Wnt2在肝細胞肝癌中的表達及對HepG2細胞增殖的影響

吳 堃，李 輝，朱卓立，李生偉

(重慶醫科大學附屬第二醫院肝膽外科，重慶400010)

肝細胞肝癌是我國最常見的惡性腫瘤之一。研究肝癌發病過程中相關基因的相互作用不僅有助于更深層理解肝癌發病機制，且有助于發現靶向治療的新靶點。

Wnt通路是由一系列癌基因和抑癌基因編碼的蛋白質組成，其在調節胚胎發育與腫瘤發生、發展等關鍵的生理、病理過程中起重要作用［1］。Wnt2是Wnt家族中的成員，近年來諸多研究已證實，Wnt2與結直腸癌、胃癌、食管鱗狀細胞癌、惡性胸膜間皮瘤、乳腺癌、膠質瘤和惡性黑色素瘤等的發生，發展有關［2－8］。

本研究探討Wnt2在原發性肝細胞肝癌(Hepatocellular carcinoma，HCC)中的表達情況。同時，采用Wnt2基因特異性siRNA轉染的方法，抑制人肝癌HepG2細胞中該基因的表達，以探討Wnt2基因對腫瘤細胞的影響。

1 對象與方法

1.1 研究對象

收集重慶醫科大學附屬第二醫院肝膽外科2010年11月—2011年10月間住院手術切除肝癌和配對癌旁組織(緊鄰癌組織)56對(經病理學證實為原發性肝細胞性肝癌)，同時收集正常肝組織20份(所獲標本均獲得重慶醫科大學倫理委員會批準書及患者知情同意書)。新鮮組織在手術離體后立即去掉壞死組織、血塊。將收集的標本分為2份，1份于30 min內以液氮冷凍，并置于－80℃低溫冰箱保存備用。另1份放入10%甲醛固定。人肝癌HepG2細胞由重慶醫科大學附屬第二醫院中心實驗室所保存。

1.2 主要試劑

Trizol試劑盒、反轉錄試劑盒和SYBR?Green試劑盒(TAKARA公司);免疫組化試劑盒及DAB顯色劑(重慶邁凱科技有限公司);Wnt2多克……