勞華毅,張靖巖,蔣 凱,張 峰,佟立權
(哈爾濱醫科大學附屬第五院普外科,黑龍江大慶163316)
小腸缺血再灌注(I/R)損傷,如腸系膜血管栓塞、腸扭轉及小腸移植及休克等,是導致患者不能順利康復的關鍵。既往研究表明L-carnitine對腎臟[1]I/R損傷有保護作用,但對小腸的I/R損傷研究尚未見報道。本研究探討L-carnitine對大鼠小腸I/R損傷的影響。
1.1 試劑和動物:雄性Wistar大鼠30只,體質量(250±30)g,[清潔級別,上海斯萊克實驗動物有限公司許可證號:SCK(滬)2012-0002]。L-carnitine注射劑(山東瑞陽制藥有限公司);SOD和MDA(上海越研生物科技有限公司)。DAO試劑盒(南京建成生物工程研究所)。BAX和BCL-2抗體(北京中山生物技術有限公司)。
1.2 動物分組及處理:動物隨機分3組(n=10):假手術組(S組)、缺血再灌注組(I/R組)、L-carnitine干預組(L組)。術前12 h禁食,自由飲水。I/R組術前10 min給予等量0.9%氯化鈉注射液。L組成模術前10 min于股靜脈緩慢推注L-carnitine(200 mg/kg)。S組僅切開腹部,游離腸系膜上動脈而不阻斷,按文獻方法制備小腸I/R模型[2]。腹腔注射10%水合氯醛3 mL/kg麻醉后,腹正中線切開,夾閉腸系膜上動脈根部1 h后,再灌注3 h,再次麻醉后,下腔靜脈采血5 mL,注入離心管,然后立即活殺取材。
1.3.1 血清DAO,MDA及SOD測定:按試劑盒說明書操作。
1.3.2 病理形態學檢查:冰凍機切片后,行HE染色。
1.3.3 Western blot法檢測:BAX及BCL-2蛋白表達。
1.4 統計學分析:采用SPSS18.0統計軟件進行統計學處理,結果以均數±標準差 (±s)表示,采用單因素方差分析。
2.1 各組血清SOD、MDA及DAO水平:與S組相比,I/R組血清SOD值明顯降低(P<0.05),MDA及DAO值明顯升高(P<0.05),與I/R組相比,L組各項指標均明顯改善(P<0.05)(表1)。

表1 血清SOD,MDA及DAO的變化Table 1 The serum concentrations of SOD,MDA and DAO(x ± s,n=10)
2.2 小腸組織形態學改……