田.儀器法與目測法網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)的比較[J].現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2005,20(5):38.

[4]王沈馨,鄭勝香.兩種網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)方法的比較[J].寧夏醫(yī)學(xué)雜志,2006,28(1):71-72.