子宮內膜異位癥不孕患者卵泡液VEGF的變化及意義

李建青，丁鴻燕，葉銀才

(1.平陽縣第二人民醫院檢驗科，浙江 平陽 325405;2.溫州醫學院附屬第一醫院檢驗科，浙江 溫州 325000)

子宮內膜異位癥常見于育齡期婦女，常發生在卵巢，是婦女不孕的常見原因，發病率為5%～10%[1]。子宮內膜異位癥引起不孕的機制至今尚未完全闡明，其典型表現為內膜樣細胞在子宮以外的地方定植、生長，尤以卵巢多見。有研究表明，血管內皮生長因子(VEGF)參與子宮內膜異位癥患者異位內膜生長并導致患者不孕[2-4]，這些研究均檢測的是血清和腹腔液中的VEGF水平。有研究表明，血清和腹腔液中VEGF水平也是惡性腫瘤發展的關鍵因子[5]。卵泡是卵子發育和生長的地方，卵泡液是卵子發育的微環境。有研究表明，子宮內膜異位癥會導致卵母顆粒細胞功能異常、卵母細胞的質量下降、優勢卵泡減少，致使受精、著床率下降。因此，測量卵泡液中的VEGF水平比血清和腹腔液更能說明問題[6]。本研究比較子宮內膜異位癥不孕患者與其他原因導致的不孕癥患者在促排卵后卵泡液及血清中VEGF的水平，以期為臨床提供有價值的指標。

材料和方法

一、研究對象

研究組為20例子宮內膜異位癥不孕患者(內異癥組)，來自溫州醫學院附屬第一醫院生殖中心，年齡(32±3)歲。對照組為其他非子宮內膜異位癥不孕患者20例，年齡(29±2)歲，無其他內分泌疾病。

二、方法

1.絨毛膜促性腺激素(HCG)促排卵法 于月經周期監測血清雌激素水平，對有一定雌激素水平試驗對象肌肉注射HCG 5000～10000 IU 1～2 d促進患者排卵。

2.標本的收集 2011年1至10月對20例內異癥組患者和20例對照組患者在同一生理周期HCG促排卵后，于溫州醫學院附屬第一醫院生殖中心取卵室進行穿刺取卵泡液，收集不含血卵泡液。卵泡液采用離心法(150×g，10 min)去除細胞等有形成分，并冷凍保存。同時采血5 mL于無抗凝劑管中，1400×g離心15 min，取血清置冷凍環境保存。

3.血清和卵泡液VEGF的測定 人VEGF定量酶聯免疫吸附試驗(ELISA)試劑盒(雙抗體夾心法)由深圳依諾金生物科技有限公司提供，嚴格按照說明書操作。

三、統計學方法

采用SPSS 19.0統計軟件進行分析，計量資料比較用t檢驗，相關分析采用Pearson分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

結 果

一、血清和卵泡液VEGF檢測

內異癥組患者血清和卵泡液VEGF水平均顯著高于對照組(P＜0.001)。內異癥組和對照組患者的卵泡液VEGF水平均高于血清(P＜0.001)。見表1。

表1 內異癥組和對照組患者VEGF水平(，ng/L)

表1 內異癥組和對照組患者VEGF水平(，ng/L)

注:與對照組比較，*P＜0.001;與血清VEGF水平比較，#P ＜0.001

組別 例數 血清 卵泡液對照組 20 56.65 ±26.14 432.99 ±243.87#內異癥組 20 87.05 ±48.26* 716.32 ±264.26*#

二、卵泡液和血清VEGF水平對子宮內膜異位癥不孕的診斷價值

1.卵泡液受試者工作特征(ROC)曲線下的面積較血清大，分別為0.806和0.644。見圖1。

2.卵泡液和血清VEGF取判斷限(cut off值)分別為618.1和53.7 ng/L時最為敏感，卵泡液VEGF敏感性和特異性明顯高于血清VEGF。見表2、表 3。

3.卵泡液與血清VEGF分別在各自特定的cut off值下其敏感性、特異性、陽性預測值和陰性預測值不同，卵泡液VEGF各值明顯高于血清。見表4。

圖1 卵泡液和血清VEGF敏感性、特異性分析

表2 卵泡液VEGF各Cut-off值對應的敏感性和特異性 (%)

表3 血清VEGF各Cut-off值對應的敏感性和特異性 (%)

表4 卵泡液和血清在特定的Cut-off值下敏感性、特異性、陽性預測值和陰性預測值對比 (%)

討 論

子宮內膜異位癥是導致患者不孕的原因之一，其具體機制未明，目前認為可能VEGF、性激素、促紅細胞生成素(EPO)、腫瘤壞死因子α等多種因素參與其中，臨床上常用糖類抗原125(CA125)來檢測，但此指標影響因素較多，特異性、敏感性差，其異常表達也見于卵巢腫瘤，僅可作為臨床篩查、療效觀察的輔助指標[2，7-9]。

VEGF是一種信號蛋白，屬于血小板源性生長因子家族，具有促進胚胎新生血管形成的作用，有增殖、抑制增殖、趨化和促分化作用，是子宮內膜異位癥發展的關鍵因子，也是惡性腫瘤發展的關鍵因子[5]。有研究表明，子宮內膜異位癥患者血清VEGF水平與1985年美國生育學會修訂的子宮內膜異位癥分期標準(r2AFS)呈正相關(P＜0.001)[8]。也有學者研究發現，腹腔液 VEGF水平在子宮內膜異位癥呈反應性升高[10]。本研究所得結果顯示，內異癥組患者卵泡液和血清VEGF水平均顯著高于對照組(P＜0.001)，卵泡液中VEGF水平明顯高于血清(P＜0.001)，且對VEGF診斷更加敏感。又有研究表明，卵泡液中VEGF的水平直接影響卵母細胞的質量，并影響妊娠的結局[11-12]。因此我們認為，子宮內膜異位癥引起卵泡中VEGF水平升高，使卵泡質量下降，是造成不孕的一個重要的內在原因。卵泡液中VEGF的濃度是卵泡質量的直接反映，較血清VEGF濃度(受全身各相關部位產生的VEGF影響)更能反映和影響疾病的情況。監測卵泡液中VEGF的水平，對治療子宮內膜異位癥引起的不孕有著重要的臨床指導意義，對臨床診斷具有輔助參考價值。

綜上所述，子宮內膜異位癥不孕患者卵泡液中的VEGF水平較血清更能反映疾病的情況，卵泡液中VEGF含量的改變在臨床上對子宮內膜異位癥不孕的診斷更具參考價值。

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