神經生長因子在胃腺癌組織中的表達及其與神經受浸的相關性研究

胡海霞，李偉，熊正文，李宏偉，黃勇，蘇紅

（中國人民解放軍第251醫院病理科，河北張家口075000）

神經生長因子在胃腺癌組織中的表達及其與神經受浸的相關性研究

胡海霞，李偉，熊正文，李宏偉，黃勇，蘇紅

（中國人民解放軍第251醫院病理科，河北張家口075000）

目的探討神經生長因子在胃腺癌組織中的表達及神經受浸的情況，并分析其與臨床病理因素的關系。方法采用免疫組織化學(EnVisionTM)法檢測神經生長因子（NGF）在胃腺組織及癌旁組織中的表達。結果NGF在癌旁組織中的陽性表達率為6.66%，其在胃腺組織中的陽性表達率為51.25%，差異有統計學意義(P＜0.01)；NGF的陽性表達率與患者年齡、腫瘤直徑、組織學分級及浸潤深度無關，差異無統計學意義(P＞0.05)，但與淋巴結轉移及神經受浸有關，差異有統計學意義（P＜0.01）。結論NGF在胃腺組織中過表達，預示著患者預后不良及神經易受浸。

神經生長因子；胃腺癌；神經受浸；免疫組織化學

胃癌的發病率在世界上占所有腫瘤的第二位，是我國最常見的惡性腫瘤之一[1]。其發生、發展嚴重地影響著人們的生活水平及身心健康，特別伴有癌性疼痛，更易造成患者負面情緒的產生。然而，癌性疼痛發生的機制是多方面的，其中神經受浸比較常見。為了研究與神經受浸有關的因素，本文欲探討神經生長因子(NGF)在胃腺癌組織中的表達及其與臨床病理因素的關系。

1 材料與方法

1.1 一般來源收集2005年4月至2011年12月期間我科存檔患者資料，并經臨床病理醫生診斷為胃腺癌80例，同時選取了距腺癌0.5 cm處的癌旁組織30例。患者年齡32～87歲，平均57歲，＜57歲者24例，≥57歲者56例；腫瘤直徑＜4 cm者20例，≥4 cm者60例。組織學分級[2]：高分化腺癌32例，要求腺樣結構超過腫瘤的95%；中分化腺癌29例，要求腺樣結構50%～95%；低分化腺癌19例，要求腺樣結構5%～50%；未分化癌要求腺樣結構＜5%。淋巴結有轉移者41例，無轉移者39例；神經有浸潤52例，神經無浸潤28例。癌組織浸潤深度：黏膜下層9例，肌層13例，漿膜層58例。

1.2 主要試劑和方法兔抗人即用型多克隆抗體NGF及相關配套試劑盒均購自福州邁新生物技術有限公司。采用免疫組織化學法EnVisionTM染色組織切片，實驗操作按說明書進行。以公司提供的陽性染色切片作為陽性對照，用磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗為陰性對照。

1.3 結果判斷NGF陽性著色以細胞質呈現黃色或棕黃色顆粒為準。陽性判定標準[3]：按染色強度及陽性細胞數量進行半定量積分法分級。著色程度分為：基本不著色、染色與背景相似者為0分；著色淺、略高于背景者為1分；中度著色、明顯高于背景者為2分；高強度染色、著深棕色者為3分。陽性細胞數量分為：陽性細胞數＜10%為0分；10%～25%為1分；26%～50%為2分；＞50%為3分。每張切片在高倍鏡(10×40)下取5個視野計數200個細胞。兩項相乘：0～2分為陰性(-)，≥3分為陽性(+)。

1.4 統計學方法相關資料數據采用統計分析軟件SPSS17.0處理，計數資料運用χ2檢驗分析，檢驗水準以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 NGF在胃腺及癌旁組織中的表達NGF在30例癌旁組織中陽性表達2例，陰性表達28例，陽性率為6.66%；而在80例胃腺組織中陽性表達41例，陰性表達39例，陽性率為51.25%。經χ2檢驗分析，NGF在兩者中的表達差異有統計學意義(χ2=18.21，P＜0.01)，見表1和圖1、圖2。

表1 NGF在胃腺癌及癌旁組織中的表達（例）

圖1 NGF在癌旁組織中的表達（EnVisionTM×100）圖2NGF在胃腺癌組織中的表達（EnVisionTM×100）

2.2 NGF的表達與胃腺癌臨床病理因素的關系NGF在淋巴結轉組中的陽性表達率為73.17%，而在無淋巴結轉移組中的陽性表達率為28.20%，差異有統計學意義(P＜0.01)；NGF在神經受浸組中的陽性表達率為73.07%，而在無神經受浸組中的陽性表達率為10.17%，差異有統計學意義(P＜0.01)；但NGF的陽性表達與患者年齡、腫瘤直徑、組織學分級、癌組織浸潤深度無關，差異無統計學意義(P＞0.05)，見表2。

