葉汝萍(云南省保山市騰沖縣人民醫院檢驗科 679100)
當瘧疾患者做血細胞分析時,因紅細胞內寄生的瘧原蟲不被溶血劑溶解破壞,又有一定的形態及密度,會被儀器當做體積大小類似的血球顆粒來檢測計數,從而影響血細胞檢測結果[1]。作者收集了52例瘧疾患者的血細胞分析檢測結果,對白細胞、淋巴細胞百分比、單核細胞百分比、血紅蛋白及血小板等數據進行了分析觀察,現將結果報道如下。
1.1 一般資料 2011年7月至2012年12月本院診療的門診及住院瘧疾患者52例,其中男46例,女6例,年齡3~53歲。
1.2 儀器與試劑 希森美康Sysmex自動血細胞分析儀XE-2100型。所用稀釋液、鞘液、清潔劑、嗜堿性細胞溶血素、白細胞分類溶血劑、白細胞分類染液、有核紅細胞溶血素、有核紅細胞染色液、幼稚細胞溶血素、血紅蛋白溶血素等均為儀器配套試劑,質控品為佰樂(BIO-RAD)提供。
1.3 檢測方法 采集被檢者靜脈血2mL于乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝管中,顛倒混勻,按常規方法在XE-2100分析儀上做血細胞五分類檢測,同時做瘧原蟲抗原快速檢測試驗,對陽性者涂制厚、薄血膜行瑞氏染色后油鏡觀察,查到瘧原蟲為確診。所有實驗按操作規程進行。
52例瘧疾樣本中有間日瘧44例,惡性瘧8例。其中白細胞正常37例(71.2%),減少11例(21.2%),增高4例(7.7%)。白細胞分類中,淋巴細胞百分比正常17例(32.7%),減低28例(53.8%),增高4例(7.7%),儀器出現懷疑或警示信息11例(21.2%)。單核細胞百分比正常21例(40.4%),增高24例(46.2%),減低4例(7.7%)。白細胞無分類結果的3例(5.8%),出現白細胞異常散點圖4例(7.7%),此二者(共7例)均為間日瘧。紅細胞計數正常38例(73.1%),減少10例(19.2%),增高4例(7.7%)。血紅蛋白正常37例(71.2%),減少10例(19.2%),增高5例(9.6%)。血小板正常9例(17.3%),減少43例(82.7%),無1例增高。血小板直方圖異常42例(80.8%),儀器警示:血小板異常直方圖者35例(67.3%),平均血小板體積、血小板分布寬度、大血小板比率無結果9例(17.3%)。
當瘧疾患者做血細胞分析時,由于部分紅細胞中含有瘧原蟲的環狀體、滋養體或裂殖體、配子體,它們不被溶血劑溶解、破壞,又有自身的形態結構,在WBC/BASO通道中,隨著寄生的紅細胞通過計數小孔時,引起2個電極間射頻電阻的改變(正常紅細胞無此改變),被儀器當做裸核顆粒計數入白細胞數中,使其高于真值[2-3]。在DIFF通道中,瘧原蟲從溶解的紅細胞中釋放出來,核酸部位與染料結合,經激光照射產生一定的熒光強度信號,被儀器當做白細胞顆粒計數在體積大小和形態結構類似的細胞群中,從而干擾白細胞分類結果[4-5]。如果瘧原蟲密度較高,含大量的大滋養體、裂殖體或配子體時,對儀器干擾就大,會出現無白細胞分類結果的情況,儀器出現警示信息。該儀器對紅細胞和血小板的計數和分析采用電阻抗法進行。血樣經儀器稀釋后送入紅細胞樣品室中,通過鞘流技術處理送入紅細胞或血小板檢測器,細胞顆粒通過計數小孔,引起2個電極間直流電阻改變,根據細胞體積的大小來識別細胞類型,并以脈沖信號記錄下來,進而得到紅細胞和血小板數據和直方圖。
瘧疾患者發病初期,進入紅細胞內的瘧原蟲數量有限,紅細胞受損不多,因此紅細胞和血紅蛋白多數正常。隨著病程的進展,被瘧原蟲破壞的紅細胞不斷增多,紅細胞碎片和瘧原蟲代謝產物刺激機體,引起肝脾充血腫大,機體免疫反應增強,晚期網狀內皮細胞大量增生,致使脾功能亢進。長期多次感染者,游離的裂殖子及瘧色素引起單核細胞增生,因此,病程長者逐步出現貧血(紅細胞和血紅蛋白均減低)、單核細胞增多、白細胞和血小板減低的表現。血小板減少的原因主要是脾亢時脾臟的過分阻留作用。由于脾臟是人體的貯血器官,正常人脾內有約1/3血小板及部分淋巴細胞阻留在脾臟。當脾臟有病理性顯著腫大,脾功能亢進時,會有大量的血小板(50%~90%)及淋巴細胞在脾內阻留,也會有30%的紅細胞在脾內滯留,部分被單核-巨噬細胞吞噬,導致周圍血中血小板明顯減少,淋巴細胞和紅細胞也有減少。破壞的紅細胞碎片也會被儀器當做較大體積的血小板顆粒計數在血小板中,干擾血小板分析,導致血小板直方圖異常,出現警示信息或無法測出平均血小板體積、血小板分布寬度及大血小板比率的結果。
因此在做血常規檢測中,除臨床懷疑瘧疾,必須做血涂片檢查瘧原蟲以外,如果發現檢測結果中血小板明顯減少、直方圖異常或儀器出現懷疑或警示信息的同時,白細胞分類或散點圖也有異常或報警信息,則務必做血涂片復審、分類,尤其對瘧疾高發季節的發熱患者血樣,一定要仔細查找有無瘧原蟲寄生,嚴防漏診或誤診。
[1] 樂家新,周建山,蘭亞婷.血細胞分析儀檢測原理[J].中華檢驗醫學雜志,2004,27(3):205-208.
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[3] 張旭凱,陸海峰.五分類血液細胞分析儀的原理及應用[J].中國醫療器械信息,2006,12(10):52-56.
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[5] 梁廣佳,陳佳冰.BC-5300五分類血液細胞分析儀應用體會[J].中國醫療器械信息,2012,18(1):26-27.