表2 NGF的表達與胃腺癌臨床病理因素的關系（例）

3 討論

NGF是對神經組織有營養活性的一大類肽類物質的總稱，它由α、β、γ三種亞基構成。NGF受體分為高親和力TrkA受體和低親和力p75受體，前者為功能受體，其主要功能是通過信號通路MEK/MAPK激活抗凋亡蛋白來實現某些腫瘤細胞的生長；后者為輔助受體，其可增強NGF與TrkA的結合力，調節TrkA的信號傳導，并與細胞程序死亡相關，可誘導腫瘤細胞的凋亡[4]。有資料顯示，NGF高表達具有促進膽管癌細胞增殖的作用，而在乳腺癌中的表達隨著腫瘤惡性程度的增高而增高，肝癌組織中NGF的表達明顯高于正常肝組織及肝硬化組織[5-7]。本研究結果表明，NGF在癌旁組織中陽性表達率為6.66%，遠遠低于在胃腺癌組織中陽性表達率為51.25%，推測NGF有可能參與了胃癌的發生。實驗結果進一步顯示，NGF的表達與患者年齡、腫瘤直徑、組織學分級、癌組織浸潤深度無關，而與淋巴結轉移、神經受浸有關。同時，鏡下觀察發現，在神經受浸組織中癌細胞數量明顯多于無神經受浸組織，且陽性表達也較高，這說明神經組織中表達的NGF具有吸引腫瘤細胞運動的趨向性，而腫瘤細胞分泌NGF所形成的濃度梯度誘導神經組織的定向生長，導致腫瘤細胞對神經的浸潤發生。也有學者認為，NGF的嗜神經能力與NGF與其受體結合后促進腫瘤細胞肝素酶的轉錄有關[4]。

總之，NGF參與了胃腺癌發生、發展的過程，其在胃腺癌組織中的過表達更有利于癌細胞浸潤神經。因而，檢測NGF有無過表達，能在一定程度上了解患者病情的進展。但NGF與腫瘤細胞運動的趨向性之間是如何實現的有待研究進一步探討。

[1]陳明凈,翁陽.上皮細胞鈣黏附蛋白與胃癌[J].海南醫學,2009, 20(3):101-104.

[2]哈米霍恩著.虞積耀,崔常才,常曉燕,等譯.消化系統腫瘤病理學和遺傳學[M].北京:人民衛生出版社,2006:131.

[3]駱樹瑜,張劍明,李宏捷,等.腺樣囊性癌嗜神經侵襲中神經生長因子、上皮鈣黏素和鈣結合蛋白A4的表達及意義[J].口腔醫學雜志,2010,45(9):531-534.

[4]李東亮,張朝.基礎神經生物學[M].北京:人民軍醫出版社, 2006:332-336.

[5]郭偉,鄒聲泉.神經生長因子對人膽管癌細胞增殖作用的影響[J].中國普通外科雜志,2005,l4(8):595-598.

[6]Dolle L,Adriaenssens E,EI Yazidi-Belkoura IE,et a1.Nerve growth factor receptor and signaling in breast cancer[J].Curt Cancer Drug-Targets,2004,4(6):463-470.

[7]Ras G,Serafino A,Bellis L,et al.Nerve growth factor involvement in liver cirrhosis and hepatocellular carcinoma[J].World J Gastroentero,2007,13(37):4986-4995.

Expression of nerve growth factor in gastric adenocarcinoma and its correlation with nerve invasion

HU Hai-xia,LI Wei,XIONG Zheng-wen,LI Hong-wei,HUANG Yong,SU Hong.Department of Pathology,the 251stHospital of Chinese PLA,Zhangjiakou 075000,Hebei,CHINA

ObjectiveTo investigate the expression of nerve growth factor(NGF)in gastric carcinoma and the situation of nerve invasion,and analyze the relationship between nerve growth factor and clinicopathological factors.MethodsNGF was detected in gastric carcinoma and paracancerous tissue by immunohistochemistry(EnVisionTM).ResultsThe positive expression rate of NGF was 6.66%in paracancerous tissue and 51.25%in gastric carcinoma,showing statistically significant difference(P＜0.01).The positive expression rate of NGF was not related to age,tumor size,histological classification,infiltrated depth,with no statistically significant difference among them (P＞0.05).The positive expression rate of NGF was related to lymphatic nodes metastasis and nerve invasion,with statistically significant difference(P＜0.01).ConclusionThe over-expression of NGF in gastric carcinoma indicates unfavorable prognosis and nerve invasion.

Nerve growth factor;Gastric adenocarcinoma;Nerve invasion;Immunohistochemistry

R735.2

A

1003—6350（2013）06—0788—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2013.06.0338

2012-11-14)

胡海霞。E-mail：liwei-324@163.com